科研产出
中药多糖及人血清中糖蛋白N-糖链的毛细管电泳指纹图谱研究
《分析测试学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：该文建立了激光诱导荧光毛细管电泳(CE-LIF)检测中药多糖和人血清糖蛋白中N-糖链的分析方法。利用8-氨基芘-1,3,6-三磺酸钠(APTS)为柱前荧光衍生试剂,结合CE分析,可在15 min内同时测定7种中性单糖。该方法应用于中药制剂和药物植物中单糖组成和含量的测定,加标回收率为88.0%~102%,相对标准偏差(RSD)小于3.0%。该方法灵敏度高、准确性好、实用可靠,适合于监控中药制剂中糖类物质的种类和含量。同时,基于毛细管凝胶电泳方法(CGE)建立了人血清中糖蛋白的N-糖链指纹图谱。利用中性涂层聚乙烯醇(PVA)有效地抑制电渗流,增加分离时间,实现了糖链异构体的有效分离。对5μL人血清进行毛细管电泳分析,共分离得到17个组分。这为进一步研究复杂生物体系血清蛋白的糖基化变化提供了可能性。
关键词： 激光诱导荧光毛细管电泳 中药多糖 N-糖基化修饰 糖蛋白
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甜瓜黄斑病毒外壳蛋白的原核表达、多克隆抗体制备及其应用
《植物病理学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：本研究将甜瓜黄斑病毒(Melon yellow spot virus,MYSV)外壳蛋白基因克隆到原核表达载体pET32a(+)中,利用大肠杆菌系统表达该蛋白,免疫家兔制备其多克隆抗体。本文通过多克隆抗体,建立了间接ELISA(ID-ELISA)、免疫捕获PCR(IC-RT-PCR)、Western blot及dot-ELISA的MYSV检测方法,以上各种方法均能特异的检测MYSV。检测结果表明:ID-ELISA方法检测效价大于1∶6 400;Western blot检测灵敏度达到1∶320(W/V,g·mL-1);Dot-ELISA检测灵敏度达到1∶80(W/V,g·mL-1),且用牙签等非实验室工具便能检测该病毒,能高效地应用于田间样品的检测。
关键词： MYSV 抗血清 免疫捕获PCR western blot 斑点ELISA
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果子蔓属已知品种库的建立与应用
《热带作物学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：通过建立果子蔓已知品种数据库,了解国内市场上果子蔓品种的现状,为新品种选育提供指导,同时探讨已知品种数据库在新品种DUS测试中的应用。先后共收集了57个果子蔓品种,构建了这57个果子蔓已知品种数据库,分析38个DUS测试性状的变异系数,进行了聚类分析,并对数量性状进行相关性分析。结果表明,果子蔓数量性状的变异系数为6%~21%,平均变异系数为11%,表明果子蔓品种间多样性不够丰富,遗传基础较狭窄。相关性分析表明,所有数量性状间均显著正相关。已知品种库的建立可为DUS测试提供支撑。
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高产优质球茎甘蓝新品种'沪苤1号'的选育
《上海农业学报 》 2017 CSCD
摘要：'沪苤1号'是由萝卜质球茎甘蓝雄性不育系CMS-13-390和自交系苤蓝13-289组配而成的球茎甘蓝新品种;从定植到采收为75 d,生长势强,平均株高51 cm,开展度60 cm;平均叶片数14张,最大叶长42 cm,叶宽20 cm,叶柄长12 cm;球茎扁圆,球色鲜绿,球面光滑,球横径14 cm,球高11 cm,单球重1.2 kg;球茎总糖含量较高,肉质脆甜,食用品质优良。较抗黑腐病,每667 m~2平均产量3 930.83 kg,较对照品种'科润花冠'增产10.58%。
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一株抑菌型地衣芽孢杆菌的快速分离与鉴定及其对4株耐药致病菌的抑制作用
《南京农业大学学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：[目的]本文旨在分离具有良好抗菌活性的芽孢杆菌菌株作为抗生素替代品材料。[方法]通过热处理和抑菌板双重筛选对革兰氏阳性菌和阴性菌均具有抗菌活性的芽孢杆菌,并通过形态学、生理生化和分子生物学方法鉴定分离菌株。体外测定分离菌株发酵上清液对4株耐药致病菌的抑制作用。[结果]分离到6株对革兰氏阳性菌和阴性菌均具有抗菌活性的芽孢杆菌,其中分离菌株BB11的抑菌活性最强,对沙门氏菌C782和大肠杆菌K_(12)D_(31)的抑菌圈直径分别达15.34和6.26 mm。染色镜检BB11菌为带芽孢的革兰氏阳性菌,理化特性与芽孢杆菌相符。BB11菌的16S rRNA序列与地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)BCRC 15413序列的相似度在99%以上,gyr B基因序列与B.licheniformis BCRC 12826序列的相似度达到100%。BB11菌株的发酵上清液对具有多重耐药的致病性大肠杆菌K88、K99、987P和沙门氏菌C782均表现出较好的抑杀作用。[结论]分离到的地衣芽孢杆菌BB11具有用于开发多功能微生态制剂的潜能。
关键词： 地衣芽孢杆菌 双重筛选 耐药致病菌 gyrB基因 16S rRNA
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早熟、抗病芥蓝新组合'沪芥1号'的选育
《上海农业学报 》 2017 CSCD
摘要：'沪芥1号'芥蓝是以萝卜细胞质芥蓝雄性不育系'CMS早芥1219'为母本,高代自交系'中芥1217'为父本,配制而成的杂交一代芥蓝新组合。该组合早中熟,播后50—60 d可采收。株型直立,株高36 cm,开展度35 cm。叶片卵形较平滑,叶色绿,叶柄短,蜡粉中。薹茎纺锤形,节间中长,薹长18-22 cm,薹径粗2.0-2.5 cm,平均单薹重110-150 g,平均产量13500-18000 kg/hm~2。该组合抗病性强,高抗霜霉病。
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运用SSR分子标记分析蛹虫草遗传多样性
《园艺学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：以蛹虫草全基因组为模板查找Simple Sequence Repeats(SSR)位点并设计筛选引物进行聚类分析。从100对SSR引物中选出30对多态性高、重复性好的SSR引物,共获得215条多态性条带。根据遗传相似系数(GS)采用不加权成对群算术平均法(UPGMA)进行遗传相似性聚类:材料间GS值的变化范围为0.527~0.995,以GS值为0.761水平可将46株蛹虫草分为6类;菌株亲缘关系与地域来源有一定相关性,且栽培菌株多为同一品种。
关键词： 蛹虫草 Simple Sequence Repeats(SSR) 遗传相似系数(GS) 聚类分析
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SNP标记用于猪肉产品DNA溯源
《食品科学 》 2017 EI 北大核心 CSCD
摘要：采用基于个体基因组DNA序列的差异而进行个体识别的DNA溯源技术,建立DNA溯源系统对肉产品的质量安全进行控制。在实验群体中(10个品种,233个个体)检测了33个新单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)标记的遗传多样性,通过杂合度计算筛选出6个SNP标记可用于猪肉产品DNA溯源。进一步在屠宰场采样进行溯源模拟实验,结果表明筛选的18个SNP标记(6个新SNP标记结合已有的12个SNP标记)能有效区分100头猪个体,随机抽取的10个个体的组织样品都能通过基因型比对找到对应的个体。本研究可为早日建立猪肉产品的DNA溯源系统提供一定的技术参考。
关键词： 猪肉产品溯源 DNA溯源技术 SNP标记 个体识别
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