科研产出
非洲猪瘟病毒荧光定量PCR的建立及4种检测试剂盒的比较
《江苏农业科学 》 2021 北大核心
摘要：为评估目前常用商品化非洲猪瘟荧光定量PCR检测试剂盒,参考OIE推荐的非洲猪瘟病毒（ASFV）荧光定量PCR方法合成引物和探针,建立非洲猪瘟病毒qPCR检测方法（OIE-qPCR）;并与市面4种ASFV检测试剂盒进行了比较。以人工合成的ASFV p72基因TA克隆重组质粒为阳性标准品,OIE-qPCR可以检测到10～102 copies;而4种ASFV荧光定量PCR检测试剂盒中,进口试剂盒TF-qPCR能检测到10 copies,进口试剂盒ID-qPCR和国产试剂盒QD-qPCR能检测到10～102 copies,而国产试剂盒LY-qPCR能检测到102 copies。对健康猪组织样及临床模拟样品的检测结果显示:OIE-qPCR与4种检测试剂盒之间的符合率为92.60%～99.03%。其中,阳性样品CT值的相关系数为0.988～0.997（Perason法）,表明各试剂盒之间相关性良好;但在检测病毒核酸含量较低的样品时,各试剂盒结果之间存在一定差异,其中,TF-qPCR试剂盒显示更高的阳性检出率,ID-qPCR试剂盒和LY-qPCR试剂盒次之。本研究为临床选用非洲猪瘟病毒快速检测试剂盒提供了依据。
关键词： 非洲猪瘟病毒 检测 荧光定量PCR 灵敏性 稳定性 敏感性
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海蓬子皂苷甲调控SHP/STAT信号通路抗肝癌的研究
《中国药理学通报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：目的 研究海蓬子皂苷甲(bigelovii A,BA)诱导细胞凋亡的作用及其机制.方法 使用MTT实验检测BA对肿瘤细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪分析BA对细胞凋亡的影响;Western blot分析p-STAT3、STAT3、p-STAT5、STAT5、SHP-1、SHP-2的表达.结果 20和40μmol·L-1 BA可诱导HepG2细胞发生凋亡,具有剂量依赖性.10、20和40μmol·L-1 BA可抑制IL6诱导的STAT3和STAT5磷酸化,但酪氨酸磷酸酶抑制剂过钒酸钠可逆转该抑制作用,且20μmol·L-1 BA能激活蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1和SHP-2.结论 BA可能通过SHP-1/SHP-2和STAT3/STAT5通路诱导HepG2细胞凋亡.
关键词： 海蓬子皂苷甲 HepG2细胞 细胞凋亡 含SH2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶 信号传导与转录激活因子 白介素6
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33个杨柳品种指纹图谱构建
《南京林业大学学报(自然科学版) 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：【目的】构建杨树与柳树优良品种的指纹图谱,对不同品种进行准确鉴定。【方法】利用柳树EST-SSR标记对33个杨树与柳树优良品种进行通用性检测及基因分型,通过核心引物间的组合构建品种指纹图谱。同时采用非加权组平均法进行聚类,分析各品种间亲缘关系。【结果】12个EST-SSR标记共扩增出97条等位片段,每个位点等位基因数5～13个不等,平均为8.1个。12个位点的多态信息含量（PIC）变化范围为0.637 2～0.834 8,平均为0.781 7。优选的3对核心引物中,SALeSSR0340与SALeSSR0346组合可完全区分12个杨树品种,而SALeSSR0259、SALeSSR0340与SALeSSR0346的组合可完全区分所有的33个品种。聚类分析显示33个品种间的遗传相似系数为0.68～0.96,并分成杨属与柳属两大类,与传统的杨柳科系统分类学一致。各品种间亲缘关系聚类结果与遗传背景相吻合。【结论】对33个杨柳树优良品种进行指纹图谱构建与亲缘关系分析,表明EST-SSR标记可有效反映品种间的差异,建立的基因分型体系准确、高效,可为杨树与柳树品种鉴定、保护与推广工作提供科学依据。
关键词： 杨树 柳树 SSR标记 指纹图谱 亲缘关系 基因分型
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基于玉米50K芯片分析鲜食玉米温-热带杂种优势模式及其育种利用
《江苏农业科学 》 2021 北大核心
摘要：利用基于Illumina平台的玉米MaizeSNP50 （50 K）芯片对90份鲜食玉米自交系材料进行SNP基因分型,获得11 100个高质量SNP变异位点。通过这些位点可以将具有不同遗传背景的90份鲜食玉米资源划分为四大类群,分别为热带糯玉米群（31份）、热带甜玉米群（15份）、温带糯玉米群（11份）、温带甜玉米群（33份）,并对其群体遗传结构进行PCA分析,二者结果与自交系谱系来源保持一致。以上述温、热优势群划分结果为依据,现已知15个自主选育鲜食玉米品种的组配模式为温、热带优势群间杂交,且各品种在农艺性状、品质、抗性等方面均表现出较强的杂种优势,该温-热杂优模式为今后鲜食玉米品种选育提供了新方向。
关键词： 温热带鲜食玉米 SNP基因分型 类群划分 杂优模式 玉米育种
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稻曲病病菌Zn2(Ⅱ)Cys6型转录因子UvZC1基因的克隆及功能分析
《江苏农业学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为明确Zn2（Ⅱ）Cys6型转录因子UvZC1在稻曲病病菌中的功能,利用CRISPR-Cas9结合同源片段双交换的方法,诱导野生型菌株Jt209发生UvZC1基因缺失突变。结果显示,与Jt209相比,UvZC1基因缺失突变体的生长速率和分生孢子量均显著下降,且突变体中部分与稻曲病病菌其他产分生孢子相关基因表达量发生变化;此外,该基因的缺失导致突变体对十二烷基硫酸钠（SDS）更敏感,而对氧化胁迫的耐受性增强;在稻曲病病菌接种水稻后24 h、48 h的侵染早期,UvZC1基因的表达量明显上升,但基因缺失突变体接种水稻后形成的稻曲球数量与野生型之间没有差异。综上所述,UvZC1基因参与稻曲病病菌营养生长、分生孢子产生和侵染水稻过程,还与稻曲病病菌细胞壁的完整性和响应氧化胁迫相关。
关键词： 稻曲病病菌 Zn2（Ⅱ）Cys6转录因子UvZC1 基因敲除 基因功能 致病性
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基肥正位深施对直播水稻产量和化肥利用的影响
《华北农学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为探究基肥施入深度对化肥利用率和水稻生长及营养元素吸收的影响。设置不施肥（T1）、基肥施入深度0（T2）、5 cm（T3）、10 cm（T4）、15 cm（T5）5个处理,对比研究基肥施入深度对机直播水稻产量和化肥利用率的影响。结果表明:基肥施入深度对各生育期水稻叶生物量无明显影响,对成熟期茎生物量影响明显,基肥表施和深施5 cm时可显著增加水稻茎生物量,深施10,15 cm时,茎生物量明显低于基肥表施（P<0.05）;不同生育期水稻叶的氮、磷、钾吸收量受基肥施入深度的影响不明显,但成熟期茎的氮、磷、钾吸收量因基肥施入深度差异显著（P<0.05）;氮素和钾素收获指数受基肥施入深度影响显著（P<0.05）,且随施肥深度呈先增加后降低的趋势,而磷素收获指数呈先降低后增加的趋势;氮、磷、钾各元素利用率最高时的施入深度不同,氮素收获指数最大时,基肥施入深度为10.5 cm;钾素收获指数最大时,基肥施入深度为7.0 cm;基肥施入深度对水稻茎生长和营养元素吸收的影响大于对水稻叶生长和营养元素吸收的影响。适当增加基肥正位施入深度对水稻产量和化肥利用率提高具有积极作用,而且基肥施入深度在7.0～10.5 cm更有利于提高水稻产量和化肥利用率。
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性信息素诱捕器不同悬挂方式对梨小食心虫诱杀效果
《江苏农业科学 》 2021 北大核心
摘要：为推广普及无公害苹果害虫生物防治技术,于苹果开花期至采收期,采用性引诱剂技术,调查梨小食心虫在丰县地区的发生情况和规律,通过对梨小食心虫性信息素诱捕器不同悬挂密度、高度、方向及株行间方式的研究,建立梨小食心虫性诱捕器的科学使用技术体系。结果表明,一年中梨小食心虫虫害的发生高峰期有4次,分别是在6月上旬、7月上旬、8月上旬和9月上旬,在高纺锤形栽培模式苹果园中,设置悬挂诱捕器方向为东西方向,悬挂在行间,悬挂高度为2.0 m以及5个/667 m2的悬挂诱捕器密度时,能够取得最好的防治效果。
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昆虫病原线虫对花生田蛴螬防治效果评价
《江苏农业科学 》 2021 北大核心
摘要：通过生物防治与化学药剂防治花生蛴螬效果对比,明确小卷蛾斯氏线虫防治花生蛴螬的效果和最佳剂量。在田间分别测定不同倍数的昆虫病原线虫（entomopathogenic nematode,简称EPN）、40%辛硫磷乳油和2亿个/g绿僵菌对蛴螬的防治效果,并通过田间蛴螬不同虫龄存活数量、死虫数量及花生总果数、虫果数和洞果数对不同药剂防治效果进行综合评价。结果表明,EPN不同用水量对蛴螬数量、花生虫果率和洞果率的影响均有一定差异,随着EPN用水量的增加蛴螬数量逐渐降低,EPN 12 000 L/hm2在施用后35 d,防虫效果最好,防虫效果为60.4%,蛴螬数量比辛硫磷、绿僵菌和空白对照处理分别少21.6%、24.5%、60.4%,且虫果率及洞果率最小。调查施药后15、35 d的虫龄情况发现,EPN用水量为1 500～9 000 L/hm2与辛硫磷处理时的蛴螬总虫数均呈降低趋势,EPN用水量为12 000 L/hm2时虽然虫数没有降低,但总虫数最少。说明EPN用水量为12 000 L/hm2时对花生蛴螬防治效果较好,既环保又经济;EPN用水量为9 000 L/hm2时与绿僵菌防治效果相当。
关键词： 昆虫病原线虫 生物防治 花生田 蛴螬 小卷蛾斯氏线虫
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富硒乳酸菌的筛选和体外活性的研究
《食品工业科技 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为筛选富硒乳酸菌,利用其将无机硒转化为有机硒,用于开发富硒产品,实验以现存的15株乳酸菌为实验材料,将质量浓度为20μg/mL的硒加入MRS培养基中,检测菌体OD值筛选富硒菌;通过测定生长曲线和检测培养基中硒含量不同时的菌体密度来确定富硒菌合适的加硒时间和富硒浓度;使用3, 3’-二氨基联苯胺（3, 3’-DAB）比色法测定菌株富硒量;通过检测菌体抗氧化活性和耐胆盐、耐人工胃液的能力来评估富硒乳酸菌的体外活性以及在人体肠道内的生存能力。结果表明,从15株菌中筛出9株富硒菌,适宜的加硒时间为2 h,加硒浓度为40μg/mL,硒转化率最高的菌株是JX5,高达81.80%。9株菌富硒之后对自由基DPPH和ABTS的清除效果和耐胆盐和人工胃液的能力均呈现升高趋势,其中,菌株JX5在富硒之后对自由基DPPH和ABTS的清除率和耐胆盐和人工胃液的能力均显著升高,说明乳酸菌将无机硒转化为有机硒之后可提高菌体的体外活性。
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正相高效液相色谱法同时测定肉制品中4种羟基十八碳二烯酸异构体的含量
《食品科学 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为建立同时测定肉制品中13-羟基-92,11E-十八碳二烯酸（13-hy droxy-9Z,11E-octadecadienoic acid,13-Z,E-HODE）、13-羟基-9E,11E-十八碳二烯酸（13-hydroxy-9E,11E-octadecadie noic acid,13-E,E-HODE）、9-羟基-10Z,12E-十八碳二烯酸（9-hydroxy-10Z,12E-octadecadienoic acid,9-Z,E-HODE）、9-羟基-10E,2E-十八碳二烯酸（9-hydroxy-10E,12E-octadecadienoic acid,9-E,E-HODE）的高效液相色谱检测方法,肉制品中的13-Z,EHODE、13-E,E-HODE、9-Z,E-HODE和9-E,E-HODE经甲醇提取、采用Sep-Pak C18柱净化浓缩后,在硅胶柱Absolute SiO2 （250 mm×4.6 mm,5μm）上以正己烷-异丙醇-乙酸（98.3:1.6:0.1,V/V）为流动相进行分离,选用二极管阵列检测器在234 nm进行测定。结果表明,13-Z,E-HODE、13-E,E-HODE、9-Z,E-HODE和9-E,E-HODE分别在质量浓度为0.520.0、0.2510.0、0.7512.5μg/mL和0.57.5μg/mL的范围内线性关系良好（R2分别为0.999 4、0.999 2、0.999 2、0.999 6）,检出限分别为0.075、0.035、0.090、0.060μg/g,定量限分别为0.25、0.12、0.32、0.20μg/g,不同添加水平的平均回收率分别为89.03%、89.03%、89.33%、87.93%。对18种肉制品含量分析表明,所有样本都含有13-Z,E-HODE、13-E,E-HODE、9-Z,E-HODE和9-E,E-HODE,含量分别为1.739.10、0.565.79、2.3711.02、0.785.82μg/g。综上,建立的检测方法快捷、准确、重复性好,可用于同时测定肉制品中13-Z,EHODE、13-E,E-HODE、9-Z,E-HODE和9-E,E-HODE的含量。
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