科研产出
烟草"8306"NtCPS2基因敲除及叶面化学成分改良
《中国烟草学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要:8306是重要的高香气烤烟育种材料,因其腺毛分泌物中含有赖百当化合物而使其杂交后代具有晾晒烟香气特征.为此,本研究利用CRISPR/Cas9技术,对8306中赖百当生物合成途径的关键酶基因NtCPS2进行敲除,获得了gRNA区发生单碱基插入突变导致翻译提前终止的纯合突变体8306-1.与8306相比,该突变株系生长发育正常,腺毛类型和腺毛密度无显著变化;利用GC-MS技术对叶面化学成分进行检测,在8306-1中并未发现8306中所含有的顺冷杉醇和赖百当二醇等赖百当类化合物,而腺毛分泌物的其他主要成分,如西柏三烯一醇、西柏三烯二醇及蔗糖酯的含量与对照相比并无明显变化;RT-PCR检测分析显示,8306-1与8306中MEP途径及二萜生物合成途径的关键基因,如NtDXS、NtDXR、NtCMS、NtGPPS、NtGGPPS、NtCYC、NtCYP71D16等在转录水平上的表达均无明显差异.该研究结果表明,NtCPS2基因敲除能有效降低烟草赖百当类二萜化合物的含量,而对叶面其他化学成分及类萜途径基因表达无明显影响.因此,NtCPS2基因是进行烟草叶面化学成分定向改良的理想靶点,对烤烟高香气育种具有重要意义.
关键词: 烟草 8306 赖百当二萜 NtCPS2 基因敲除
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2019年秋季河南新乡草地贪夜蛾发生调查
《植物保护 》 2020 北大核心 CSCD
摘要:2019年秋季调查了河南省新乡市草地贪夜蛾在不同作物上的发生和为害情况.首次发现草地贪夜蛾幼虫严重为害白菜,同时其还在夏玉米、甘蓝、秋高粱和秋玉米上为害.草地贪夜蛾幼虫种群数量于9月初在夏玉米、白菜和甘蓝上达到高峰,9月中旬在秋高粱和秋玉米上达到高峰,在夏玉米、白菜、甘蓝、秋高粱和秋玉米上高峰期时百株虫量分别为3、24、20、40头和88头.采用探照灯诱集草地贪夜蛾成虫,发现秋季成虫高峰期在9月13日,当日诱集蛾量达95头,且成虫上灯一直持续至11月中旬.最后对2019年秋季草地贪夜蛾幼虫和成虫的发生为害规律进行了讨论,以期为2020年草地贪夜蛾的预测预报和防控提供依据.
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LED光质对青花菜生长及其生物活性物质的影响
《应用与环境生物学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要:光质是影响植物生长发育的重要光环境要素之一.为探究LED光质对青花菜生长和营养品质的影响,以青花菜‘湘绿3号’为试料,设置了红光(R)、蓝光(B)、红蓝光3:1(3RB)、绿光(G)、紫光(P)5种光质处理,并以白光(W)为对照,测定分析了青花菜的生物量、产量以及花球中硫苷、萝卜硫素、维生素C、总酚、原花青素、类黄酮含量和黑芥子酶活性.结果显示,与对照相比,红光、蓝光、红蓝光3:1和绿光处理对青花菜的生物量和产量均未造成显著影响(P> 0.05),紫光处理下生物量显著降低(P <0.05).红光、蓝光和红蓝光3:1处理促进了青花菜花球中硫苷的积累,而绿光和紫光处理抑制了硫苷的积累.红光显著提高了萝卜硫素、维生素C、总酚含量和黑芥子酶活性,蓝光和绿光显著降低了萝卜硫素含量,但显著提高了总酚含量,紫光显著抑制了黑芥子酶活性(P <0.05).相关性分析显示,黑芥子酶活性与萝卜硫素和维生素C含量均具有极显著正相关(P <0.01),推测红光可通过影响维生素C含量,进而影响黑芥子酶活性和萝卜硫素产量. LED光质条件未引起花球中原花青素和类黄酮含量发生显著变化(P> 0.05).采用主成分分析法综合评价LED光照对青花菜生长及花球生物活性物质的影响,结果显示红光处理下青花菜的生长及花球品质综合特性最优,紫光处理下其综合性能最差.本研究表明LED红光利于青花菜花球中萝卜硫素、维生素C、总酚等生物活性物质的积累,结果可为我国高品质青花菜的栽培生产提供理论指导.(图5表2参33)
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作物水氮智能管理系统的设计与验证
《河南农业科学 》 2020 北大核心 CSCD
摘要:为了提高作物水氮动态精准调控,设计了包括硬件和软件的作物水氮智能管理系统.利用站点轮询技术、消息队列技术和P ID控制技术,研发了作物水氮智能灌溉设备;在硬件产品基础上,基于节水灌溉自动化控制技术、灌溉预报技术和水氮决策模型技术,研发了与作物水氮智能灌溉设备相配套的作物水氮智能管理软件系统,实现了作物定时定量精准灌溉施氮、实时预警与智能决策.系统已在冬小麦、夏玉米和夏花生中进行应用,根据作物灌溉制度和施氮方案,智能灌溉作物生长所需的水分和氮肥.该系统操作简单、运行稳定,达到了水氮高效利用的目的.
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低温花生粕粉对小麦面团特性的影响
《食品研究与开发 》 2020 北大核心
摘要:为研究不同添加量的低温花生粕粉对小麦面团特性的影响,采用气相色谱仪和红外光谱扫描分别测定小麦粉和低温花生粕粉的混粉及其面团的脂肪酸组成和蛋白质二级结构,用质构仪测定面团的质构特性,并利用电镜观察面团的内部结构.结果表明:小麦粉和花生粕粉的混粉及其面团中,主要脂肪酸为油酸;随着花生粕粉添加量的增加,面团的硬度、咀嚼性、内聚性和弹性均有不同程度的降低,花生粕粉添加量达到20%时,面团的内聚性和弹性与小麦面团之间无显著差异(P>0.05);花生粕粉、混粉及其面团中,β-折叠含量最高,花生粕粉添加量为15%时,其面团中的α-螺旋、β-转角、无规卷曲含量与小麦面团之间差异不显著(P>0.05);花生粕粉添加量在15%时,小麦面团面筋结构的连续性不受影响.
关键词: 低温花生粕 质构特性 蛋白质二级结构 微观结构 脂肪酸
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水貂阿留申病毒不同密度表位肽的串联表达研究
《中国兽医杂志 》 2020 北大核心
摘要:为比较含有水貂阿留申病毒(ADV)VP2蛋白不同表位密度重组蛋白的抗原性,本研究将抗原表位肽的编码序列进行2、4、6、8重复串联,得到4个表位串联体P2、P4、P6、P8,将其克隆到表达载体pET-30a(+)上,构建4个重组质粒,在大肠杆菌系统中诱导表达;经Western Blot和对流免疫电泳(CIEP)鉴定其抗原性.采用间接ELISA方法对各重组蛋白进行抗原性分析比较.结果显示,成功表达的3个重组蛋白PP4、PP6、PP8均具有良好的抗原性;8段表位肽串联的重组蛋白PP8的抗原性最强.本研究制备的串联重组蛋白为建立ADV血清学诊断方法提供了科学依据.
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禽流感病毒H9N2亚型HA蛋白在水稻胚乳中的稳定、高效表达及活性鉴定
《华北农学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要:为了在体外获得表达量高、储存容易、成本低且免疫活性高的H9N2亚型HA蛋白,利用水稻胚乳表达系统表达HA蛋白.首先,将HA基因根据水稻偏好密码子进行优化,合成到pUC57载体上,通过双酶切、连接将HA基因先后构建到中间载体pMP3和植物表达载体pCAMBIA1300上;再通过电极法将pCAMBIA1300-HA导入到根癌农杆菌EHA105中;然后用农杆菌侵染TP309水稻愈伤组织;最后经潮霉素筛选、分化、生根、移栽至田间种植.利用CTAB法提取叶片基因组DNA,PCR鉴定T0阳性植株;利用Dot Blot和Western Blot检测HA蛋白在水稻胚乳中的表达;提取阳性的T1叶片DNA,通过荧光定量PCR方法筛选纯合植株;利用温汤杀雄剪颖授粉法,将含有HA蛋白的TP309与低谷蛋白水稻杂交;利用Western Blot检测杂交后的T3植株蛋白表达量;利用双抗夹心ELISA方法比较水稻源和昆虫表达HA蛋白的活性.结果显示,成功构建了中间载体pMP3-HA和植物表达载体pCAMBIA1300-HA,且pCAMBIA1300-HA成功导入到根癌农杆菌EHA105中;PCR检测到有66株植株的HA基因成功整合到水稻基因组;Dot Blot和Western Blot检测结果表明,HA蛋白在水稻胚乳中成功表达;利用荧光定量PCR方法,107株T1中筛选到31株纯合植株;Western Blot检测结果表明,杂交后的HA蛋白表达量大幅度提高;双抗夹心ELISA结果证实,水稻胚乳表达的HA蛋白的活性高于杆状病毒-昆虫细胞.
关键词: 禽流感病毒 H9N2 HA蛋白 纯合子 水稻胚乳 活性鉴定
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叶面喷钼对紫云英结实特性的影响
《中国土壤与肥料 》 2020 北大核心 CSCD
摘要:通过开花前叶面喷施钼肥,初步探讨钼肥对紫云英花荚结实的调控效应,以期为紫云英种子生产合理利用钼肥及种子产量提高的调控技术提供参考依据。试验以"信紫1号"为供试材料,在开花前叶面喷施清水(对照CK)、钼肥(100、200、400、600、800 mg/kg),在成熟期,按常规考种法记载单位面积株数、分枝数、不同层花序的花序数、结荚数、籽粒数和粒重等指标。结果表明,喷施不同浓度钼肥处理对紫云英单位面积花序数、有效株数、一级分枝数、单株一级分枝数、一级分枝花序数和每有效花序结荚数均影响不大。喷施浓度400 mg/kg的钼肥处理对其荚果结实率、单荚籽粒数和粒重可产生影响,尤其对第1~4层花序产生影响较为显著,其中,在荚果结实率上,第1~4层花序的该浓度处理与对照相比,分别较对照提高2.89%、3.36%、2.72%和2.74%;在单荚籽粒数上,分别较对照提高12.69%、14.79%、18.75%和20.36%;在粒重上,分别较对照提高16.72%、20.21%、19.06%和18.77%,然而对第5、6层花序产生影响不大。种子产量及其产量构成相关分析发现,紫云英种子产量与荚果结实率、单荚籽粒数和粒重呈显著正相关。
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紫云英荚果分层成熟特性及其种子产量研究
《草业学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要:紫云英是我国重要的冬季绿肥,具有无限花序的生长特性。对不同时期紫云英各枝位荚果开展调查,研究荚果的成熟规律及各枝位对种子产量的贡献。结果表明,紫云英荚果生物量随生育期延长逐渐增加,第1~2枝位荚果生物量显著高于第5及以上枝位。种子总产量表现为26 d≈33 d>19 d>12 d>5 d,最高产量为123.2 g·m~(-2),其中80%来自第1~4枝位荚果。荚果成熟具有明显的分层特征,第1~4枝位荚果成熟指数随时间呈现"S"形变化,于盛花期后12~26 d快速成熟;第5及以上枝位荚果成熟指数呈指数型变化,在第19~33 d快速成熟。下层枝位最大荚果长和宽、荚果内粒数、种子千粒重均显著高于上层枝位。荚果成熟度由Ⅰ级至Ⅵ级,荚色由青绿色转变为黑色,花序最大荚果长度增长2倍,宽度增长4倍,种子千粒重增长6倍。第1~3枝位种子产量随成熟指数变化的速率是第4~6~+枝位的2.58倍。综合荚果成熟和种子产量,1~4枝位荚果应作为紫云英种子收获的主要部位,顶层荚果成熟度达Ⅳ级后收割可获最高产量。
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