科研产出
利用SSR标记鉴定香菇单核体及杂交后代
《微生物学通报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：【目的】研究简单重复序列(Simple sequence repeat,SSR)分子标记方法用于香菇原生质体单核体、孢子单核体及其杂交后代的分离和鉴定。【方法】利用基于香菇全基因组序列信息开发的SSR标记,分析由香菇品种"L808"双核菌丝制备的原生质体单核体、孢子单核体及其杂交后代的SSR指纹。【结果】对制备的原生质体单核体的鉴定中,在不经过杂交配对的情况下,鉴定出"L808"的两种不同极性的原生质体单核体,其分离比例为191:1,该鉴定结果得到SSR标记、随机扩增多态性DNA(Random amplified polymorphismic DNA,RAPD)标记及传统方法的验证。另外,开发的香菇SSR标记还能以多位点组合的方式,用于对孢子单核体及其杂交后代的鉴定。【结论】应用SSR标记可加快香菇单核体的制备进程,并提高鉴定单核体及相关杂交菌株的准确性,促进香菇遗传育种研究。
关键词： 简单重复序列 香菇 原生质体单核体 随机扩增多态性DNA 孢子单核体 杂交子鉴定
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新疆喀什地区濒危物种裂盖马鞍菌生态因子调查
《食用菌学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：在2013~2015年期间,每年3月31日到5月28日,调查新疆喀什地区裂盖马鞍菌(Helvella leucopus)的发生情况和环境因子,持续3年调查结果表明:在胡杨林和毛白杨中均有子实体发生,裂盖马鞍菌子实体发生在土壤pH 8.0左右、有机质含量20~36g/kg、全氮含量0.8~1.3g/kg和速效钾含量189~293mg/kg的地区;野生子实体形成期的土壤温度5.0~26.4℃,空气湿度20%~35%,光照3000~8000lux。
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日粮粗纤维对妊娠母猪福利行为和类固醇激素的影响
《畜牧与兽医 》 2016 北大核心
摘要：为了研究日粮粗纤维(crude fiber,CF)对母猪妊娠期行为及类固醇激素的影响,试验选用健康、体况相近的经产(2~7胎)梅山母猪36头,按胎次相近原则分为2组,分别采食含2.5%粗纤维(2.5%CF组)和5.0%粗纤维(5.0%CF组)的日粮。结果显示,与2.5%CF组相比,5.0%CF日粮显著降低了梅山母猪的空嚼、卷舌和总刻板行为(P<0.05),极显著降低了母猪舔地面和站立次数及站立躺卧时间比(P<0.01),极显著提高了粪样含水量(P<0.01),改善了母猪的便秘;5.0%CF日粮极显著降低了梅山母猪妊娠90天唾液皮质醇(cortisol)含量(P<0.01),同时极显著提高了唾液孕酮(progesterone,P4)的水平(P<0.01),对唾液中雌二醇(estradiol,E2)含量无显著影响(P>0.05);5.0%CF日粮对梅山母猪妊娠90 d血浆中葡萄糖(glucose,GLU)、胆固醇(Cholesterol,CHO)、甘油三酯(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白-胆固醇(high density lipoprotein-cholesterol,HDL-C)和低密度脂蛋白-胆固醇(low density lipoprotein-cholesterol,LDL-C)均没有显著影响(P>0.05)。本研究首次从行为和类固醇激素水平证实了高纤维日粮可缓解梅山母猪妊娠应激。
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西瓜中氯吡脲残留的LC-MS/MS检测方法研究
《上海农业学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：采用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)建立了西瓜中氯吡脲残留的定量分析方法:样品经过乙腈涡旋提取后,加入C18分散固相萃取净化,LC-MS/MS检测。结果表明:在0.1—500μg/L质量浓度范围内,氯吡脲的峰面积与其浓度呈良好线性关系,该法最低定量检出限为0.1μg/kg;在全瓜、瓜瓤和瓜皮3种基质中,100μg/kg、μg/kg和0.1μg/kg三个添加水平下,氯吡脲回收率为97%—124%,相对标准偏差为5.39%—11.2%;该方法可以满足西瓜中氯吡脲残留检测的需要。
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膜过滤法分离纯化刺芹侧耳提取液中海藻糖的工艺
《食用菌学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：联合使用截留相对分子质量1000的超滤膜和270的纳滤膜从刺芹侧耳(Pleurotus eryngii)水提液中分离海藻糖。超滤膜操作压力为4kg/cm~2,同时纳滤膜操作压力为3kg/cm~2,经膜分离的相对分子质量270~1000部分溶液经浓缩结晶,海藻糖纯度可达93.3%。
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不同品种桃果冷链物流特性差异性研究
《经济林研究 》 2016 北大核心
摘要：为了探讨不同品种桃果冷链物流特性的差异化问题,从而为其贮运技术的优化提供参考依据,分别以采自山东省蒙阴县岱崮镇的‘仓方早生’、‘春美’、‘中油4号’和‘锦香’黄桃果实为试材,对不同品种桃果实在长途(山东蒙阴至新加坡)冷链物流期间的预冷特性、蓄冷特性、货架期及其品质的变化情况进行了观察,并对其果心温度在冷链物流期间的变化情况进行了全程跟踪检测。结果表明:在整个冷链物流期间,‘中油4号’和‘春美’的果心温度一直低于其余2个品种,说明其均有较好的预冷和蓄冷性能;在山东冷库温度设为0℃、预冷40 h的条件下,不同品种桃果果心温度方能降低至2.5~3.0℃,说明产区桃果贮运企业的冷库制冷能力还有待提高,或需配置专门的预冷设备和优化预冷技术;货架期第2天(到达目的地后),4个品种桃果果肉组织的硬度均在2 kg·cm-2以上;其中‘仓方早生’和‘锦香’果实中可溶性固形物的含量略高于10%,其余品种的均为8%~9%,说明产地采收果实的品质有待提高;不同品种对冷害的敏感性存在一定的差异性。文中综合分析认为:‘中油4号’的贮运品质较好,其预冷和蓄冷性能均佳,其果实外观和肉质均好,且汁液多,味较甜;而其他品种桃果运至目的地后均发生了不同程度的冷害现象。据此,文末提出了采取终端冷链措施以避免冷害发生的建议。
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猪流行性腹泻病毒检测与S蛋白中和抗原表位基因分析
《上海农业学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：应用RT-PCR对2015年江苏、安徽、山东9个猪场的腹泻样品(新鲜粪便、肠道组织等)进行PEDV和TGV检测,并对检测到的一株PEDV(CHNJPK2015)的纤突蛋白中和抗原表位基因进行克隆测序和遗传进化分析。结果表明:9个猪场PEDV检测阳性率为100%,PEDV个体阳性率为63.89%,TGEV均未检出,说明本次流行的仔猪腹泻病主要是由PEDV感染引起的。所测毒株与参考毒株可分为3个群,CHNJPK2015株与AVCT12、Br1/87、CHM2013、LZC、SM98等毒株的S蛋白中和抗原表位基因的遗传距离较近,核苷酸序列同源性达99.5%—99.8%,处于同一群;而与2014年中国各地分离的CH/GDZQ/2014、FJ-FQ 2014、FJ-ZP 2014、PEDV-LY、PEDV-WS、PZ1406、SC1402、SH1404和疫苗株CV777序列的遗传距离较远,核苷酸序列同源性为92.9%—96.2%,处于不同的群。
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山茶靛牛肝菌子实体提取物的体外抗肿瘤活性
《食用菌学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：依次用95%乙醇和蒸馏水提取山茶靛牛肝菌(Boletus pseudoregius)子实体,再用不同有机溶剂萃取95%乙醇提取物,考察山茶靛牛肝菌子实体不同有机溶剂萃取物和水提物的体外抗肿瘤活性。结果表明:石油醚萃取物对白血病细胞K562抑制作用较弱,对人肠癌细胞SW620和人肝肿瘤细胞HepG-2的增殖有较强的抑制作用,IC50分别为95.7和195.4μg/mL;正丁醇萃取物对K562、SW620和HepG-2的增殖都有较强的抑制作用,IC50分别为24.2、89.0和59.6μg/mL;石油醚和正丁醇萃取物在实验浓度范围内对人正常前列腺基质永生化细胞WPMY-1的增殖无抑制作用;氯仿和乙酸乙酯萃取物对K562、SW620和HepG-2肿瘤细胞和WPMY-1正常细胞的增殖均有较强抑制作用,其中氯仿萃取物的抑制作用最强;水提物对以上3种肿瘤细胞抑制作用不明显,对正常细胞的增殖无抑制作用。
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猪圆环病毒2型Rep基因真核表达载体的构建和免疫原性分析
《上海农业学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：根据GenBank发表的猪圆环病毒2型(PCV2)基因序列设计并合成1对特异性引物,进行PCR扩增,从PCV2突变株中扩增出PCV2 Rep基因,对PCR扩增产物清洁后进行双酶切,连接到pEGFP-C1载体上,转化到大肠杆菌DHSα感受态细胞中,经PCR筛选和测序后鉴定出正确的重组基因,完成真核表达载体的构建。将重组质粒转染到PK15细胞中,收取病毒液抽提DNA,PCR检测到Rep基因,证明转染是成功的。进行间接免疫荧光试验,可以检测Rep基因在PK15细胞中的表达,试验结果很好的验证了Rep基因的免疫原性。这为进一步研究PCV2的生物学活性及PCV2新型疫苗奠定了坚实的基础。
关键词： 猪圆环病毒2型 Rep基因 真核表达载体 间接免疫荧光
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荷叶离褶伞子实体有机溶剂萃取物的化学成分和抗肿瘤活性
《食用菌学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：用不同有机溶剂依次对荷叶离褶伞(Lyophyllum decastes)子实体醇提物进行萃取,得石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取物和剩余物。化学定性鉴别结果表明:石油醚萃取物中含有甾类(或三萜)、有机酸类、黄酮类物质;氯仿萃取物中含有生物碱类、甾类(或三萜)、有机酸类、黄酮类、蒽醌类物质;乙酸乙酯萃取物中含有生物碱类、甾类(或三萜)、有机酸类、黄酮类物质;正丁醇萃取物和剩余物中均含有糖类、氨基酸(蛋白)、黄酮类和有机酸类物质。体外抗肿瘤活性研究结果表明:石油醚、氯仿和乙酸乙酯萃取物对K562、HepG2和SW620肿瘤细胞的增殖均有抑制作用,氯仿萃取物对人正常前列腺细胞WPMY-1的增殖也有抑制作用,但在实验浓度内石油醚和乙酸乙酯萃取物对该正常细胞的增殖无抑制作用,实验浓度内的正丁醇萃取物和剩余物仅对肿瘤细胞K562的增殖有抑制作用,对供试的其它肿瘤细胞和正常细胞均无抑制能力。
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