科研产出
蚕豆中三叶草黄脉病毒编码的NIa-Pro蛋白亚细胞定位特征初步研究
《园艺学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：三叶草黄脉病毒(Clover yellow vein virus,ClYVV)是马铃薯Y病毒属(Potyvirus)的重要成员。核内涵体a蛋白酶(NuclearInclusionaProtease,NIa-Pro)是一种由Potyvirus病毒编码的具有蛋白水解酶活性的蛋白,在病毒与寄主互作过程中参与多聚蛋白切割等多种功能的行使。选择2018年在江苏发现的ClYVV蚕豆分离物作为研究对象,对其NIa-Pro蛋白基因进行了克隆和序列测定,结果显示其全长729bp,编码1个24.3kD的蛋白。为进一步研究其亚细胞定位特征,构建了融合YFP荧光标签的重组表达载体YFP-NIa-Pro,利用农杆菌浸润法接种本氏烟(Nicotiana benthamiana)。激光共聚焦显微镜观察结果显示,浸润处理后本氏烟叶片表皮细胞的细胞质及细胞核都有较强的荧光信号。取浸润区样品通过Western-blot检测,结果显示YFP-NIa-Pro在本氏烟叶片中正常表达。这些结果初步表明ClYVV编码的NIa-Pro在细胞质和细胞核均有分布。
关键词： 蚕豆 三叶草黄脉病毒 核内涵体a蛋白酶 亚细胞定位
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多花黑麦草+燕麦混播草地地上生物量和营养品质动态研究
《草地学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：为探讨添加不同播量的燕麦(Avena sativa L.)进行混播以及刈割茬次对多花黑麦草(Lolium multiflorum Lam.)草地地上生物量和营养品质的影响,本研究设100%多花黑麦草(H_0)、100%多花黑麦草+25%燕麦(HY_1)、100%多花黑麦草+50%燕麦(HY_2)、100%多花黑麦草+75%燕麦(HY_3)与100%燕麦(Y_0)5个处理,通过测定株高、分蘖、茎叶比、鲜干草产量、粗蛋白含量、体外消化率、纤维素及水溶性碳水化合物含量来研究各处理地上生物量和营养品质动态变化。结果表明,不同混播比例对分蘖数、可消化干物质含量、中性洗涤纤维含量和累计粗蛋白产量有显著性影响(P<0.05),而对株高、茎叶比、水溶性碳水化合物含量等其他田间生产性状和营养品质指标无显著性影响(P<0.05);刈割茬次对除株高和粗蛋白含量以外的其他指标均具有显著性影响(P<0.05);不同混播比例与刈割茬次对株高、分蘖数、茎叶比、粗蛋白含量、酸性洗涤纤维含量、单茬干物质产量、单茬粗蛋白产量、可消化干物质含量和单茬可消化干物质产量具有交互效应(P<0.05)。处理HY_1(25%燕麦添加量)的资源互补利用性较好,多花黑麦草竞争优势稳定,饲草饲喂价值及生产性能均较高,累计干物质产量达19 445.30 kg·hm~(-2)、累计粗蛋白产量达2 814.04 kg·hm~(-2)、累计可消化干物质产量达13 135.30 kg·hm~(-2),为四川农区多花黑麦草人工草地最佳燕麦混播组合。
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柳树NAC基因的克隆与表达模式分析
《南京林业大学学报(自然科学版) 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：【目的】研究柳树重要抗逆转录因子基因家族,为揭示柳树抗逆分子机制提供理论依据。【方法】以‘苏柳2345’的转录组测序数据为基础,克隆了柳树NAC家族,并分析其序列结构、组织表达特异性以及不同胁迫条件下的表达模式。【结果】克隆的两个柳树NAC转录因子基因分别命名为Sl NAC1和Sl NAC2。生物信息学分析表明:Sl NAC1序列全长为1 126 bp,编码产物含343个氨基酸残基,为稳定的亲水蛋白,定位于细胞核; Sl NAC2序列全长为1 139 bp,编码产物含291个氨基酸残基,为稳定的亲水蛋白,定位于叶绿体。两个基因均具有典型的NAM结构域及A、B、C、D、E 5个亚结构域,还包括共同的LPPG、YPNG和DEE保守基序及NAC抑制结构域。系统进化树分析显示,Sl NAC1基因与木薯亲缘关系最近,Sl NAC2基因与茄子亲缘关系最近。定量PCR结果显示Sl NAC1和Sl NAC2均在叶片表达,根中没有表达,为叶片特异性转录因子。定量PCR结果显示Sl NAC1基因在脱落酸(ABA)和赤霉素(GA)处理24 h后显著上调,Sl NAC2基因在聚乙二醇(PEG)、ABA和GA胁迫后显著上调。【结论】柳树Sl NAC1基因在非生物胁迫下表达较为稳定,受ABA和GA胁迫诱导; Sl NAC2受干旱、ABA和GA胁迫诱导,受影响明显高于Sl NAC1,不受乙烯剂(ETH)胁迫影响。推测Sl NAC1和Sl NAC2参与GA、ABA信号传导,可能不参与ETH的信号途径。
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青梅组分抗食源性致病菌活性分析
《中国食品学报 》 2020 EI 北大核心 CSCD
摘要：为研究青梅中具有抗食源性致病菌活性的部位和成分,将青梅的乙醇提取液用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取,对4个萃取组分进行抗菌活性的测定,并对活性最高的组分进行液相色谱-质谱(LC-MS)分析。结果表明:各组分对5种食源性致病菌都有一定的抑菌活性,尤以乙酸乙酯萃取物的抑菌能力最强。对乙酸乙酯萃取物进行LC-MS分析,结果表明,分离效果很好,其主要化学成分类型为咖啡酰莽草酸及其衍生物。提示:咖啡酰莽草酸类化合物具有较好的抗菌活性。
关键词： 青梅 萃取组分 抑菌活性 食源性致病菌 液相色谱-质谱法
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碳纳米管在茶叶品质与安全检测中的应用进展
《食品科学 》 2020 EI 北大核心 CSCD
摘要：茶叶是世界上主要的饮料作物之一,具有独特的香气、药用和保健功效,深受消费者喜爱。随着公众营养和健康意识的提高,茶叶的品质和安全问题越来越受到关注,国内外对此开展了大量的研究工作。由于茶叶种类繁多、成分复杂,给茶叶中各类营养成分和危害因子的检测分析带来了困难和挑战。碳纳米管是国内外广泛关注的一类纳米碳材料,由于其特殊的结构和优异的理化性能,近年来在茶叶质量安全检测领域被广范应用。本文简述了碳纳米管的类型和特点,论述了近几年碳纳米管在茶叶品质与安全检测领域应用的相关进展,以期为今后开展相关研究提供参考。
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稻瘟病广谱抗性基因Pigm特异性分子标记的开发和应用
《中国水稻科学 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：【目的】来自籼稻品种谷梅4号的Pigm是一个对稻瘟病菌具有广谱和持久抗性的重要基因。为有效提高Pigm基因的选择效率,有必要开发具有特异性的共显性分子标记进行辅助育种。【方法】本研究根据谷梅4号Pigm位点存在的特异性核苷酸变异,利用Tetra-primerARMS-PCR和KASP两种不同的基因分型技术开发出分子标记T-Pigm和K-Pigm,对不同品种(品系)以及淮稻9号/谷梅4号的F_2分离群体进行基因型检测,并结合穗颈瘟人工接种鉴定,对标记的准确性进行评价。【结果】序列比对分析表明,谷梅4号Pigm位点中Pigm-Nbs2基因起始密码子上游515 bp处存在一个特殊的单核苷酸变异。利用已开发的两种类型的分子标记能够有效区分3种不同的基因型,且基因型与穗颈瘟人工接种鉴定结果完全一致。【结论】利用分子标记T-Pigm和K-Pigm可以实现对Pigm基因型快速、准确的检测,加快抗稻瘟病水稻新品种的选育进程。
关键词： 稻瘟病 Pigm 特异性标记 四引物扩增受阻突变体系PCR 竞争性等位基因特异性PCR
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荷叶离褶伞多糖提取工艺优化及抗氧化活性研究
《食品工业科技 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：本研究以荷叶离褶伞多糖为对象,采用单因素与响应面法对多糖提取温度、提取时间、液料比、次数进行优化,进一步研究了荷叶离褶伞多糖的抗氧化活性.结果表明:在提取温度为89℃,时间为3 h,液料比为30∶1 (mL/g),提取2次时,荷叶离褶伞多糖得率为5.35%±0.12%,与预测值相近.荷叶离褶伞多糖的抗氧化活性与多糖浓度在0~1.0 mg/mL范围内呈现剂量依赖关系,多糖浓度在1.0 mg/mL时,DPPH和ABTS自由基清除率分别达到45.87%±2.12%和76.49%±1.56%.荷叶离褶伞多糖对DPPH和ABTS自由基半抑制浓度IC50分别为1.40、0.44 mg/mL,说明荷叶离褶伞多糖具有较好的抗氧化能力.
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小麦纹枯病抗性QTL分析
《麦类作物学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：小麦纹枯病是世界性的小麦重要病害之一,培育和使用抗病品种是减轻纹枯病危害最经济和有效的手段.为了挖掘更多的小麦纹枯病抗性QTL用于小麦标记辅助育种,本研究构建了CI12633和扬麦158重组自交系群体,采用二代测序方法开发SNP分子标记,并对群体中的94个家系进行基因型分析,构建遗传连锁图;采用牙签接种和病麦粒接种的方法鉴定重组自交系群体纹枯病抗性,进而对小麦纹枯病抗性QTL进行定位.结果显示,构建的遗传连锁图包含3 355个分子标记,遗传距离为2 510.66 cM,共有31个连锁群,均能分配到相应的染色体;在5A(2)、6A、1B、2B、3B、4B、5B、6B(2)、7B、1D、2D(2)、4D和7D染色体共发现16个与小麦纹枯病抗性相关的QTL,单个QTL可解释9.0%~26.8%的表型变异;除了7B染色体的QTL来源于感病品种扬麦158,其余QTL均来自抗病品种CI12633;3B、7D和5A(Chr5A564101963)染色体的QTL与已有报道一致,其余均为新发现的QTL.发现的QTL和紧密连锁分子标记为今后小麦抗纹枯病分子标记辅助育种以及抗纹枯病基因的克隆提供帮助.
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解磷菌JL-1对磷矿粉降解性能的研究
《生物技术通报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：以不动杆菌(Acinetobacter indicus)JL-1为菌种,磷矿粉为磷源,测试解磷菌JL-1对磷矿粉的降解能力.通过单因素实验及响应面试验得到最优降解磷矿粉条件为:以葡萄糖为碳源,浓度为17 g/L,以质量比为1:1的硫酸铵与酵母粉为氮源,浓度为1.2 g/L,磷矿粉添加量为2.0 g/L,温度为28℃,初始pH为7.0,接种量为1%,在此最优条件下检测动态解磷曲线,在60 h时降解磷矿粉的效果最好,此时解磷量为4.65μg/mL,溶磷率为2.34%,菌落数达到最高,为10.65 log(CFU/mL),pH达到最低.砂培实验表明磷矿粉中溶解的有效磷的72.08% 会被菌体直接释放出来,7.63% 会储存在菌体细胞中,20.29% 会被菌体同化.
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南美白对虾4种病原体可视化快速检测试剂盒(生物芯片法)的研发
《江苏农业学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：利用反向点杂交技术,研制灵敏度较高的南美白对虾4种病原体检测试剂盒,其检测指标包括致对虾急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌(VpAHPND)、对虾白斑综合征病毒(WSSV)、对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)、对虾肝肠胞虫(EHP),用重组质粒分别对其进行了最低检测限测试,并与现有推荐方法进行比较。本研究研发的检测试剂盒对4种病原体的最低检测限为1μl 10～100拷贝。特异性检测结果表明,4种病原体彼此不产生交叉反应,特异性良好,与各病原体推荐检测方法的结果相比,阳性符合率完全一致。本研究研发的检测试剂盒具有操作方便,灵敏度高,特异性好,检测时间短,设备要求简单等特点,适合应用于南美白对虾VpAHPND、WSSV、IHHNV、EHP的检测、筛查工作中。
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