科研产出
Sf9昆虫细胞系的致瘤性研究
《江苏农业科学 》 2019 北大核心
摘要：为确定Sf9昆虫细胞系作为疫苗生产细胞株的安全性,检测了Sf9细胞对裸鼠的致瘤性.将3周龄SPF级雌性裸鼠随机分为5组,分别为Sf9基础细胞库细胞组、Sf9最高限制代次细胞组、阳性对照Hep-2细胞组、阴性对照CEF细胞组和空白对照组,以各自细胞悬液皮下接种裸鼠.在接种后21 d和84 d观察接种部位肿瘤形成情况,并进行病理组织学检查.结果显示,接种后21 d,Hep-2细胞组裸鼠注射部位形成米粒大小结节,经病理组织学检查为鳞状细胞癌,而CEF细胞组和Sf9细胞组注射部位均无结节.接种后84 d,经病理组织学检查,CEF细胞组和Sf9细胞组均无肿瘤形成.本研究表明基础代次和最高限制代次Sf9细胞均不具有致瘤性,Sf9细胞可用于疫苗生产.
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沼液施用量对大麦农艺性状及饲用品质的影响
《家畜生态学报 》 2019 北大核心
摘要：为明确大麦施用沼液的肥效及所生产大麦的饲用价值,设计N1-N10 10个处理水平以及空白和常规处理12个处理,每个处理重复3次,分析大麦的生物量指标、产量指标以及全株饲用品质指标。结果表明:随着沼液肥施用量的增加,大麦生物量呈上升趋势,N8-N10与常规(CF)差异显著(P<0.05);千粒重呈下降趋势,但N4-N10与常规处理(CF)差异不显著(P>0.05);籽实中蛋白质含量平均值成上升趋势,N8-N10处理蛋白质含量与常规处理(CF)差异显著(P<0.05);总淀粉含量呈递减趋势,N8-N10处理与其他处理(除N6、N7)比较差异显著(P<0.05);在大麦整株饲用品质方面,粗蛋白含量呈现递增趋势,N8-N10处理水平则明显高于常规处理(CF),且差异显著(P<0.05);植株中粗灰分平均含量上升,N10与其他处理(除N6)比较差异显著(P<0.05);沼液施用达到N4水平(沼液含N量相当于常规80%)后,N4-N9处理内粗纤维含量无显著差异(P>0.05);植株的中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)含量增加,但差异不显著(P>0.05);N1-N8的RFV值高于100,整株饲用营养价值较高。研究表明,沼液的施用利于提升大麦生物量、籽实和植株蛋白质含量,提示沼液肥在饲用大麦生产中替代化肥潜力巨大,利于大麦饲用价值的提升。
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甘蓝种子丸粒化包衣加工工艺及其对品质的影响
《中国农机化学报 》 2019 北大核心
摘要：针对目前甘蓝丸粒化种子在机械精量播种中颗粒硬度低、包衣材料容易脱落的问题,本研究采用粘性粉体材料白粘土、高岭土、膨润土分别与滑石粉配比进行甘蓝种子丸粒化包衣处理.分析包衣材料的基本理化性质,测定丸粒种子的粒径、千粒重、硬度、粉尘脱落率、发芽势、发芽率及发芽指数.结果表明,粘性材料质量占比越高,丸粒种子的硬度越大,粉尘脱落越低.粘性材料同等质量占比,粘性包衣材料的聚合力:膨润土>白粘土>高岭土,其与丸粒种子的硬度呈正相关,与粉尘脱落率呈负相关,当白粘土和膨润土质量占比达到30%时,对丸粒种子的出芽势、出芽率造成不良影响,并且膨润土丸粒种子表面有较严重的凸起,影响种子的流动性.综合比较白粘土质量占比20%时,丸粒种子硬度4.982 N、粉尘脱落率8.85*10-4%、发芽率0.83、发芽指数14.87为较好的包衣材料配比.该丸粒种子能满足机械精量播种的要求,也为进一步研究丸粒化包衣种子结构强度及其他包衣材料奠定良好的基础.
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外源二乙基二硫代氨基甲酸钠对花期淹水大豆根系抗氧化系统的影响
《中国油料作物学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：为明确二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)对淹水胁迫下大豆根系抗氧化系统的调控作用,以耐涝性大豆品种南农1138-2和敏感性品种徐豆18为材料,通过盆栽试验,调查DDTC对花期短期(8d)淹水胁迫下大豆根系抗氧化系统的影响。结果发现:淹水胁迫下,与徐豆18相比南农1138-2根系干质量下降幅度、膜脂过氧化程度和活性氧(ROS)水平更小;同时抗坏血酸过氧化物酶(APX)、谷胱甘肽还原酶(GR)、脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)活性以及还原型抗坏血酸(AsA)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量增加幅度更大,表明南农1138-2在淹水胁迫下根系抗氧化能力更强。预喷施DDTC(在大豆初花期(R1)叶面喷施15mmol·L-1DDTC,喷施1d后进行淹水胁迫8d)能进一步提高两品种根系中过氧化物酶(POD)、APX、DHAR和GR活性、AsA含量和AsA/DHA比值,显著降低根系ROS水平和膜脂过氧化,增加根系干重,表明DDTC通过调节抗氧化系统中抗氧化酶活性和非酶抗氧化剂含量提高了根系活性氧清除能力。
关键词： 淹水胁迫 二乙基二硫代氨基甲酸钠 大豆 花期 根系 抗氧化
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青藏高原裸大麦种质资源形态多样性分析
《浙江农业学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：为了解青藏高原裸大麦区种质资源的遗传多样性,提高该地区裸大麦种质资源利用效率,对86份青藏裸大麦种质资源的形态多样性进行鉴定。结果表明:该地区裸大麦种质资源遗传多样性丰富,主穗长的形态多样性指数最高,为2.05;株型的遗传多样性指数最低,为0.47。总体表现为数量性状形态多样性指数大于质量性状。基于形态性状的聚类分析把86份材料聚为4类,第Ⅰ类是二棱种质,为高秆大穗大粒型,第Ⅱ类种质为矮秆多粒长穗型,第Ⅲ类种质为短穗型,第Ⅳ类种质为高秆多粒型。采用主成分分析进行种质评价,提取前7个主成分即可概括全部性状的大部分生物学信息,筛选出适合江苏地区生长的优良种质资源,为裸大麦种质资源的收集和利用提供理论依据。
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江苏省淮安市设施辣椒病虫害的发生及防治现状调研分析
《江苏农业科学 》 2019 北大核心
摘要：为明确江苏省辣椒主栽区淮安市设施辣椒病虫害的发生及防治情况,于2016年对淮安市淮阴区10个辣椒种植村庄的50位种植户(约22 hm2)进行设施辣椒主要病虫害发生及防治现状的走访和现场问卷调查.结果 表明,设施辣椒栽培过程中发生的主要病害有死棵、灰霉病、疑似猝倒病(立枯症状)和顶叶黄化脱落的病毒病,对病害的防治主要采用打保险药(混合多种药剂预防)和看到症状再打的策略;发生的主要虫害有青虫、蚜虫、烟粉虱,螨虫和蜗牛也偶有发生,对害虫采取见虫就打的防治策略.农户使用药剂防治的频次主要集中于6~ 10次/茬(51.02%)和11 ~15次/茬(46.94%),用药间隔时间主要集中在7~10dL/次(75.51%),用药成本在100 ~300元之间的农户占比为71.43%.2017年,通过对调查地辣椒田间发病病株的症状诊断和疑似病原菌的分离鉴定,最终确定引起辣椒死棵、萎蔫、顶叶发黄脱落等症状的病原菌,明确病害种类,其中引起设施辣椒定植培土后发生死棵的主要是立枯病,引起辣椒中后期青枯萎蔫的主要是根腐病(由疫霉或镰刀菌引起),而导致顶叶发黄脱落的主要是病毒病,引起辣椒分枝褐变、叶片枯萎的主要是菌核病.通过调查研究,可以初步明确近年来淮安市设施辣椒主要病虫害的发生特点,为当地蔬菜植保部门指导辣椒生产过程中病虫害的预测和防治提供参考.
关键词： 设施辣椒 病虫害调查 病害诊断 绿色植保 绿水青山就是金山银山
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两株魏斯氏菌的益生特性比较
《食品与发酵工业 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：以分离自泡菜的2株魏斯氏菌为研究对象,对其耐酸、耐胆盐、耐人工肠液、抑菌、降解胆固醇和甘油三酯、表面特性的益生特性进行了比较研究。实验结果表明:绿色魏斯菌ZY-6的耐酸特性好于希腊魏斯菌WS-419,pH值为2时的存活率分别为45. 18%和24. 65%,pH为3和4时,存活率> 100%;在质量浓度3 g/L的胆盐浓度中存活率分别为75. 89%和72. 05%,都显示出较好的胆盐耐受性; 2株菌对人工肠液具有一定的抗性,3 h后的存活率在80%左右; ZY-6的抑菌活性稍好于WS-419,两者对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌的抑菌圈直径分别为22. 61、27. 02、30. 53 mm和22. 59、25. 82、27. 96 mm; 2株魏斯菌降解胆固醇的能力相似,降解率分别为32. 79%和32. 13%; WS-419对甘油三酯的降解率好于ZY-6,两者分别为42. 80%和26. 70%; 2株菌的表面疏水性和表面凝集性皆大于60%,显示出较好的表面特性。绿色魏斯菌ZY-6和希腊魏斯菌WS-419的益生性能较好,可作为功能性食品开发的候选菌株。
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鸭寡腺苷酸合成酶样蛋白原核表达及多克隆抗体制备
《中国农业科学 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：【目的】已有研究获得鸭寡腺苷酸合成酶样蛋白(oligoadenylate synthase-like protein,OASL)基因全长,并且证明其可以抑制鸭坦布苏病毒复制。因此在通过原核表达和多克隆抗体制备技术获得带有GST标签的鸭寡腺苷酸合成酶样融合蛋白和该融合蛋白的特异性抗体,为进一步明确鸭寡腺苷酸合成酶样蛋白抑制病毒复制分子机制提供物质基础。【方法】根据前期研究已经获得的鸭OASL基因开放阅读框(open reading frame,ORF)序列设计全长扩增引物pGEX-OAS-F和pGEX-OAS-R。利用动物组织总RNA提取试剂盒提取健康樱桃谷鸭幼鸭脾脏总RNA;通过RT-PCR,利用随机引物和M-MLV反转录酶扩增获得鸭脾脏cDNA,以cDNA为模板,利用设计合成的pGEX-OAS-F和pGEX-OAS-R引物进行PCR扩增,扩增后的产物经1.5%的琼脂糖凝胶电泳检测,检测后将片段大小与目的条带大小相同的PCR产物切胶纯化,纯化后的产物克隆到pEASY-T1载体,挑取单克隆菌落送基因公司测序,测序验证正确的PCR纯化产物通过限制性内切酶Bam H I和Xho I酶切连接至带GST标签的原核表达载体pGEX-4t-1。重组质粒转化到大肠杆菌BL21(PLYSS)~(TM),经终浓度为0.5 mmol·L~(-1)的IPTG诱导表达4 h后检测该融合蛋白的表达情况。离心收集诱导表达的大肠杆菌菌液,进行超声波破碎处理,收集上清及沉淀,采用SDS-PAGE和Western-blotting分析融合蛋白的表达。利用GST柱亲和纯化上清中的可溶性融合蛋白,经20 mmol·L~(-1) Tris-HCL和0.10 mol·L~(-1)NaCL溶液透析后获取纯化的融合蛋白,采用SDS-PAGE分析纯化的融合蛋白。采用皮下多点注射方法免疫新西兰白兔,经3次免疫后制备多克隆抗血清,采用SDS-PAGE和间接免疫荧光检测抗体的纯度和效价。【结果】克隆测序结果表明,设计合成的鸭OASL基因全长扩增引物pGEX-OAS-F和pGEX-OAS-R能够从樱桃谷鸭脾脏中获得鸭OASL基因ORF序列,并且序列组成与前期研究结果一致。被扩增的序列经酶切后,鸭OASL基因能够与pGEX-4t-1载体成功连接,IPTG诱导后可以在大肠杆菌BL21(PLYSS)TM中表达,表达产物经SDS-PAGE和Western-blotting分析显示,融合蛋白大小约为84 kD,主要以可溶性蛋白形式表达,在包涵体中也有少量表达。经GST亲和层析纯化上清中的可溶性鸭OASL融合蛋白,得到0.5 mmol·L~(-1)纯度抗原蛋白。经3轮免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,纯化后ELISA结果显示鸭OASL蛋白抗体具有较好的灵敏度,最高效价为1:512 000,SDS-PAGE结果显示抗体大小为55 kD,与ORF理论值相同,且抗体纯度为90%以上。【结论】设计合成的引物能够成功地获得鸭脾脏OASL基因ORF序列,该ORF能够在原核细胞中成功表达,表达的融合蛋白通过免疫新西兰兔能够获得高纯度和高效价的鸭OASL多克隆抗体,研究成果为后续深入研究鸭OASL蛋白抑制病毒复制分子机制奠定坚实的物质基础。
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调理剂对茶园土壤和茶叶产量及品质的影响
《土壤 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：通过田间试验,研究不同调理剂与茶叶配方肥配施对茶园土壤性质和茶叶产量品质构成的影响。结果表明:3种土壤调理剂均能不同程度地改善茶园土壤肥力及提升茶叶产量和品质,对表层(0～20cm)土壤的改良效果要明显好于亚表层(20～40cm)土壤。其中,"亚科丰"土壤调理剂提高土壤pH的幅度较高,其次是"田师傅"土壤调理剂和生物质炭处理。生物质炭在提高土壤肥力以及茶叶产量和品质方面综合表现较好,酸性土壤茶园在施用生物炭后,可显著提高土壤有机质和氮磷钾元素含量,同时也能提高茶叶百芽重和发芽密度以及鲜叶中游离氨基酸总量。
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