科研产出
不同包装方式下冷鲜青虾的菌群多样性分析
《食品科学 》 2019 EI 北大核心 CSCD
摘要:对青虾采用两种包装方式:托盘包装和气调包装(体积分数50%CO_2+50%N_2),在4℃条件下贮藏6 d,测定菌落总数和挥发性盐基氮含量,确定不同包装方式下青虾的货架期;随后利用16S rDNA扩增子测序对两种包装方式下青虾微生物多样性进行研究,比较其菌相变化,确定其变化规律。结果表明:托盘包装组和气调包装组的货架期分别为2 d和4 d;且两种包装方式下变质青虾的菌群结构有较大差异,在托盘包装方式下,优势菌群主要以不动杆菌、黄杆菌和希瓦氏菌为主,是普通低温贮藏时造成青虾腐败的主要菌群;采用气调包装后,黄杆菌和希瓦氏菌数量大大降低,假单胞菌成为主要优势菌群;体积分数50%CO_2+50%N_2气调包装能抑制托盘包装时优势腐败菌的增殖,从而延长货架期;而假单胞菌有较强的耐受力,成为新的优势腐败菌。研究结果为保障青虾的质量安全提供了理论依据。
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麻鸭磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶高效可溶性表达及其部分酶学性质
《南方农业学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要:[目的]克隆麻鸭磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶基因(GPx4)并在大肠杆菌中表达,分析其酶学特性,为研究GPx4功能及其在羟基脂肪酸形成过程中的调节机制打下基础.[方法]采用RT-PCR克隆麻鸭GPx4(DGPx4)的编码基因,利用定点突变的方法构建半胱氨酸突变体DGPx4表达载体pMBP-DGPx4(48Sec→Cys),并在大肠杆菌中通过添加His标签进行可溶性表达,经Ni-NTA亲和层析和离子交换层析纯化得到融合蛋白DGPx4;采用总谷胱甘肽过氧化物酶活性检测试剂盒检测DGPx4活力以研究其酶学性质.[结果]克隆获得的DGPx4基因编码序列全长516 bp,编码172个氨基酸,编码蛋白分子量约20 kD,理论等电点(pI)为8.9.构建的突变体基因原核表达载体pMBP-DGPx4(48Sec→Cys)可在大肠杆菌中成功诱导表达获得融合蛋白DGPx4,经Ni-NTA亲和层析和离子交换层析即获得高纯度的DG-Px4.以烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)为底物时,DGPx4的最适反应温度为32℃,最适pH为8.0,对NaCl浓度较敏感;Cu2+和Ni2+对DGPx4活力有较高的促进作用,Mg2+和Mn2+对DGPx4活力有一定的抑制作用,Ca2+和Zn2+对DG-Px4活力则无明显的促进或抑制作用.[结论]从鸭肝细胞中克隆获得的DGPx4基因序列经定点突变后可在原核细胞中高效表达,且纯化后的高纯度融合蛋白DGPx4具有GPx4活力,能在抗脂质氧化过程中发挥作用.
关键词: 麻鸭 磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(GPx4) 原核表达 纯化 酶学性质
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干旱胁迫下油菜栽培模拟优化决策系统(Rape-CSODS)的订正及其检验
《江苏农业学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要:利用江苏省兴化市、安徽省天长市2014—2017年大田和盆栽油菜的水分胁迫控制试验资料,明确了受干旱胁迫影响的4类变量(油菜净光合速率、叶面积系数、比叶面积和物质分配系数),进而建立了上述变量的变化百分比与不同土壤相对湿度差(干旱胁迫下油菜田土壤相对湿度与水分适宜的油菜田土壤相对湿度的差值)之间的统计方程式;利用上述方程式对油菜栽培模拟优化决策系统(Rape-CSODS)中相关机理模型进行了改进;以干旱胁迫下油菜全生育期和最终产量的模拟结果为例,检验了Rape-CSODS的改进效果。结果显示,在模型改进前油菜生育期模拟值的标准根均方差(NRMSE)、绝对平均误差(MAE)和一致性系数(Io A)分别为0.010 29、2.130 00和0.999 97,模型改进后分别为0.004 89、1.000 00和0.999 99,相关系数从0. 71提高到0. 88;模型改进前油菜产量模拟值的NRMSE、MAE和Io A分别为0.105 61、20.610 00和0.997 50,模型改进后分别为0.042 40、7.437 50和0.999 50,相关系数从0. 52提高到0. 95。表明经改进的Rape-CSODS对油菜干旱有较好的模拟能力,能应用于区域化油菜生产。
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蓝莓采后病原菌胞外脂肪酶的提取及粗酶性质研究
《中国食品学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要:以蓝莓采后主要病原菌灰霉为试验菌株,通过单因素试验对其培养基成分和发酵条件进行优化,并研究其酶学性质.结果表明,采用含橄榄油1%、蛋白胨1%,pH 7.0的PDA培养基,发酵温度25℃,发酵时间96 h时,灰霉菌具有最高的产胞外脂肪酶能力.酶学性质研究表明,该脂肪酶对pH和温度的适应范围较宽,在40℃、p H 9.0的反应条件下,粗酶的脂肪酶活性最高;Na+、Fe3+能促进粗酶的活性,K+、Ca2+、Mg2+、Cu2+则抑制粗酶的活力;该粗酶在一定体积分数的异丙醇、甲醇、丙酮中具有良好耐受性,而在乙酸乙酯和二甲苯中处于激活状态.优化使病菌灰霉菌脂肪酶的产率增加,为后续脂肪酶的分离纯化奠定基础.初步探讨胞外脂肪酶的粗酶性质,为蓝莓采前病害防治及采后品质保护提供科学依据.
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高蛋白夏大豆新品种苏豆13的选育及栽培技术
《大豆科学 》 2019 北大核心 CSCD
摘要:苏豆13是江苏省农业科学院经济作物研究所以苏系5号为母本,巨丰辐射M6为父本,经过常规人工杂交育种所选育出的新品种。2015和2016年分别参加江苏省淮南夏大豆区域试验,2017年参加江苏省淮南夏大豆生产试验,比对照早熟19 d,较对照增产10. 55%。经农业部谷物品质监督检验测试中心检测,苏豆13粗蛋白质(干基)含量高达44. 66%。2018年通过江苏省农作物品种审定委员会审定(审定编号:苏审豆20180001)。该品种平均生育期99 d,属早熟、高产、高蛋白及抗大豆花叶病毒的淮南夏播粒用大豆。
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重组蛋白CTB-P97R1对猪支原体肺炎活疫苗滴鼻免疫效果的评价
《中国预防兽医学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要:为提高滴鼻免疫条件下猪支原体肺炎活疫苗的免疫效果,本研究设计引物扩增猪肺炎支原体P97R1基因,融合至霍乱毒素B亚单位(CTB)基因下游,构建了重组质粒p ET-CTB-P97R1。重组菌经IPTG诱导表达、分离纯化得到r CTB-P97R1重组蛋白。利用体外神经节苷脂(GM1)结合试验检测r CTB-P97R1的佐剂活性。随后将r CTB-P97R1与活疫苗混合后滴鼻免疫小鼠,免疫后采血和收集小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF),分别检测其中的特异性Ig G抗体和s Ig A抗体的水平评价免疫效果。结果显示,r CTB-P97R1可以特异性结合GM1,具有生物学活性。小鼠免疫后的血清Ig G抗体显著高于活疫苗对照组(p<0.01),同时产生了高水平的P97R1特异性Ig G抗体(p<0.01);小鼠BALF中的s Ig A抗体也显著高于活疫苗对照组(p<0.05)。结果表明,r CTB-P97R1能够显著增强经滴鼻免疫的猪支原体肺炎活疫苗的免疫效力,同时可提升P97R1的免疫应答,有望作为经黏膜免疫的猪支原体肺炎活疫苗的新型佐剂。
关键词: 霍乱毒素B亚单位 P97R1 佐剂 滴鼻 猪支原体肺炎活疫苗
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硝化抑制剂对小麦产量和氮素吸收利用的影响
《生态学杂志 》 2019 北大核心 CSCD
摘要:为了解硝化抑制剂在麦季的施用效果,采用田间裂区试验设计,主区设施硝化抑制剂(3,4-二甲基吡唑磷酸盐,DMPP)和对照2水平;副区设5个施氮量水平(0、210、240、270、300 kg·hm~(-2)),研究硝化抑制剂对扬麦16产量形成和氮素吸收利用效率的影响。结果表明:施用硝化抑制剂,施氮量为240 kg·hm~(-2)处理小麦产量最高,达到7260 kg·hm~(-2),主要是因为小麦单位面积穗数、每穗粒数和千粒重均表现为较高;施氮量为240 kg·hm~(-2)处理,配合施用硝化抑制剂小麦生物产量也表现为最高;硝化抑制剂对小麦经济系数的影响不大;施用硝化抑制剂能够有效提高麦田土壤速效氮含量,加大氮肥投入量后,硝化抑制剂对麦田土壤速效氮素含量的增加幅度下降;施用硝化抑制剂能够显著提高小麦植株氮素累积量,却明显降低了小麦氮素籽粒生产效率;在较低施氮量(210和240 kg·hm~(-2))处理下,施用硝化抑制剂能够获得相对较高的小麦氮素利用效率,其中,小麦氮肥农学利用率、氮肥吸收利用率、氮肥生理利用率和氮肥偏生产力分别平均为16.1 kg·kg~(-1)、69.9%、23.1kg·kg~(-1)和31.4 kg·kg~(-1);在施用硝化抑制剂条件下,麦季氮肥投入量为240 kg·hm~(-2)时,能够保证小麦产量,并提高氮肥利用效率。
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基于高通量测序开发玉米高效KASP分子标记
《作物学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要:SNP(Single Nucleotide Polymorphism)在基因组中数量多、分布广,适用于大规模、自动化基因型检测.本研究利用205份不同来源的玉米自交系全基因组重测序数据鉴定出一系列多态性高的二态性SNP位点并开发出700个KASP分子标记.其中,202个在46个玉米代表系中得到验证的KASP标记进一步用于系统进化树构建及群体结构分析.结果显示,开发成功的KASP标记在染色体上分布均匀,平均PIC为0.463,平均MAF为0.451.基于KASP标记位点和总SNP位点的聚类分析结果高度吻合.KASP标记位点与总SNP位点的遗传距离相似性系数高达89.5%,能成功区分玉米的杂种优势群.该KASP标记可在玉米种质资源分析、连锁群构建以及杂种优势群划分等方面发挥重要作用.
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基于InDel标记的国内绿豆品种遗传多样性分析及指纹图谱构建
《植物遗传资源学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要:绿豆是一种抗逆性强、适应性广的作物。本研究选取19个多态性丰富、条带稳定的InDel标记用于42个绿豆参试品种的遗传多样性分析及指纹图谱构建。19个InDel标记有效等位变异数介于1.0998~1.9955之间,平均为1.750;期望杂合度变幅0.0918~0.5049,平均值是0.421;Nei′s基因多样性指数变幅0.0907~0.4989,平均值为0.416。多态性信息含量变幅0.0866~0.3744,0.25
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山羊副流感病毒3型感染MDBK细胞的转录组分析
《畜牧兽医学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要:本研究旨在探究山羊副流感病毒3型(CPIV3)感染MDBK细胞后的转录组基因变化情况,丰富CPIV3转录组信息。取1MOI CPIV3JSHA2014-1病毒液感染MDBK细胞,设非感染正常细胞为对照,于24h后收获细胞,提取总RNA,利用Illumina HiSeqTM2500对感染组与对照组进行高通量测序,并用测序评估、基因注释等生物信息学方法进行分析。结果显示,差异表达基因共261个,其中表达上调140个,表达下调121个,经RT-qPCR方法验证8个差异表达的干扰素信号通路相关基因,结果与高通量测序一致。进一步GO分类结果显示,差异表达基因主要涉及细胞生物学进程、构成细胞的组分以及实现的分子功能三个方面,KEGG分析显示这些基因参与代谢、生物系统、细胞进程、基因信息进程和环境信息进程。本研究为深入探究CPIV3的致病机制奠定了基础。
关键词: 山羊副流感病毒3型 MDBK细胞 高通量测序 转录组
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