科研产出
猪繁殖与呼吸综合征病毒M基因原核表达载体的构建与表达
《上海农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要:根据GenBank上已公布的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核酸序列设计1对引物,用RT-PCR方法扩增出去除部分疏水区的PRRSV-M基因,并将其克隆到原核表达载体PET-30a上,得到重组质粒PET-30a-M。将重组质粒转化大肠杆菌transetta(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达、SDS-PAGE电泳及Western blot分析,显示重组蛋白分子量约1 5.7 kD,且此蛋白能与His标签单克隆抗体发生特异性反应。
关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 M基因 原核表达 表达载体 重组蛋白


流式细胞仪鉴定猕猴桃倍性技术研究
《植物研究 》 2014 北大核心 CSCD
摘要:利用流式细胞仪(Flow cytometer,FCM)对不同倍性猕猴桃DNA的相对含量进行测定,建立一套简易、快速的鉴定猕猴桃倍性方法。以二倍体"红阳"猕猴桃为对照,‘81-5'、‘皖翠'猕猴桃为试材,通过筛选最优鉴定叶片部位;改良解离液配方;提高滤膜的目数;过滤次数;增加离心次数等优化鉴定技术。结果表明,露地栽培条件下,茎尖下初展叶是倍性鉴定的最佳部位;两次离心;解离液中2%PVP-30;500目滤膜抽滤两次可以有效解决仪器堵管现象,有效去除杂质峰并获得清晰样品峰。通过优化后的鉴定技术可实现同时测定2个以上倍性的猕猴桃混合样品。


DGGE技术在动物肠道微生物群落变化检测中的研究进展
《上海农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要:介绍了变性梯度凝胶电泳技术的原理及其在动物肠道微生物群落研究中的应用,并对该技术的应用前景进行了展望。


基于生命周期评价的上海市水稻生产的碳足迹
《生态学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要:碳足迹是指由企业、组织或个人引起的碳排放的集合。参照PAS2050规范并结合生命周期评价方法对上海市水稻生产进行了碳足迹评估。结果表明:(1)目前上海市水稻生产的碳排放为11.8114 t CO2e/hm2,折合每吨水稻生产周期的碳足迹为1.2321 t CO2e;(2)稻田温室气体排放是水稻生产最主要的碳排放源,每吨水稻生产的总排放量为0.9507 t CO2e,占水稻生产全部碳排放的77.1%,其中甲烷(CH4)又是最主要的温室气体,对稻田温室气体碳排放的贡献率高达96.6%;(3)化学肥料的施用是第二大碳排放源,每吨水稻生产的总排放量为0.2044 t CO2e,占水稻生产总碳排放的16.5%,其中N最高,排放量为0.1159 t CO2e。因此,上海低碳水稻生产的关键在降低稻田甲烷的排放,另外可通过提高氮肥利用效率,减少氮肥施用等方法减少种植过程中碳排放。


瓶栽刺芹侧耳新品种U5选育及其农艺性状分析
《食用菌学报 》 2014 北大核心
摘要:刺芹侧耳(Pleurotus eryngii,杏鲍菇)在工厂化瓶栽条件下,需要产菇数少,均菇重高,产量高的品种。笔者选用杏鲍菇19号菌株为材料,从其自交子一代(S1代)中筛选出一株单产高于亲本,产菇数和均菇重表现均优于亲本的菌株U5,对菌株U5单产、均菇重、产菇数等重要农艺性状进行了测定,比较U5菌株的S1代群体和19号菌株的S1代群体的农艺性状差异。结果表明:新品种U5菌株单产在100g以上的频次达80%,产菇数少于4个的频次为93%,均菇重小于30g的频次仅为5%。U5菌株S1代在均菇重和产菇数两个农艺性状上都优于19号菌株的S1代,在单产上两株菌株的S1代没有明显的差异。


HPLC测定姬松茸中谷胱甘肽的含量
《天然产物研究与开发 》 2014 北大核心 CSCD
摘要:本实验建立了HPLC法测定姬松茸中谷胱甘肽的方法,在水提条件下,用Waters RP18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5.0μm),以0.1%三氟乙酸水溶液-甲醇(98∶2,v/v)为流动相,流速1.0 mL/min,柱温35℃,检测波长200 nm,进样量10μL,谷胱甘肽在8 min内出峰。该方法中谷胱甘肽标准品在8~160μg/mL范围内线性良好,R2=0.9997,检出限为0.125μg/mL,加标回收率在94.18%~95.80%之间,RSD<2%。本方法快速、简便、准确,灵敏度高,适合批量样品的检测与分析。


重组猪α-干扰素的纯化及其抗病毒活性测定
《上海农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要:分别采用PEG 6000沉淀法和Sephadex G-50凝胶色谱法纯化毕赤酵母分泌表达的重组猪α-干扰素(PoIFN-α)。正交试验结果显示:PEG 6000沉淀法最佳分离条件为pH 6.0、NaCl 0.2 mol/L、PEG 60000.1 g/mL,蛋白回收率约80%;纯化后蛋白效价为2.9×10~3 IU/mL,比活为1.04×10~3 IU/mg。通过Sephadex G-50凝胶色谱纯化,重组PolFN-α的回收率为60%左右,纯度达到90%;纯化后蛋白效价为8×10~3 IU/mL,比活为6.7×10~3 IU/mg。


转基因水稻T1C-1 Bt Cry1C基因的克隆、表达、纯化和实质等同性研究
《上海农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要:将质粒p ET30a(+)-Cry1C转入大肠杆菌进行表达,对其表达条件进行了优化,并评价了蛋白的表达和纯化效果。结果显示:最佳诱导时间、IPTG的终浓度和诱导温度分别为5 h、0.6 mmol/L和25°C。大多数的靶蛋白以包涵体形式表达,通过纯化和复性,最终获得高纯度有活性的靶蛋白。通过SDS-PAGE Western Blot、糖蛋白测定、LC MS/MS鉴定和杀虫试验表明:大肠杆菌中表达的Cry1C蛋白和转基因水稻的Cry1C蛋白具有实质等同性。
关键词: 转基因水稻 Cry1C蛋白 实质等同性 表达 纯化


专业学术期刊稿源经营策略——《食用菌学报》加强自身建设实践
《编辑学报 》 2014 北大核心 CSSCI
摘要:在当今稿源受到SCI热冲击情况下,学术期刊要拓展自己的稿源必须增强自身实力和魅力建设。《食用菌学报》自2006年一直在进行加强自身建设的探索和实践,提高了学报的学术影响力和对高质量稿件的吸引力。

