科研产出
猪轮状病毒NJ2012株VP8基因序列分析及原核表达
《畜牧与兽医 》 2020 北大核心
摘要:为深入研究猪轮状病毒VP8蛋白的结构和功能,以及研制新型猪轮状病毒疫苗,利用生物信息学软件DNAStar对本研究室保存的1株A组G9P7型猪轮状病毒NJ2012的VP8基因序列进行核苷酸和氨基酸同源性分析;设计并合成1对引物,采用RT-PCR方法扩增VP8蛋白编码基因,用限制性核酸内切酶对目的片段与pET28a(+)原核表达载体进行双酶切,构建了重组原核表达载体,用IPTG诱导表达,并进行Western blot验证.结果显示:NJ2012毒株的VP8基因序列与参考毒株序列的核苷酸同源性为53.9%~99.2%,氨基酸同源性为42.1%~97.5%;VP8基因克隆成功,经测序与目的基因完全一致;经鉴定,构建的重组原核表达质粒pET28a-VP8能够在DE3宿主菌中表达,该蛋白以包涵体形式存在;Western blot结果显示该蛋白可与抗His-tag鼠单克隆抗体发生特异性反应.本研究实现了VP8蛋白在原核系统中稳定表达,为调查该蛋白的免疫原性及研制安全、高效的猪轮状病毒亚单位疫苗提供了参考.
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小麦抗赤霉病品种筛选
《江苏农业科学 》 2020 北大核心
摘要:为提高小麦生产水平及抗赤霉病特性,连续3年采用病麦粒表土接种法对不同小麦品种(系)赤霉病抗性、丰产性以及DON毒素含量进行比较分析.结果表明,小麦抽穗至扬花期是赤霉病发生的关键时期,尤其是小麦齐穗后第1个扬花到扬花结束历时天数以及期间的天气情况为赤霉病流行提供了环境条件.华麦7号、扬麦21、宁麦13、农丰88、宁麦资126等品种对赤霉病抗性较高,扬麦15抗性较差.华麦7号、宁麦13、宁麦26等籽粒中DON毒素含量较低.宁麦13、扬麦21、华麦7号、华麦8号、扬麦22、扬麦28丰产性较高.综合而言,华麦7号、宁麦13、扬麦21等是赤霉病抗性较高、产量较高的小麦品种.随着赤霉病流行年份增多,筛选出适宜苏中地区种植的高产、抗赤霉病小麦品种具有重要意义.
关键词: 小麦 赤霉病 品种筛选 DON毒素 抗病性 丰产性
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我国生猪调控政策对猪肉价格波动的影响
《江苏农业科学 》 2020 北大核心
摘要:基于2004-2018年周度猪肉价格、生猪疫情时间序列数据,采用一阶对数差分形式的广义自回归条件异方差模型(GARCH)和门限自回归条件异方差模型(TARCH),实证分析不同阶段猪肉价格的波动特征、不同生猪调控政策对猪肉价格波动的影响.结果表明,猪肉价格波动呈现波动性集聚特征和非对称特征,价格下跌引起的波动大于价格上涨引起的波动.不同的生猪调控政策对猪肉价格波动的影响不一样,生猪补贴政策、猪肉储备政策对猪肉价格波动起到抑制作用,可以减小市场波动风险;而近年来实施的"禁养区"等生猪调控政策提高了猪肉价格波动率.
关键词: 生猪补贴政策 猪肉储备政策 禁养区政策 猪肉价格波动 集聚特征 非对称特征 ARCH类模型
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两种方法提取的鸡肺胶原蛋白性质及保湿性研究
《食品工业科技 》 2020 北大核心 CSCD
摘要:本文以鸡肺为原材料,利用酸提和超声辅助酸提法提取胶原蛋白,并对其性质及保湿性进行研究.结果表明,所提取的鸡肺胶原蛋白经氨基酸分析显示组成基本相似,甘氨酸含量最高,分别占24.12%和23.93%,亚氨基酸含量仅次之,分别占19.74%和22.28%.酸提和超声辅助酸提胶原蛋白在229.0和224.9 nm处有胶原蛋白的特征紫外吸收峰.SDS-PAGE显示两种鸡肺胶原蛋白中均含有α1链、α2链、少量的β链和γ链,傅里叶变换红外光谱及X-射线衍射图谱共同表明两种方法提取的鸡肺胶原蛋白分子排列紧密,均保持了原有的三螺旋结构,说明在超声辅助酸提过程中胶原蛋白的结构保持完好,三螺旋结构未被破坏.酸提的胶原蛋白等电点为7,粒径分布在340 nm左右;超声辅助酸提的胶原蛋白等电点为6,粒径分布在295 nm左右,结合胶原蛋白的溶解性说明了超声辅助酸提可破坏胶原蛋白的氢键,改变蛋白质的颗粒大小和聚集形态.扫描电镜结果表明超声辅助酸提的胶原蛋白结构呈连续纤维状并多孔,且颗粒直径明显减小.在放置24 h时,超声辅助酸提胶原蛋白的吸水性和保水性分别为常规酸提胶原蛋白的1.25倍和1.17倍.综上所述,超声辅助酸提未破坏胶原蛋白特有的三螺旋结构,通过改变氢键和蛋白的颗粒大小使得胶原蛋白具有更好的溶解性和吸湿保湿性.
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高效液相色谱-串联质谱法检测原桃胶中左旋肉碱的含量
《江苏农业科学 》 2020 北大核心
摘要:利用超声波辅助提取技术和高效液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)对原桃胶中的左旋肉碱进行定量分析.以左旋肉碱的含量为研究对象,考察不同提取剂的提取效率,优化左旋肉碱的液质联用分析条件.结果表明,1 g原桃胶经80%甲醇于60℃、300 W超声提取1 h处理的左旋肉碱得率最高;左旋肉碱在相应含量范围内的线性良好,r~2=0.995;左旋肉碱加标量为140~560μg/kg时,回收率为89.7%~109.9%,相对标准偏差为1.4%~4.5%,方法定量限为15.1 pg.利用建立的分析方法测定6批桃胶样品中的左旋肉碱,结果显示,得率为160~330μg/kg.综上可得,该方法可准确快速地对桃胶中的左旋肉碱进行定量分析.
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猪乙型脑炎病毒SYBR-GreenⅠ实时荧光定量PCR方法的建立
《江苏农业科学 》 2020 北大核心
摘要:为建立猪乙型脑炎病毒(JEV)的定量检测方法,根据E基因序列,设计1对特异性引物,建立检测JEV的荧光定量PCR方法.结果显示,该方法灵敏度达到10~3拷贝/μL,对猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病毒(PRV)均无交叉反应,具有良好的特异性和重复性;采用JEV攻毒小鼠,荧光定量PCR比普通PCR更能灵敏地检出组织带毒量.该方法可用于组织样品中乙脑病毒的定量检测以及临床乙脑病毒感染的早期检测和定量分析猪乙脑病毒感染程度.
关键词: 猪乙脑病病毒 SYBR-GreenⅠ 荧光定量PCR 检测
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聚六亚甲基双胍对金鱼嗜水气单胞菌的杀灭及金鱼细菌性疾病的治疗效果
《贵州农业科学 》 2020 北大核心
摘要:为治疗金鱼春秋季爆发的细菌性疾病提供参考,进行聚六亚甲基双胍盐酸盐(PHMB)对金鱼嗜水气单胞菌的杀灭试验、对金鱼的急性毒性试验和对金鱼细菌性疾病的治疗试验.结果表明:PHMB浓度为0.01mg/L、0.05mg/L和0.40mg/L时对嗜水气单胞菌的杀菌率分别为73.85%、99.00%和100%,对金鱼24h、48h、72h和96h的LC50分别是0.97mg/L、0.90mg/L、0.71mg/L和0.59mg/L,安全浓度为0.06mg/L;PHMB浓度为0.05mg/L和0.1mg/L时,在3d内池塘细菌总量分别降至起始值的6.15%和1.15%,死鱼率降至0.04%和0.02%.0.05mg/L PHMB能有效防治金鱼嗜水气单胞菌引起的细菌性疾病.
关键词: 聚六亚甲基双胍 金鱼细菌性疾病 嗜水气单胞菌 杀菌 毒性 治疗
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