科研产出
番茄潜叶蛾食物源引诱剂筛选及引诱效果评估
《昆虫学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】番茄潜叶蛾Tuta absoluta是新入侵我国的对番茄具有毁灭性危害的害虫，对我国番茄产业造成严重威胁。行为调控技术是番茄潜叶蛾绿色防控技术中的重要组成部分，通过探究花香气味、番茄植物挥发物以及传统食诱剂(发酵糖水和糖醋酒液)挥发物成分对番茄潜叶蛾的行为影响，为嗅觉行为调控技术的开发提供参考。【方法】首先利用触角电位(electroantennogram, EAG)反应实验测定剂量为1, 10, 100和1 000μg的9种花香化合物[芳樟醇、邻甲氧基苯甲酸甲酯、己酸乙酯、顺-茉莉酮、(-)-柠檬烯、苯乙醛、β-香叶烯、水杨酸甲酯和苯甲酸乙酯]、 4种番茄植株挥发物成分(乙酸辛酯、邻苯二酚、间苯二酚和对苯二酚)及11种传统食诱剂挥发性化合物(2-乙基甲苯、癸醛、癸酸乙酯、3-糠醛、1,2-二乙基苯、庚酸乙酯、辛酸乙酯、丙苯、壬酸乙酯、苯甲醛和1, 4-二乙基苯)共24种化合物对番茄潜叶蛾雌、雄成虫的EAG反应，筛选出12种引起高EAG反应的物质，利用Y形管嗅觉选择试验测试1, 10, 100和1 000μg的这12种化合物对番茄潜叶蛾雌、雄成虫的引诱作用；最后利用养虫笼产卵选择试验测试上步试验筛出的6种对番茄潜叶蛾具有引诱作用的物质对番茄潜叶蛾雌成虫的产卵引诱效果。【结果】筛选出芳樟醇(10,100和1 000μg)、癸醛(1, 10, 100和1 000μg)、邻甲氧基苯甲酸甲酯(10, 100和1 000μg)、乙酸辛酯(10, 100和1 000μg)、 3-糠醛(1, 10, 100和1 000μg)、庚酸乙酯(10, 100和1 000μg)、苯乙醛(10, 100和1 000μg)、间苯二酚(1, 10,100和1 000μg)、水杨酸甲酯(1,10,100和1 000μg)、对苯二酚(1,10, 100和1 000μg)、苯甲酸乙酯(1, 10,100和1 000μg)及1,4-二乙基苯(100和1 000μg)12种物质能够引起番茄潜叶蛾雌、雄成虫较高的EAG反应。嗅觉仪行为选择试验结果显示，癸醛(10μg)、庚酸乙酯(10和1 000μg)、乙酸辛酯(100μg)、间苯二酚(10和1 000μg)、水杨酸甲酯(100和1 000μg)及苯甲酸乙酯(100和1 000μg) 6种物质对番茄潜叶蛾成虫都具有引诱作用，其中癸醛(10μg)、庚酸乙酯(10和1 000μg)、间苯二酚(10和1 000μg)及苯甲酸乙酯(100和1 000μg)对雌或雄成虫具有显著引诱效果，且癸醛(10μg)和苯甲酸乙酯(100μg)具有同剂量下的双性引诱效果。同时产卵选择试验结果表明，癸醛(10μg)、庚酸乙酯(100μg)、乙酸辛酯(1 000μg)、间苯二酚(10μg)、水杨酸甲酯(1 000μg)和苯甲酸乙酯(1 000μg)这6种物质对番茄潜叶蛾雌成虫均具有显著的产卵引诱作用。【结论】筛选出癸醛、庚酸乙酯、乙酸辛酯、间苯二酚、水杨酸甲酯和苯甲酸乙酯6种对番茄潜叶蛾成虫具有引诱和产卵引诱活性的挥发物质，其中癸醛和苯甲酸乙酯具有开发双性引诱剂的潜力，为番茄潜叶蛾绿色防治技术的研发提供参考。
关键词： 番茄潜叶蛾 引诱剂 番茄植物挥发物 糖醋酒液 发酵糖水 花香气味
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猕猴桃AcWRKY94基因的克隆及其在盐胁迫下的功能分析
《浙江农业学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为明确AcWRKY94在盐胁迫下的功能，从红阳猕猴桃中克隆得到WRKY转录因子AcWRKY94,对AcWRKY94进行生物信息学分析，并分析其在盐处理下的表达水平；利用农杆菌介导的转基因方法在本氏烟中过表达AcWRKY94,并分析转基因烟草的耐盐性。结果显示，AcWRKY94基因的开放阅读框长906 bp,编码301个氨基酸。启动子序列分析显示，AcWRKY94可能响应脱落酸、水杨酸、茉莉酸甲酯、赤霉素、干旱和厌氧等多种信号。多序列比对和系统进化树分析显示，AcWRKY94与多个物种中的同源序列均包含1个WRKYGQK保守结构域和1个C2HC型锌指结构，属于WRKY GroupⅢ成员，其中猕猴桃AcWRKY94与茶树中CsWRKY70-like蛋白亲缘关系最近。实时荧光定量PCR（qRT-PCR）分析表明，猕猴桃根中AcWRKY94的表达量受盐处理显著诱导。盐处理后，与野生型烟草相比，过表达AcWRKY94烟草对盐的抗性显著增强，丙二醛（MDA）和H2O2含量显著降低，脯氨酸（Pro）含量显著升高，超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）活性显著升高。上述结果表明，AcWRKY94可受盐胁迫诱导，可能参与猕猴桃抗盐调控。
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基于SNP分子标记构建黄瓜指纹图谱
《分子植物育种 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：黄瓜是全世界栽培最广、生产和消费最多的蔬菜作物之一，具有较高的经济价值。为了加强黄瓜种质资源的保护与利用，本试验利用259份黄瓜材料的重测序数据进行SNP鉴定，根据位点缺失率、杂合度以及多态性信息含量等指标对SNP集合进行筛选，最终获得了能够高效鉴定黄瓜种质的150个核心SNP标记。该套核心SNP位点组合的PIC和MAF平均值分别为0.374、0.479。通过聚类分析可知，259份黄瓜种质可以被划分为东亚型和欧亚型两大类群。基于以上核心SNP标记为每一份黄瓜种质构建了DNA指纹图谱，能够有效区分所有供试材料。本研究为黄瓜遗传多样性分析、种质资源鉴定以及新品种培育提供了重要的理论依据。
关键词： 黄瓜(Cucumis sativus L.) SNP分子标记 遗传多样性分析 DNA指纹图谱
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酶解辅助提取对铁皮石斛多糖结构和菌群调节功能的影响
《浙江农业学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：酶解或许会改变多糖分子内某些基团的数量或结构，从而改变其性能。为明确酶解对铁皮石斛多糖结构与功能的影响，本研究选择同一品种石斛鲜茎为原料，分别用中性蛋白酶、麦芽糖淀粉酶、纤维素酶辅助提取，获得同一基质多糖的不同结构形式，分析其结构区别，并利用体外模拟发酵系统研究铁皮石斛多糖菌群调节功能的变化。结果表明，与未酶解样品相比，中性蛋白酶辅助提取可以增加多糖的聚合度，而纤维素酶、麦芽糖淀粉酶介入则可以显著降低多糖聚合度并改变单糖组成；中性蛋白酶组的CH4与H2S生成量显著增加，纤维素酶组的丁酸与戊酸产量显著增加。多糖能改善肠道菌群的组成，其中纤维素酶组改变程度较大，双歧杆菌属、乳杆菌属、粪杆菌属、罗氏菌属等肠道基石菌与有益菌的种类与相对丰度显著增加，戴阿利斯特杆菌属、多尔氏菌属等条件致病菌的丰度显著下降，与丁酸、戊酸显著正相关的9个菌属在该组富集了8个（巨球型菌属、链球菌属、双歧杆菌属、欧陆森氏菌属、罗氏菌属、魏斯氏菌属、乳杆菌属、普拉梭菌属）。酶辅助提取可以改变石斛多糖的结构，并改变其菌群调节功能，该研究为不同功效多糖的定向生产提供了参考。
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小黄鱼jnk1和jnk2基因克隆及响应高温应激的表达特征分析
《海洋与湖沼 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：JNKs (c-Jun氨基末端激酶)具有调节细胞凋亡的功能，可对多种细胞外信号刺激产生反应。为研究高温对小黄鱼(Larimichthys polyactis)肝脏细胞凋亡的调控机制，对细胞凋亡相关基因jnk进行研究。以NCBI中大黄鱼(Larimichthys crocea) jnk1和jnk2的CDS序列作为参照，克隆获得小黄鱼这两个基因的CDS序列。通过生物信息学分析，发现小黄鱼jnk1 ORF (开放阅读框)序列共1 155 bp，编码384个氨基酸；jnk2 ORF序列共1 263 bp，编码420个氨基酸。通过对结构域进行预测，发现jnk1与jnk2均有一个保守的STKc结构域和一个双磷酸化TPY催化位点。序列比对和系统进化结果分析表明，小黄鱼jnk1与jnk2均与大黄鱼亲缘关系较为接近。利用三级结构分析，发现jnk1与jnk2结构均比较保守。利用实时荧光定量方法检测jnk1与jnk2在组织中的分布情况，结果表明小黄鱼jnk1与jnk2在脑中的表达量最高。进一步分析jnk1与jnk2在高温处理不同时间的小黄鱼肝脏中的表达模式，发现随着高温处理时间的增加，jnk1表达量未发生显著变化；而jnk2在水温达到32℃时，其表达量即显著高于对照组，随着高温处理时间的增加，基因表达量逐渐下降，说明jnk2在高温胁迫过程中发挥了重要的调节作用。研究结果为探究小黄鱼肝脏响应高温胁迫及细胞凋亡的分子机制提供了分析基础。
关键词： 小黄鱼 高温胁迫 肝脏 jnk1 jnk2 基因表达
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设施栽培甘平杂柑果实枯水和浮皮调查与分析
《中国南方果树 》 2024 北大核心
摘要：为明确“甘平”杂柑果实枯水和浮皮症状与果实品质性状关系，进而为生产上的果实管理提供指导，以保温大棚内正常管理的5年生“甘平”树为研究对象，于2月下旬采收期进行整株采摘，对其浮皮和枯水发生情况进行调查，并逐一测定单个果实的品质性状，研究果实浮皮与不浮皮之间、枯水与不枯水之间品质性状的差异。结果表明，保温大棚内常规管理的“甘平”枯水发生率为59.8%,浮皮发生率为80.3%,两种症状的发生没有明显的相关性。不枯水果实的纵径、横径和单果质量显著高于枯水果实，表现为大果不容易枯水。浮皮果实横径、纵径、单果质量、果肉质量、可食率、果汁率、可溶性固形物含量和固酸比等显著高于不浮皮果实，果形指数显著小于不浮皮果实，表现为果实越大、果形越扁、品质越好的果实越容易出现浮皮。“甘平”枯水发生在果实膨大阶段。浮皮发生初期的果实品质较好，是完熟的表现。生产上，应注重合理负载，培养大果，并实行完熟栽培，以减少枯水的发生和提高果实品质。
关键词： 甘平 设施栽培 枯水 浮皮 产量 果实品质 完熟栽培
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鸭瘟病毒gG基因缺失株的构建及其免疫保护效果研究
《中国预防兽医学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：鸭瘟病毒（DEV）是引起鸭高致死率的重要病原。为探究gG基因对DEV疫苗株免疫保护效果的影响，本研究在本实验室已构建的DEV疫苗株细菌人工染色体感染性克隆pDEV-EF1的基础上，通过“Red E/T两步重组”技术，构建DEV gG基因缺失的感染性克隆pDEV-ΔgG，对其进行酶切、PCR及测序鉴定。将p DEV-EF1和pDEV-ΔgG分别转染CEF细胞，待两组细胞均出现荧光后，收获细胞培养物反复冻融3次后，连续传至20代，每隔5代采用PCR及测序鉴定，分析p DEV-ΔgG的遗传稳定性，并采用western blot进一步鉴定，结果显示，正确构建gG基因缺失株，且能在CEF上稳定传代，命名为rDEV-ΔgG。将rDEV-ΔgG和亲本病毒rDEV-EF1接种CEF，测定体外生长曲线和测定蚀斑形成能力。结果显示，rDEV-ΔgG和rDEV-EF1的病毒滴度在24 h～72 h呈上升趋势，均在72 h时达到高峰，且二者的病毒滴度无显著差异；rDEV-ΔgG感染CEF后形成的蚀斑较亲本病毒rDEV-EF1产生的蚀斑面积减小27.37%。将r DEV-ΔgG以不同剂量免疫30日龄麻鸭2周后，进行DEV攻毒试验，观察各组鸭的临床症状，统计各组麻鸭的存活率，攻毒后1 d到9 d采集各组鸭肛拭子，并在攻毒后2 d、4 d、6 d和8 d各组分别随机剖杀3只麻鸭，取其各脏器组织，经荧光定量PCR分别检测各组麻鸭各脏器病毒载量及排毒情况。攻毒试验结果显示，1.0×10～5TCID50和1.0×10～4TCID50 rDEV-ΔgG免疫的麻鸭在强毒攻击下的保护率较相同剂量rDEV-EF1免疫的麻鸭均下降17%。各脏器病毒载量结果显示，在攻毒后2 d麻鸭胸腺的病毒载量最高，其次是脾脏，在攻毒后4 d，麻鸭食道、泄殖腔、胸腺病毒载量较高。泄殖腔排毒结果显示，攻毒后1 d～4 d泄殖腔排毒量持续升高，并攻毒后4 d各组麻鸭的排毒量达到峰值。本研究比较了gG基因缺失病毒rDEV-ΔgG和亲本病毒rDEV-EF1的生物学特性和免疫保护效果差异，为明确gG在DEV基因组中的功能提供研究基础。
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植物病原真菌环磷酸腺苷信号通路研究进展
《微生物学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：环磷酸腺苷(cyclicadenosinemonophosphate,cAMP)是广泛存在于真核生物中的第二信使，其由腺苷酸环化酶(adenylate cyclase, AC)合成后，通过结合蛋白激酶A (protein kinase A, PKA)调控下游蛋白活性，从而参与植物病原真菌的生长发育、致病性(或致病力)、细胞壁完整性、环境胁迫响应及有性/无性生殖等方面的调控。本文介绍了植物病原真菌cAMP信号通路的信号转导及其与细胞中其他信号通路之间的交叉调控的相关研究进展，同时阐述了cAMP信号通路在植物病原真菌侵染过程中的重要作用。为今后以cAMP信号通路相关基因或蛋白作为靶点筛选抑制植物病原真菌的药物，以及利用cAMP信号通路对植物病原真菌生长发育及致病等相关调控机制进行病害防控提供了新的策略和思路。
关键词： 植物病原真菌 cAMP信号通路 致病力 腺苷酸环化酶
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紫云英异地还田的水稻产量和经济效益研究
《植物营养与肥料学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】紫云英与水稻轮作是我国南方重要的耕作制度。研究长期单施紫云英异地还田和配施化肥下水稻产量和经济效益，旨在为优化施肥策略、促进水稻生产节本增效提供科学依据。【方法】定位试验始于2011年，每年测定水稻产量，2023年水稻收获后结束试验。试验共设置了10个处理：以不施化肥和紫云英为对照（CK）；单施紫云英鲜草30 t/hm2 (GM30)、60 t/hm2 (GM60)、90 t/hm2 (GM90)、120 t/hm2 (GM120)；常规氮磷钾化肥375 kg/hm2 （CF）;45 t/hm2紫云英鲜草+常规化肥用量的20%、40%、60%、80%，依次记为GM45+20%CF、GM45+40%CF、GM45+60%CF、GM45+80%CF。紫云英鲜草采用异地还田方式施用。计算了肥料水稻增产力、肥料水稻增产率、紫云英化肥替代率、化肥和紫云英的经济价值、肥料水稻增产效益和肥料比较效益。【结果】各施肥处理间稻谷产量差异均不显著，其中GM45+60%CF和GM45+80%CF处理稻谷产量较高。化肥的水稻增产率均值为5.74 kg/kg，紫云英的水稻增产率均值为29.19 kg/t；紫云英的平均化肥替代率为5.76 kg/t，肥用紫云英生产水稻的经济价值为119.17元/t。以紫云英为唯一肥源生产水稻，紫云英异地还田存在正效益的最大用量在90 t/hm2。紫云英与化肥配施生产水稻，紫云英异地还田量45 t/hm2并配施常规化肥用量的40%～60%时比较效益最高。【结论】本试验条件下，紫云英鲜草异地还田60～120 t/hm2时，水稻产量与常规施化肥处理相比无显著差异，此时紫云英肥用的增产效益较高；紫云英鲜草异地还田45 t/hm2配施150 kg/hm2化肥氮磷钾是较合理的水稻养分管理方式。紫云英与化肥配施生产水稻时，异地还田紫云英鲜草的肥用经济效益盈亏点用量为15.86 t/hm2。
关键词： 紫云英 化肥 水稻产量 肥料水稻增产率 紫云英化肥替代率 肥料比较效益
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豇豆抗锈病全基因组关联分析
《植物遗传资源学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：豇豆是世界范围内重要的豆类作物，在我国既是重要的杂粮作物，也是传统的豆类蔬菜作物。锈病是豇豆生产上三大主要病害之一，选育抗锈病品种是防治锈病最经济有效的策略，筛选抗锈病种质、解析其遗传基础是抗锈病育种的关键和前提。本研究对215份豇豆地方品种进行抗锈病精准鉴定，筛选出40份抗锈病种质。利用重测序技术鉴定了215份种质的基因型，获得3880169个高质量SNPs和469398个高质量InDels。群体结构分析将之分为4个亚群，亚群分类与荚长、荚型高度相关。采用全基因组关联分析，鉴定出10个与锈病抗性显著相关的基因组区段，分布在7条染色体上。单倍型分析显示各峰值SNP的不同等位变异与锈病抗性高度相关，且随着有利等位变异的聚合，群体内抗病材料的比例显著升高。本研究鉴定出10个可能的抗锈病候选基因，包括含BTB/POZ结构域蛋白基因、LRR受体类丝氨酸/苏氨酸激酶基因、乙烯反应转录因子、交替氧化酶基因等。本研究为豇豆抗锈病分子育种提供了理论指导和基因资源。
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