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稳定表达3种猪腹泻病毒嵌合抗原的CHO细胞系构建与鉴定

畜牧与兽医 2023 北大核心

摘要:为构建稳定表达猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪胃肠炎病毒(TGEV)和猪Delta冠状病毒(PDCoV)主要抗原的CHO细胞系,为猪病毒性腹泻三联疫苗的研发提供基础材料,本研究将PEDV的S基因的COE区域、TGEV和PDCoV的S基因的受体结合区域(RBD),通过同源重组的方式进行融合,克隆到慢病毒表达质粒pLV-EF1a-IRES-Puro中,包装得到重组慢病毒。使用重组慢病毒感染CHO细胞,经过嘌呤霉素和单克隆细胞筛选,基因水平和蛋白水平表达验证,成功构建了稳定表达3种猪腹泻病毒抗原融合蛋白的CHO细胞系,为进一步研制PEDV-TGEV-PDCoV的亚单位疫苗奠定了基础。

关键词: CHO细胞系 稳定表达 仔猪腹泻病毒 慢病毒

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水稻病虫害绿色防控成套实用技术

农学学报 2023

摘要:21世纪以来,水稻病虫害绿色防控(Green Prevention and Control of Rice Pests and Diseases)成为农业科技界的研究应用热点。笔者数十年连续不间断对江苏稻田病虫害绿色防控田间应用进行了研究,根据亲身实践,对水稻病虫害绿色防控中的农业防控措施包括选种、种子检疫、菌源清理、虫源防控、栽培控制等,生物防控措施包括天敌控虫、生物农药使用等,化学药剂防控措施包括种子处理、苗期、分蘖期、拔节期、破口期、抽穗期、灌浆结实期使用等进行了梳理总结,并制定了水稻病虫害绿色防控实用技术简明表,以期为同行提供参考,提高水稻病虫害绿色防控技术的落地率。

关键词: 水稻 病虫 绿色防控 实用技术

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淮安市西甜瓜产业调研报告

农村经济与科技 2023

摘要:通过走访、座谈交流、填写有关调查表等方式对淮安市西瓜、甜瓜产业进行调研,获取了该产业的面积、品种、病虫害、机械化、标准化等有关情况,对其存在的问题、优势、劣势等进行分析,提出了制定产业发展规划、攻克产业瓶颈问题、建立产业科技服务融合机制等建议和对策,为淮安市西瓜、甜瓜产业发展相关政策的制定提供参考。

关键词: 淮安市 西瓜 甜瓜 产业 调研报告

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OPN5-TSH-DIO2/DIO3和VIP-PRL在短光照抑制公山麻鸭睾丸活性中的表达规律

畜牧兽医学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:旨在探究短光照抑制公山麻鸭繁殖机能的过程中,OPN5-TSH-DIO2/DIO3通路和VIP-PRL通路主要相关因子表达规律及可能存在的相互关系。本试验选取80只正常繁殖期(220日龄)、体重相近且健康的山麻鸭公鸭作为研究对象,试验前15 d维持正常繁殖期的长光照(18L∶6D),从d16开始每天缩短光照2 h,到每天光照时间为8 h(8L∶16D)后持续至试验结束(d45);于d15、d21、d30、d45采集血液样本和下丘脑、垂体、睾丸等组织样,通过HE染色、ELISA、qRT-PCR、Western blot技术检测睾丸发育情况及下丘脑、垂体、睾丸中相关基因和蛋白表达水平。结果显示,与长光照条件相比,短光照导致公鸭睾丸萎缩,生精细胞和精子数量显著减少(P<0.05);血液LH、PRL、睾酮水平均显著降低(P<0.05);下丘脑GnRH表达下降,GnIH表达上升,但差异均不显著(P>0.05);垂体GnIHR呈上升趋势,FSH呈下降趋势,但均无显著差异(P>0.05),GnRHR试验后期明显上升(P<0.05),LH无明显变化趋势;睾丸中FSHR、LHR的基因表达均下降,但无显著差异(P>0.05)。在OPN5-TSH-DIO2/DIO3通路中,OPN5基因和蛋白表达水平显著降低(P<0.05),DIO2、TSH-β基因表达水平显著降低(P<0.05),DIO2蛋白水平降低(P>0.05),DIO3基因表达趋势则与DIO2相反,缩短光照导致基因表达水平上升(P>0.05),DIO3蛋白水平显著上升(P<0.05);VIP-PRL通路中,下丘脑VIP和垂体PRL的基因表达均显著下降(P<0.05),垂体PRLR的基因表达显著上升(P<0.05),睾丸PRLR的基因表达显著下降(P<0.05)。结果表明,在短光照抑制公山麻鸭繁殖性能的过程中,OPN5-TSH-DIO2/DIO3通路和VIP-PRL通路均参与其中,介导了短光照对生殖轴的抑制作用;与正常繁殖期所需光照条件相比,短光照均会抑制两通路的效率,从而实现对生殖轴活性的下调,但其中两通路间的相互调控关系仍有待进一步研究。

关键词: 山麻鸭 光照 睾丸 OPN5 PRL

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适合早期诊断的非洲猪瘟sIgA抗体量子点免疫层析检测方法建立

畜牧兽医学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:非洲猪瘟(African swine fever, ASF)是由非洲猪瘟病毒感染引起的一种烈性猪传染病,其极高的传染性和发病率给养猪产业造成了巨大的经济损失。目前尚无安全有效的ASF疫苗,因此早期监测是防控ASF最重要的解决方案之一。建立敏感、快速的ASF现场即时检验方法,对维护生猪产业繁荣具有重要意义。首先基于氨基和羧基的偶联反应制备量子点微球(quantum dot microsphere, QDM)偶联ASFV重组抗原蛋白p30的检测探针和QDM-兔抗鸡IgY质控探针;接着在检测线和质控线分别固定鼠抗猪IgA-Sc片段抗体和鸡IgY蛋白制备侧向流免疫试纸条;待检动物口腔液中的ASF sIgA抗体经QDM-p30捕获可被固定至T线。将ASFV阳性口腔液以2倍梯度稀释,检测该方法的灵敏度。通过检测其他几种常见猪病病毒验证该方法的特异性。通过检测ASFV阴性和阳性动物的口腔液临床样本评价该方法的临床诊断效能。该方法特异性好,与PRV、CSFV、PRRV不存在交叉反应;灵敏度高,最低检出稀释度可达1∶64;耗时短,可在20 min内完成检测;操作便捷,无需侵入式采样;检出时间早,人工感染最早可于感染后第6天检出。本研究开发了一种口腔液中ASF sIgA抗体的现场即时检验(point-of-care testing, POCT)量子点免疫试纸条,为ASFV的监测和防控提供了新的技术支持和补充。

关键词: 非洲猪瘟 sIgA抗体 量子点免疫试纸条 现场即时检验

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盐逆境下施用缓释肥及其减氮处理对水稻生长、穗部性状、产量及品质的影响

江苏农业学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:为探明盐逆境下缓释氮肥类型及其减氮处理对水稻生长、穗部性状、产量及稻米品质的影响,以南粳5055 为材料进行盆栽试验,土壤含盐量 1.5g/kg.共设置 8 个处理:不施氮肥对照(CK)、施常规尿素处理(CG)、施大颗粒尿素处理(HFA)、施大颗粒尿素减氮 10%处理(HFA-10)、施大颗粒尿素减氮 20%处理(HFA-20)、施硫包衣尿素处理(HFB)、施硫包衣尿素减氮 10%处理(HFB-10)、施硫包衣尿素减氮 20%处理(HFB-20).研究结果表明,与CG处理相比,HFA-20 处理茎蘖成穗率显著提高 21.36%(P<0.05),HFA-20 处理水稻产量、有效穗数分别提高5.44%、7.41%(P>0.05),HFA-20 处理氮素农学利用率显著提高了 34.01%(P<0.05).同一缓释肥处理而言,与HFA、HFA-10 处理相比,HFA-20 处理水稻千粒质量显著提高(P<0.05);与HFB、HFB-10 处理相比,HFB-20 处理水稻千粒质量显著提高(P<0.05).缓释肥及其减氮处理的糙米率、精米率与CG处理相比无显著差异.但是与CG处理相比,HFA、HFA-20、HFB-10、HFB-20 处理稻米胶稠度显著提高(P<0.05),其中 HFA-20 处理胶稠度最高为80.00 mm.可见,本试验条件下,盐逆境下施用大颗粒尿素减氮 20%处理可使水稻不减产并对提高水稻茎蘖成穗率、氮素利用率及食味品质有积极作用.

关键词: 滩涂 缓/控释肥 氮肥减量 氮素利用率

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优质抗病棉花品种泗棉686的选育比较试验

江西农业学报 2023

摘要:泗棉686是宿迁市农业科学研究院以高产抗病品种泗棉6821为母本,以优质棉品系泗阳518为父本进行杂交,经多年连续病圃选择与南繁加代选择,在不防治棉铃虫的高压胁迫下定向选育而成的一个棉花新品种。该品种在3年的区域试验和生产试验中表现为抗枯萎病、耐黄萎病、丰产、优质,适宜在江苏省及长江流域同类生态夏播棉区推广种植。泗棉686于2021年4月通过了江苏省农作物品种审定委员会的审定。

关键词: 棉花 优质 抗病 泗棉686 选育

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长三角区域农业遥感应用:进展、挑战与展望

中国农业信息 2023

摘要:[目的]理清长三角区域农业遥感发展现状,剖析现阶段农业遥感应用关键问题及挑战,有助于推进区域农业遥感关键技术创新发展,促进农业遥感产业化瓶颈问题解决,提升遥感技术在区域农业农村现代化转型发展中的服务能力.[方法]文章梳理了农业遥感研究现状及区域内遥感应用实践情况,归纳总结了农业遥感应用面临的困难与挑战,给出了区域内农业遥感产业化落地应用发展的建议.[结果]现阶段长三角区域农业遥感研究应用虽然取得了一定成效,但区域内地物类型复杂多变、农业用地斑块破碎、有效遥感数据缺失、淡水养殖解译困难是现阶段农业遥感应用面临的重要挑战.[结论]长三角地区需要聚焦农业遥感科学问题,深入关键技术创新,将遥感技术的优势进一步扩大.同时面向区域内产业特色需求,着力解决农业生产管理实际问题,以推动区域农业遥感快速发展.

关键词: 长三角 农业遥感 应用实践 发展建议

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应用二次PCR检测草莓炭疽病菌

江苏农业科学 2023 北大核心

摘要:开发了一种基于PCR的草莓炭疽病致病菌暹罗炭疽菌(Colletotrichum sisamense)检测方法。通过分析暹罗炭疽菌及24种真菌的ITS区序列,设计了1条反向特异引物CsiaR,结合引物CgInt可仅从暹罗炭疽菌中扩出约400 bp片段。对不同浓度暹罗炭疽菌DNA溶液进行检测,第1轮和第2轮PCR的最低检出限分别为50 pg/μL和5 fg/μL;对接种不同浓度暹罗炭疽菌分生孢子悬浮液的草莓样本(接种48 h,症状未出现)进行检测,低于1.0×10~4个孢子/mL的处理无法检出;对田间随机采集的草莓样本检测时,PCR检测阳性的样本(含有症状和无症状)中均可分离到暹罗炭疽菌。总体来说,本方法可用于草莓中暹罗炭疽菌的早期、快速及准确检测,从而为草莓炭疽病的及时有效防控提供依据。

关键词: 草莓 炭疽病 暹罗炭疽菌 ITS序列 PCR检测

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瓜类作物辐射花粉诱导双单倍体技术研究进展

长江蔬菜 2023

摘要:自然界中自发产生单倍体的概率极低,通过人工单倍体诱导技术能够大大提高单倍体发生概率.辐射花粉授粉诱导雌核发育是瓜类作物获得单倍体胚和单倍体植株的一种重要方式.本文对瓜类作物花粉辐射剂量、基因型、培养基类型、胚培养、倍性鉴定、染色体加倍等影响单倍体育种的关键因素进行论述,并总结了存在的问题,提出了未来的发展趋势,为瓜类作物在该技术的应用和发展提供理论依据.

关键词: 瓜类作物 辐射花粉 单倍体育种

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