科研产出
驴血蛋白酶解制备抗氧化肽工艺优化
《生物学杂志 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：比较经过不同酶处理的驴（Equus asinus）血水解液的抗氧化能力，筛选出抗氧化能力最强的水解液。采用单因素试验及响应面法，优化酶解时间、温度、pH值、酶底比条件，经过试验验证实际的抗氧化活性。对优化后得到的水解液进行超滤，并对不同超滤组分的抗氧化活性进行试验。响应面法得出在pH值为7,时间为3.54 h,酶底比为20%,温度55℃的条件下，预计得到的驴血木瓜蛋白酶水解产物DPPH自由基清除率为71.50%,总抗氧化能力为1.53 mmol/g。经过验证得到实际酶解产物DPPH自由基清除率为70.40%±1.33%,总抗氧化能力为（1.51±0.25） mmol/g。将该水解液进行超滤，发现组分3（＜3 ku）的抗氧化活性最强，其DPPH自由基清除率为71.26%±5.63%,总抗氧化能力为（1.49±0.36） mmol/g。结果表明，经过木瓜蛋白酶处理的水解液和超滤液具有优良的抗氧化活性，对清除自由基具有优良的效果。
关键词： 驴血 生物活性肽 抗氧化 DPPH自由基 总抗氧化能力
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牛病毒性腹泻病毒LN-1株的分离鉴定及基因组序列分析
《中国畜牧兽医 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【目的】查明并掌握辽宁地区牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhea virus, BVDV）的流行特性及生物学特点，为BVDV的防治提供理论基础和技术支持。【方法】采集辽宁省某养牛场疑似发生BVDV感染的病死牛脾脏组织，用牛传染性鼻气管炎病毒（Infectious bovine rhinotracheitis virus, IBRV）、牛呼吸道合胞体病毒（Bovine respiratory syncytial virus, BRSV）、牛副流感病毒3型（Bovine parainfluenza virus type 3,BPIV3）及BVDV基因特异性引物进行RT-PCR鉴定，将组织液接种MDBK细胞分离病毒。对细胞进行细胞病变效应（CPE）观察后再通过电镜观察、间接免疫荧光试验（IFA）鉴定病毒，PCR扩增病毒全基因组序列并对其进行遗传进化分析。【结果】BVDV特异性引物RT-PCR鉴定结果为阳性，在280 bp处有条带，与预期条带大小相符，其余病原特异性引物未扩增出条带，证明未感染其他病原；分离得到的毒株在MDBK细胞中培养未出现明显细胞病变效应；病毒纯化后，经电镜观察可见直径约为50 nm的病毒粒子；免疫荧光试验结果显示，在接种分离毒株的MDBK细胞内可观察到亮绿色荧光，而对照细胞没有荧光，将分离得到的病毒命名为LN-1株；全基因组扩增序列大小为12 269 bp,遗传进化分析发现，LN-1株与XC、SD-15及ZM-95株在同一分支，与XC株核苷酸相似性为96.2%,属于BVDV-1m型。【结论】本研究成功分离出1株1m型BVDV毒株，对后续疫苗研发、流行病学调查及致病机理等方面研究具有重要意义。
关键词： 牛病毒性腹泻病毒（BVDV） 全基因组测序 病毒分离 免疫荧光鉴定 遗传进化分析
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基于转录组学分析性别、月龄对荷斯坦牛网膜脂肪组织炎症相关基因表达的影响
《农业生物技术学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：公牛(Bos taurus)去势和长期育肥能够促进内脏脂肪的沉积,过多的脂肪沉积易引发机体慢性炎症,然而有关牛网膜脂肪组织炎症的分子机理研究相对较少.本研究以牛网膜脂肪组织为研究对象,旨在探究性别和月龄对荷斯坦育肥牛网膜脂肪组织炎症相关基因表达的影响.选择16月龄荷斯坦公牛(BF16)、阉牛(SF16)及26月龄阉牛(SF26)各3头,测定生长和血液生化指标,屠宰后采集网膜脂肪组织,进行组织切片苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)染色,采用RNA-seq技术对3组牛网膜脂肪组织进行转录组学分析,筛选组间差异基因,并对差异基因进行GO功能注释和KEGG富集分析、qPCR验证、候选基因筛选及蛋白网络互作分析.结果显示,共得到1173个组间差异表达基因,富集在8个基因表达趋势模式中;功能分析显示差异基因富集多个与炎症相关的生物学过程和信号通路;随机选择6个差异表达的基因进行qPCR验证,表达趋势与转录组测序结果一致,表明测序结果可靠;筛选到与炎症相关的5个生物学过程条目和5个信号通路共50个非冗余基因,聚类分析发现,与BF16组相比,去势能够上调SF16组网膜脂肪组织中抗炎症和促脂肪细胞分化基因(如TNF-α诱导蛋白3(TNF alpha induced protein 3,TNFAIP3),骨形成蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)等)的表达,下调促炎症基因(如白细胞介素1β(interleukin-1beta,IL1B))的表达;与BF16和SF16组相比,长期育肥能够上调SF26组网膜脂肪组织中衰老和慢性炎症相关的基因(如半乳糖凝集素3(galectin 3,LGALS3),C-C基序趋化因子受体7(C-C motif chemokine receptor 7,CCR7)等)的表达.蛋白网络互作分析显示IL1B为关键中心节点.本研究结果为优化利用荷斯坦阉牛生产大理石纹牛肉技术提供理论依据.
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利用毕赤酵母底盘产生大麻二酚酸合成酶及其催化活性分析
《食品工业科技 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为了实现大麻二酚酸合成酶(CBDAS)的微生物底盘高效表达,为体外合成大麻二酚(CBD)提供重组酶.首先从高CBD含量大麻叶片中克隆CBDAS基因,利用生物信息学方法分析其蛋白的基本理化性质,构建重组质粒pPIC9K-CBDAS后转化毕赤酵母菌,筛选重组蛋白CBDAS高表达的培养条件,并分析CBDAS的催化活性.结果表明,构建的pPIC9K-CBDAS融合蛋白表达系统能在毕赤酵母中表达;在甲醇添加量为 1%、培养基pH6.0和培养 48h的诱导条件下表达量最大;重组酶CBDAS催化底物大麻萜酚酸(CBGA)反应 4h后大麻二酚酸(CBDA)含量显著增加(P<0.05),在 8h后 CBD含量显著增加(P<0.05),在 12h时合成 CBDA和CBD量达到最大值;CBDAS在大麻叶片大麻萜酚酸(CBGA)粗提液和CBGA标品中反应 12h后分别生成CBDA 60.64和 20.12 ng/mL,CBD 128.01和 207.87 ng/mL,具有较强的催化活性.通过酵母异源表达实现了大麻CBDAS的重组表达,为经济高效地合成CBDA和CBD提供活性酶.
关键词： 大麻 大麻二酚酸合成酶 大麻二酚 异源表达 条件优化
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不同时期喷施外源ABA对小豆碳代谢、内源激素及产量构成因素的影响
《作物杂志 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为探究小豆喷施外源脱落酸（ABA）的作用，以龙小豆4号为试验材料，在三叶期和始花期叶片喷施浓度为50mg/L ABA，并连续、多次取样测定碳代谢、内源激素及产量构成因素相关指标。结果表明，喷施外源ABA后，龙小豆4号叶片果糖、蔗糖和淀粉含量及蔗糖转化酶、蔗糖合成酶活性增加，可溶性糖含量和淀粉酶活性降低；茎部生长素、赤霉素和细胞分裂素含量增加，内源ABA含量减少；底荚高度和第1节间长度减小，分枝数、单株荚数和单株总粒重增加。
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膨化秸秆还田对寒地水稻养分积累、转运、分配及产量的影响
《南方农业学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【目的】分析膨化秸秆还田对寒地水稻养分积累、运转、分配及产量的影响，筛选膨化秸秆适宜的还田量，为探索水稻秸秆资源的高效利用提供理论和技术支持。【方法】采用盆栽试验，以水稻品种垦粳8号为试验材料，以秸秆不还田（秸秆用量为0）为对照（CK），设25%、50%、75%和100%（当地常规秸秆还田量7500 kg/ha）4个膨化秸秆还田量处理，分析不同处理间水稻植株氮、磷、钾的吸收、运转、分配及产量差异。【结果】不同水稻秸秆还田处理中，均以25%处理的地上部氮、磷、钾积累量最高或较高，2020和2021年成熟期地上部氮积累量分别较CK提高1.10%和10.53%;2021年磷和钾积累量较CK提高1.30%和3.04%。25%处理能促进茎叶氮、钾向籽粒运转，进而提高氮、钾的转运量、转运率和贡献率，有利于成熟期叶片、茎鞘和穗中氮、钾的积累。从产量及其构成因素来看，膨化秸秆还田通过增加水稻穗粒数和结实率，进而提高水稻产量，其中，25%处理的产量显著高于CK及其他秸秆还田处理，2020和2021年分别较CK提高5.54%和8.93%。【结论】25%膨化秸秆还田量处理能促进寒地水稻的氮、磷、钾积累及植株营养器官氮和钾向籽粒转运，且产量较高，可尝试在寒地水稻生产中推广应用。
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产木质纤维素降解酶真菌的筛选及产酶特性
《微生物学通报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【背景】利用微生物处理秸秆引起研究者的广泛关注。【目的】筛选生长速度快、木质纤维素降解酶活性强的真菌菌株，用于植物秸秆降解和高效利用。【方法】从自然界采集的样品中分离纯化真菌菌株，利用PDA-愈创木酚和PDA-羧甲基纤维素钠平板初筛，再经过液体发酵检测漆酶酶活、羧甲基纤维素酶酶活及菌丝生长速率复筛目的菌株，通过内转录间隔区（internal transcribed spacer,ITS）测序法对目的菌株进行鉴定，对目的菌株产漆酶和羧甲基纤维素酶活力进行测定及酶学性质研究。【结果】从样品中分离纯化到18株真菌，通过初筛筛选出9株产木质纤维素降解酶真菌菌株，再经过复筛，筛选出一株产漆酶、羧甲基纤维素酶活力高、菌丝生长快的菌株M1，经过分子生物学鉴定M1为糙皮侧耳（Pleurotus ostreatus），其漆酶酶活为（243.59±1.11）U/mL，羧甲基纤维素酶酶活为（36.03±0.63） U/mL。在5 d的培养期内，菌丝生长速率为（9.43±0.32） mm/d。对菌株M1的发酵粗酶液的酶学性质进行了检测分析，结果表明，所产的漆酶在pH5.0-6.5相对酶活为90%以上，在pH 5.5的介质中最为稳定，在低于55℃环境稳定性较高，相对酶活90%以上；该菌所产羧甲基纤维素酶在pH 5.5-6.5相对酶活为90%以上，在pH 6.0的介质中最为稳定，在低于60℃环境相对稳定性较高，相对酶活90%以上。【结论】本研究筛选到的菌株M1具有较高的漆酶和羧甲基纤维素酶活性，具有降解木质素和纤维素的潜力，为植物秸秆的生物降解提供了有效的菌种资源。
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合丰(合交、合农、佳豆)号系列大豆品种的亲本分析
《大豆科学 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为深入了解合丰(合交、合农、佳豆)号系列大豆品种的亲本选用情况,本文对黑龙江省农业科学院佳木斯分院大豆育成品种所涉及的亲本进行了分析,通过总结已往的亲本选用经验,为今后品种改良创新提供技术指导.截止到2022年,佳木斯分院共育成大豆品种119个,包括杂交大豆品种3个.涉及亲本124个,包括国内祖先亲本11个,国外亲本13个,国内直接亲本(创新种质与选育品种)100个;骨干亲本或核心亲本(育成品种≥2个)46个,一般亲本78个(育成品种1个).其中北丰11和合丰50分别育成品种9个,满仓金育成品种7个,合丰34和合丰35分别育成品种6个,黑河45、北豆5号和HOBBIT分别育成品种5个,黑河43、合农69、合丰55、垦丰16和黑河38分别育成品种4个,秃荚子、荆山朴、克4430-20、合丰26、绥农10、华疆4号、黑河35、合农71、美国扁茎大豆、日本小粒豆和黑农54等11个亲本分别育成品种3个,黑河54、黑龙江41(俄罗斯)、合丰24、钢201、俄亥俄、绥农14、公84112-1-3、合丰39、合丰41、合丰42、合丰51、合丰57、北丰9号、九丰10、合93-793、垦农19、合农68、黑农48、克山1号、绥02-529和黑交01-1032等21个亲本分别育成品种两个.分院选用的亲本中农家品种(地方品种)占亲本总数的8.87%;自育亲本材料占亲本总数的34.68%;引自国内(黑龙江、吉林、辽宁和内蒙古)的亲本材料占亲本总数的46.03%;引自国外(美国、日本、俄罗斯和意大利)的亲本材料占亲本总数的10.48%.这些亲本材料包括超早熟亲本5个,极早熟亲本3个,早熟亲本42个,中早熟亲本63个,中熟亲本1个,中晚熟亲本9个,晚熟亲本1个.分析结果说明分院选用亲本来源广泛,既体现地理远缘又有生态差异,既体现遗传基础改良又有遗传多样性,既体现正宗的血统又拓宽血缘关系,保证了品种改良创新与水平提升,这一做法与经验值得推广与借鉴.
关键词： 合丰(合交、合农、佳豆)系列 大豆品种 亲本分析
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香菇多糖和七清败毒颗粒对母猪繁殖性能、血清生化指标及猪繁殖与呼吸障碍综合征防控影响的研究
《动物营养学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为了解香菇多糖和七清败毒颗粒联合应用对集团化猪场猪繁殖与呼吸障碍综合征(PRRS)的防控效果,本研究选取3~4胎次、体重为(268.00±33.59)kg的母猪100头,随机分为2组(每组5个重复,每个重复10头猪),分别为对照组和试验组.对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中添加2.5 g/(头·d)香菇多糖+5.0 g/(头·d)七清败毒颗粒.试验对母猪繁殖性能、血清生化指标、PRRSV抗体水平、仔猪脐带血中PRRSV载量进行检测.试验期90 d.结果表明:在母猪繁殖性能方面,与对照组相比,试验组窝均产仔数、平均日增重极显著提高(P<0.01),窝均死胎数极显著降低(P<0.01).在血清生化指标方面,第30天,试验组血清谷草转氨酶(AST)活性显著低于对照组(P<0.05);第90天,试验组血清谷丙转氨酶(ALT)、AST活性及总胆红素(TBIL)含量显著低于对照组(P<0.05),血清尿素(UN)含量极显著降低于对照组(P<0.01).在PRRSV抗体检测方面,第30天,试验组S/P值极显著低于对照组(P<0.01);第90天,试验组显著低于对照组(P<0.05),离散度有降低趋势,符合正态分布.在仔猪脐带血PRRSV抗原检测方面,对照组抗原阳性率为10%,试验组为0.综上所述,感染PRRS的集团化猪场应用香菇多糖和七清败毒颗粒可以有效地提升母猪繁殖性能、影响部分血清生化指标水平、维持猪群PRRSV抗体S/P值稳定、降低仔猪PRRSV阳性率,起到很好地防控PRRS的效果.
关键词： 香菇多糖 七清败毒颗粒 猪繁殖与呼吸障碍综合征 S/P值 血清生化指标 抗原检测 猪
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