科研产出
基因编辑技术及其在畜牧业中的应用研究进展
《基因组学与应用生物学 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：基因编辑技术为畜牧业进行新型分子育种开创了新天地,传统的转基因技术由于整合位点不可控、遗传不稳定等因素而难以在畜牧业发挥作用。胚胎干细胞(ES细胞)和同源重组(HR)相结合可以做到定点整合、稳定遗传,但因为畜禽干细胞难以获得而无法推广。以锌指核酸酶(ZFN)、TALEN和CRISPR/Cas9为代表的新型基因编辑技术结合体细胞核移植(SCNT)以及显微注射技术,为畜禽遗传改良开辟了新思路。本综述了ES结合HR的传统基因编辑技术和ZFN、转录激活因子样效应物核酸酶(TALEN)和成簇有规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)以及其相关蛋白(Cas9,Cpf1)的研究及其在畜禽基因编辑中的应用进展。
关键词： 基因编辑技术 同源重组 锌指核酸酶 TALEN CRISPR/Cas9 CRISPR/Cpf1
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鄂北岗地桃园省力化土肥水管理技术
《中国南方果树 》 2016 北大核心
摘要：湖北省是我国早熟桃主产区之一,桃主要分布在干旱少雨的鄂北岗地地区。该区域土壤瘠薄、有机质含量低,保肥保水力差,生产上长期依赖化学肥料和土壤清耕制度,造成地力下降,土壤酸化。针对这一现状,笔者总结了多年来取得较好应用效果的生草栽培与省力化的土壤管理技术。
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葡聚糖延缓草鱼肌原纤维蛋白冷冻变性的机理分析
《食品科学 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：以草鱼肌原纤维蛋白为研究对象,通过研究盐溶性蛋白质量浓度、Ca~(2+)-ATPase活性、表面疏水性、总巯基和活性巯基含量在冷冻贮藏条件下的变化,比较不同分子质量葡聚糖(添加量0.5%)和传统商业抗冻剂(4%蔗糖+4%山梨糖醇)对冻藏过程中肌原纤维蛋白的冷冻保护效果。结果表明,在冻藏过程中,葡聚糖能有效延缓草鱼肌原纤维蛋白的冷冻变性,效果优于传统商业抗冻剂;分子质量小的葡聚糖(T7)对Ca~(2+)-ATPase活性和活性巯基的保护作用要整体优于分子质量大的葡聚糖(T20),冻藏超过15 d后延缓表面疏水性的上升和总巯基的保护上的效果也显著优于后者;因此,在工业中选用分子质量小的葡聚糖作为淡水鱼及相关制品的冷冻保护剂效果更佳。
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猪流行性腹泻病毒湖北株的分离鉴定及其s1基因进化分析
《湖北农业科学 》 2016 北大核心
摘要：猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是猪的肠道传染病病原,主要引起仔猪呕吐、腹泻和脱水,对一周龄内的哺乳仔猪危害最为严重,死亡率可达50%~100%。利用Vero86细胞从湖北某猪场腹泻仔猪小肠病料中分离到一株病毒,经RT-PCR检测、序列比对后确定其为PEDV,命名为HB201503株。设计PEDV s1基因的全长扩增引物,获得该株病毒的s1基因全长序列并进行了进化分析,结果表明该毒株与近年来在Gen Bank登陆的PEDV s1基因核苷酸序列相似性在91.4%~99.2%,与疫苗株CV777相似性较低,仅为91.8%。通过s1基因进化树分析表明HB201503以及近几年国内分离毒株主要集中在第I个亚群,且HB201503株与KM406183(2014,四川)和KM609206(2015,江苏)同源性较高。此外,s1蛋白氨基酸序列比对显示,HB201503与近几年分离毒株及疫苗株CV777均在55-74、157-163位氨基酸出现了连续4个以上氨基酸的缺失或替换,而且HB201503株与CV777及近几年分离毒株相比,还在270-283位氨基酸上出现了1个氨基酸的缺失和10个氨基酸的替换。
关键词： 猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV) 分离鉴定 s1基因 进化分析
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2009年我国小菜蛾迁飞路径典型案例分析
《环境昆虫学报 》 2016 北大核心
摘要：小菜蛾Plutella xylostella Linnaeus是一种世界性的十字花科蔬菜重要害虫,具有远距离迁飞的特性,明确小菜蛾在我国的种群发生动态及迁飞路径对其早期预警具有重要意义。本文调查了2009年5月我国南京、故城、安阳、大连、公主岭、沈阳6个地区小菜蛾成虫种群的发生动态,并首次利用HYSPLIT平台对不同地区小菜蛾种群的迁飞峰次进行了轨迹分析。结果表明,2009年5月我国6个地区的小菜蛾成虫种群存在显著地"突增"或"突减"现象,符合迁飞昆虫在迁飞期的种群动态的典型特征;5月14日南京地区起飞的小菜蛾种群可迁飞至大连,5月19日故城地区起飞的小菜蛾种群可迁飞至公主岭,5月20日安阳地区起飞的小菜蛾种群可迁飞至沈阳;首次明确了小菜蛾轨迹分析的设定参数,800-1200 m为小菜蛾适宜迁飞的飞行高度,飞行持续时间一般为2-3 d。
外源酶分步水解鲫鱼工艺条件优化
《中国调味品 》 2016 北大核心
摘要：以鲫鱼整鱼为原料,以蛋白质的水解度为主要指标,在单一酶酶解效果的基础上,采用复合蛋白酶(Protamex)和风味蛋白酶(Flavourzyme)进行分步酶解,并对酶解的工艺条件进行正交优化。结果表明:采用Protamex和Flavourzyme对鲫鱼整鱼进行酶解,最佳酶解条件为:在50℃,pH 7.0下,Protamex加酶量5‰,酶解240 min后,再加入6‰的Flavourzyme,酶解300 min,此时水解度为24.3%,呈味核苷酸二钠(I+G)含量为0.1326%。
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乌骨山羊体重体尺、血液生理生化指标及其相关性
《西南农业学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：为给乌骨山羊的饲养管理、品种选育、肉质研究和临床诊疗提供依据,本试验对成年全黑型和黑头白身型乌骨山羊进行体重体尺和血液生理生化指标测定,并进行相关性分析。结果表明,乌骨山羊公羊的管围极显著大于母羊(P<0.01),体重性状为中等变异;体重与体尺各性状存在极显著的正相关,其中胸围与体重的相关程度最高(r=0.8381);黑头白身型的游离甲状腺素(FT4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)显著低于全黑型(P<0.05),而白蛋白(ALB)、肌酸激酶(CK)极显著高于全黑型(P<0.01),其他生理生化指标间差异不显著(P>0.05);谷丙转氨酶(ALT)与管围存在显著相关(P<0.05);总蛋白(TP)与体重、体高、胸围存在显著相关(P<0.05),与管围存在极显著相关(P<0.01);球蛋白(GLB)与体重、体高存在显著相关(P<0.05),与胸围、管围存在极显著相关(P<0.01),其他血液生化指标与生长发育性状间有一定的相关性,但没有达到显著水平(P>0.05)。乌骨山羊体重、体尺及血液生理生化指标之间有一定的相关性,可为乌骨山羊饲养管理及早期选种提供参考。
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γ射线和电子束辐照对牛血清蛋白结构的影响
《现代食品科技 》 2016 EI 北大核心
摘要：为比较γ射线和电子束对牛血清辐照灭菌后蛋白损伤的差异,将牛血清辐照0~50 k Gy后,测定蛋白浓度、浊度、疏水性以及纯化后白蛋白的二级结构、热稳定性和分子量大小的变化。结果表明,牛血清辐照后蛋白浓度下降,浊度和疏水性上升,电子束辐照的变化幅度低于γ射线。以10 k Gy剂量为转折点,白蛋白的α螺旋含量先升后降,β折叠含量先降后升,变化范围分别为0%~15.2%和40.6%~52.4%。自由卷曲含量始终呈上升趋势。牛血清辐照后白蛋白组分的DSC图出现放热杂峰,出峰时间延长,γ射线辐照的峰温随剂量增加(77.4℃升至79.1℃)而升高,电子束辐照的趋势相反。照后白蛋白在GPC图中出现分布加宽的杂峰。这说明射线和电子束作用使牛血清同时发生交联和降解反应,破坏白蛋白二级结构,牛血清蛋白分子出现疏水基团外露,浊度增加,以及浓度下降的现象。常温辐照时电子束与γ射线效果差异不明显。
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陆地棉转录因子基因GhC2H2的克隆与功能分析
《棉花学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：C2H2型锌指蛋白在植物生长发育、非生物胁迫响应过程中起关键作用。基于实验室前期工作,分析盐胁迫下陆地棉根系抑制性差减杂交文库,筛选得到1个盐胁迫应答基因GhC2H2。结合RACE(Rapid amplification of cDNA ends)和RT-PCR(Reverse transcription-polymerase chain reaction)技术克隆该基因全长,通过瞬时表达分析其细胞定位,采用Real time-PCR分析其在盐胁迫下的陆地棉根、茎、叶中的表达模式,并测定了转入该基因的株系在正常土壤和盐碱地的铃重、衣分和纤维品质指标。该基因GenBank登录号为HM002632,编码区全长819 bp,编码272 aa;其编码蛋白包含2个C2H2锌指结构域,定位于细胞核;该基因在不同组织中均受盐胁迫诱导上调表达,且在胁迫诱导初期上调量最大,推测该基因参与早期盐胁迫应答。对转基因后代株系性状分析表明,该基因的过表达可以提高转基因棉花衣分、改良纤维品质,推测GhC2H2既参与盐胁迫应答过程,也参与纤维发育调控。
关键词： 陆地棉 GhC2H2 基因克隆 盐胁迫应答 基因功能
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