科研产出
牛冠状病毒感染新生犊牛肺上皮细胞模型的建立
《中国畜牧兽医 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】牛冠状病毒(Bovine coronavirus, BCoV)是犊牛腹泻和上呼吸道疾病的主要病原，目前缺少敏感的适合BCoV体外培养的本动物细胞，限制了BCoV致病机制的深入研究。因此，本研究拟从犊牛肺脏组织中分离出牛肺上皮细胞(bovine lung epithelial cell, BLEC)建立BCoV体外感染本动物细胞模型。【方法】采用胰蛋白酶和Ⅰ型胶原蛋白酶两步酶消化法对新生犊牛肺脏组织进行肺上皮细胞初步提取，再利用上皮细胞贴壁时间不同的差异贴壁法纯化BLEC。通过间接免疫荧光试验(immunofluorescence assay, IFA)检测纯化后细胞中标志细胞角蛋白18(cytokeratin 18,CK-18)的表达来鉴定BLEC,并通过PCR方法对细胞进行病原纯净性检测，包括牛轮状病毒(Bovine rotavirus, BRV)、牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus, BVDV)、牛副流感病毒3型(Bovine parainfluenza virus type 3,BPIV3)、BPIV5、牛传染性鼻气管炎(Infectious bovine rhinotracheitis virus, IBRV)、BCoV和支原体(Mycoplasma)。通过PCR和IFA检测BCoV对BLEC的易感情况，并绘制BCoV在BLEC上的一步生长曲线。【结果】分离纯化培养的BLEC形态均匀稳定、呈菱形或砖块状，无常见病原BRV、BVDV、BPIV3、BPIV5、IBRV、BCoV和支原体污染，上皮细胞标志CK-18呈阳性表达。犊牛腹泻来源的BCoV HLJ-325毒株感染BLEC 24 h后可观察到明显的细胞病变效应(cytopathic effect, CPE);PCR能扩增出BCoV N基因；IFA结果显示，BCoV感染BLEC呈现特异性红色荧光。通过实时荧光定量PCR检测BCoV含量建立病毒生长曲线，BCoV在感染BLEC后20 h时病毒载量最高，为4.46×10～5拷贝/mL。【结论】本研究成功分离制备了BLEC,证明BCoV易感染BLEC,构建了BCoV体外感染BLEC模型，为研究BCoV引起牛呼吸道疾病的致病机制奠定基础。
关键词： 牛冠状病毒(BCoV) 牛肺上皮细胞 分离纯化 感染模型
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向日葵HaKASI基因的生物信息学和表达分析
《分子植物育种 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：KASI编码β-酮脂酰-ACP合酶Ⅰ,主要催化C4-ACP生成C16-ACP.为了解向日葵HaKASI基因的表达特性及功能,本研究对其编码蛋白进行生物信息学和基因表达模式分析,预测HaKASI为酸性且为亲水性蛋白;结果显示二级结构主要是无规则卷曲,预测亚细胞定位于叶绿体.系统进化分析发现,HaKASI与拟南芥及其他物种的KASI聚在一个大分支上,与莴苣(Lactuca sativa L.)KASI进化关系最近,序列相似性高达92%.HaKASI表达分析结果表明,HaKASI在向日葵种子中表达最高,其次为管状花和茎,在叶、舌状花和根中不表达,HaKASI在高、低油酸种子发育不同时期表达趋势大体一致,表达量均从7~12DAF升高,之后降低,但在37 DAF,HaKASI在低油酸种子中表达量极高,明显高于高油酸种子,这暗示HaKASI在油酸含量不同的向日葵种子发育后期可能存在不同的表达调控机制.本研究为HaKASI基因功能的研究提供科学依据.
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东北半干旱黑土区玉米秸秆还田方式对土壤水溶性有机碳含量及其组分的影响
《干旱地区农业研究 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为明确不同秸秆还田方式下土壤有机碳组分的变化特征,基于6 a秸秆还田长期定位试验,利用三维荧光光谱技术,对无秸秆还田(CK)、秸秆覆盖还田(FG)、秸秆翻埋还田(FM)处理下土壤有机碳(SOC)含量及水溶性有机碳(WSOC)含量及其结构特征进行分析.结果表明:(1)与CK相比,FM处理0~40 cm土层SOC含量提高7.87%~29.54%,FG处理0~30 cm土层SOC含量增加1.91%~18.61%,30~40 cm土层SOC含量降低7.67%;FM和FG处理0~40 cm土层土壤WSOC含量分别提升13.42%~39.42%和0.28%~26.34%.(2)通过WSOC三维荧光光谱发现,各土层CK(Ex/Em=300/34、Ex/Em=300/340、Ex/Em=240/340、Ex/Em=300/340)处理WSOC荧光特征峰为溶解性微生物代谢产物和类色氨酸蛋白质物质荧光峰;FM(Ex/Em=340/430、Ex/Em=340/430、Ex/Em=340/435、Ex/Em=340/435)和FG(Ex/Em=270/440、Ex/Em=270/435、Ex/Em=340/435、Ex/Em=340/430)处理为类腐殖酸类物质荧光特征峰,腐殖化程度较高,结构较为复杂;荧光区域积分表明,FM和FG处理类腐殖酸类物质(Ⅴ)和富里酸类物质(Ⅲ)的积分百分比分别较CK增加12.18%~27.39%、11.98%~30.72%和3.96%~5.73%、2.99%~5.40%.(3)土壤WSOC包含两个组分,C1(Ex/Em=340/435,270/435)组分为类腐殖酸类物质,C2(Ex/Em=290/345,240/345)组分为溶解性微生物代谢产物和类色氨酸蛋白质物质;F max值结果表明,0~40 cm土层的C1组分相对含量表现为FM>FG>CK,表明秸秆翻埋还田更有助于土壤中营养物质含量增加和形成更高分子量的有机物.综上,不同秸秆还田方式均可提升SOC和土壤WSOC含量,增加腐殖化程度,加强土壤的供肥能力,翻埋还田处理提升作用更为显著.
关键词： 秸秆还田方式 土壤有机碳 水溶性有机碳 荧光结构 东北黑土区
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黑龙江省稻田稗草对氰氟草酯抗性研究及药剂筛选
《农药 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：[目的]为明确黑龙江地区稻田稗草对氰氟草酯抗性水平，并筛选出轮换药剂。[方法]采用单剂量筛选法、整株生物测定法研究了33个供试稗草种群对氰氟草酯的抗性水平及对其他常用除草剂的交互及多抗性。[结果]单剂量筛选供试33个种群，除采自荒地的HL33以外，其余32个种群的相对鲜质量均大于25%，可以推测为疑似抗性种群。以HL33为敏感型计算抗性指数，9个供试种群：3个种群RI>10，表现为高水平抗性，占比33%;4个种群RI在5.28～9.96之间，表现为中水平抗性，占比44%;2个种群RI<5，表现为低水平抗性，发生频率为22%。生物活性相关性分析结果表明，供试稗草种群对氰氟草酯与唑酰草胺、敌稗、二氯喹啉酸存在极强相关性，与五氟磺草胺存在强相关性，与嘧啶肟草醚存在弱相关性。[结论]研究发现黑龙江地区稻田稗草对氰氟草酯已产生普遍抗性，且对多种常用除草剂存在交互和多抗性，嘧啶肟草醚可以作为合适的替代轮换药剂。
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低温对民猪骨骼肌线粒体能量代谢基因的影响
《西北农业学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为了探究低温环境下民猪肌肉组织内与线粒体能量代谢相关基因的变化情况,以解析民猪抗寒特性的遗传机制.将9头体质量相近的母猪随机分成3组,每组3头,在冬季将其中2组置于室外半敞篷舍内饲养,分别处理3 d(急性低温处理组)和58 d(慢性低温处理组),1组置于常规舍内饲养,作为对照组.以背肌为试验材料,采用PCR array方法,对90个与线粒体能量代谢相关基因的表达水平进行检测.结果表明,与对照组相比,急性低温处理组基因的表达水平差异不显著,但慢性低温处理显著改变 ATP5H、 ATP5L、 ATP6V1G3、 COX5A、 COX7A2、 COX7A2L、 NDUFS4、 SDHB、 UQCRQ和 GADD45B基因的表达水平,尤其是 GADD45B,达到了极显著水平(P<0.01),这些基因均为编码OXPHOS系统亚基基因,推测慢性低温诱导了背肌ATP的生成.对 GADD45B基因进一步分析发现,该基因在哺乳动物中高度保守,基本符合分子进化规律,表达具有明显的组织特异性.急性低温处理对民猪背肌内ATP的生成影响不显著,但慢性低温处理诱导ATP的生成,以维持体温恒定.
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大麦抗蠕孢叶斑病遗传资源鉴定及主要抗病类型分析
《植物病理学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：大麦蠕孢叶斑病是由兼性寄生麦根腐平脐蠕孢菌（Bipolaris sorokiniana）引起的重要叶部病害，在世界大麦种植区域均有发生，尤其在气候温暖湿润地区最具破坏性，能造成严重的产量损失，也是我国东北春麦区目前首要真菌流行病害。蠕孢叶斑病主要在大麦生育中后期流行为害，种植抗病品种是防治该病害最经济有效的措施。本研究利用2个来自东北麦区强致病力优势菌株Z 12028和Z 15525对350份大麦种质资源进行苗期和成株期接种鉴定，仅1份材料2013F61903苗期高抗Z12028菌株，未发现对叶斑病免疫的材料。针对2个强致病力菌株，从中获得9份全生育期抗病材料，即ZDM00009、ZDM00013、ZDM00094、ZDM08888、ZDM01414、ND14049、ND B112、Newdale和垦啤麦9号；ZDM00074、Bowman、Stander等14份材料（4.3%）仅在苗期抗病，成株期却感病；72份材料（28.3%）属于成株抗病类型。对Z 12028和Z 15525菌株具有成株抗性的品种所占比例分别为28.1%和29.5%。因此，抗蠕孢叶斑病的大麦种质资源中保留成株抗性的材料明显多于全生育期抗性类型。本研究结果能为发掘大麦抗叶斑病新基因提供重要抗源材料。
关键词： 大麦 叶斑病 生育期 苗期抗性 成株抗性 全生育期抗性
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耕作与秸秆还田深度变化对不同土层团聚体稳定性的影响
《中国土壤与肥料 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：耕作和秸秆还田可以改变土壤理化性状,影响土壤团聚体的稳定性.采用田间定位试验,研究耕作与秸秆还田深度变化对旱地草甸土不同深度土层水稳性团聚体稳定性的影响,为科学开展秸秆还田培肥土壤提供依据.结果表明:土壤团聚体稳定性受>2000 μm粒径大团聚体影响较大,连续 5 年翻耕显著降低了表层(0~20 cm)土壤>2000 μm粒径水稳性大团聚体的占比,增加了53~250 μm微团聚体和<53 μm黏粉粒的比例.浅翻(ST)和秸秆浅翻还田(STS)与深翻(DT)和秸秆深翻还田(DTS)分别对10~20和20~30 cm土层黏粉粒的增加影响较大,其中,10~20 cm土层ST较免耕(NT)和DT处理分别增加86.21%和14.65%,20~30 cm土层DT较NT和ST处理分别增加113.82%和59.68%,差异显著(P<0.05);连续翻耕由于对亚耕层(20~40 cm)的频繁扰动,导致 250~2000 μm粒径团聚体的稳定性降低,DT较NT和ST与DTS处理较覆盖免耕(NTS)和STS处理分别平均降低 19.43%与 20.57%,且差异显著(P<0.05).研究结果表明,连续相同耕作方式或秸秆还田方式不利于形成稳定的土壤团聚体结构,建议今后生产中采用轮耕轮还等保护性耕作方式调整秸秆还田深度,以达到改善土壤结构、提高团聚体稳定性、培肥土壤的目标.
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黑龙江省大豆田苘麻田间发生动态
《植物保护 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：随着大豆种植面积逐年增加，黑龙江省大豆田苘麻的危害也显著加重。掌握苘麻在大豆田中的发生规律，抓住防除苘麻的关键时期，可以更好地制定科学有效的综合防除策略。本研究通过田间调查及数据统计分析初步分析了苘麻的田间发生动态。结果表明，拔除处理的苘麻种群数量达79.0株/m~2,显著高于不拔除处理的苘麻累计出苗数18株/m~2,且不拔除处理苘麻累计出苗数比其最高值33.8株/m~2减少了46.75%。5月下旬到9月初苘麻的株高及鲜重变化曲线呈S形，即表现“慢-快-慢”的基本规律。大豆播种后10～20 d为苘麻出苗高峰期，6月中旬到7月中旬为苘麻快速生长期，7月下旬苘麻进入开花结实期，8月中旬苘麻种子逐渐成熟，9月初苘麻种子大部分成熟。单株苘麻的生物量和结籽量随着出苗时间的推迟而降低。5月下旬到7月上旬出苗的苘麻均能开花结实完成整个生长繁殖过程，且出苗越早的苘麻开花期越长，苘麻蒴果的平均直径更大，单蒴果平均种子数更多，结实能力更强。7月中旬以后出苗的苘麻不能开花无生殖生长。
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寒地早熟玉米单倍体诱导系LY3-6的选育及诱导效果研究
《玉米科学 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：玉米单倍体育种可以显著缩短选系时间，加快育种进程，具有巨大的应用前景。单倍体诱导系是开展单倍体育种的必备前提，在我国北方高纬地区能够高效生产单倍体的诱导系十分匮乏。为了选育适宜寒地生态条件的优良诱导系，利用诱导系CAU5和从乌克兰引进的EMK-1杂交后代的分离群体为基础材料，经过连续6代的自交选择和诱导率测定，育成了优良诱导系LY3-6。对17个不同基因型材料的单倍体诱导效果试验表明，LY3-6的平均诱导率为12.95%。LY3-6具有熟期早、诱导率高、抗玉米主要病害、抗倒伏、子粒遗传标记明显等优良特点，是寒地开展早熟玉米单倍体育种的理想诱导系。
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限制基础饲粮同时补饲水培大麦苗对籽鹅生长性能、屠宰性能、脏器指数和血清生化指标的影响
《动物营养学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：本试验旨在探究限制基础饲粮同时补饲水培大麦苗对籽鹅生长性能、屠宰性能、脏器指数和血清生化指标的影响.选取28日龄籽鹅160只,随机分为4组,每组4个重复,每个重复10只鹅.A组籽鹅自由采食基础饲粮,不补饲水培大麦苗;B、C和D组籽鹅分别以A组采食量的85.0%、72.5%和60.0%饲喂基础饲粮,并自由采食水培大麦苗.试验期42 d.结果显示:1)A和B组籽鹅的总增重和平均日增重显著高于C和D组(P<0.05);B组籽鹅的终末体重显著高于C和D组(P<0.05);B组籽鹅的每千克增重成本最低.2)A和B组籽鹅的腹脂率显著高于D组(P<0.05);A组籽鹅的屠宰率显著高于C和D组(P<0.05),半净膛率和瘦肉率显著高于C组(P<0.05);B组籽鹅的屠宰率和胸肌率显著高于D组(P<0.05),瘦肉率显著高于C和D组(P<0.05).3)A组籽鹅的肝脏指数显著高于D组(P<0.05),肌胃指数显著低于D组(P<0.05).4)A和B组籽鹅的血清白蛋白(ALB)含量显著高于C和D组(P<0.05);A组籽鹅的血清谷丙转氨酶(ALT)和肌酸激酶(CK)活性显著高于C和D组(P<0.05),血清葡萄糖(GLU)含量显著高于B和D组(P<0.05),血清总胆红素(TB)含量显著低于C和D组(P<0.05);B组籽鹅的血清甘油三酯(TG)和总蛋白(TP)含量显著高于C和D组(P<0.05).由此可见,在籽鹅育成期,采取饲喂85.0%基础饲粮并自由采食水培大麦苗的饲喂方案效果较好.
关键词： 籽鹅 水培大麦苗 生长性能 屠宰性能 脏器指数 血清生化指标
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