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长江中下游麦区小麦品种籽粒硬度及puroindoline基因等位变异的分子检测

麦类作物学报 2017 北大核心 CSCD

摘要:为了明确长江中下游麦区小麦籽粒硬度及puroindoline基因型的分布,以该麦区105份小麦育成品种为材料,利用单籽粒硬度仪(SKCS)测定其籽粒硬度,利用分子标记检测和基因序列分析鉴定puroindoline基因的等位变异。结果表明,在长江中下游麦区历年育成的小麦品种中软质麦比例较高,占52.4%,硬质麦和混合麦分别占38.1%和9.5%;硬质麦和混合麦中存在Pinb-D1b、Pina-D1b和Pinb-D1p三种变异类型,突变频率分别为29.5%、10.5%和3.8%。

关键词: 普通小麦 籽粒硬度 puroindoline基因

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A亚群禽白血病病毒env基因在昆虫细胞中的表达与鉴定

江苏农业学报 2017 北大核心 CSCD

摘要:为获得A亚群禽白血病病毒(ALV-A)env基因的表达产物,以ALV-A AH10毒株病毒RNA为模板,通过反转录PCR扩增得到env基因,将其克隆到转移载体p Fast Bac1中,转化DH10Bac感受态细胞,获得重组穿梭质粒r Bacmid-env A,r Bacmid-env A转染昆虫细胞Sf9,获得重组杆状病毒。间接免疫荧光试验(IFA)和免疫印迹试验(Western-blot)结果显示,重组蛋白可与抗ALV-A抗体发生特异性反应,重组蛋白分子大小约为90 000,与预期大小相符,表明env基因在Sf9细胞中获得了良好表达。

关键词: A亚群禽白血病病毒 env基因 表达

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陆地棉油菜素内酯信号基因GhBES1家族的鉴定及表达分析

华北农学报 2017 北大核心 CSCD

摘要:BES1基因是植物激素油菜素内酯信号转导过程中的重要转录因子,为了解陆地棉油菜素内酯信号基因Gh BESI家族,通过对陆地棉异源四倍体标准系TM-1基因组数据库的全面分析和鉴定,获得21个GhBES1基因,这些基因分布在不同的亚基因组,有9对基因在A亚组和D亚组上存在对应关系,AD亚组对应基因序列一致性高于95%。根据进化分析,21个GhBES1基因分为4个亚家族,除了亚家族Ⅲ,其他3个亚家族在拟南芥中均有对应基因;除了亚家族Ⅳ基因和亚家族Ⅱ中GhBES1-1基因外,其他GhBES1基因均有2个外显子。亚细胞定位结果表明,21个GhBES1蛋白主要定位到细胞核、细胞质等部位,其中7对基因的蛋白亚细胞定位完全一致。GhBES1基因在根、茎、叶、顶端分生组织中均有表达,但不同亚家族基因在不同组织中的表达水平存在差异。研究结果为棉花GhBES1基因家族功能的深入研究奠定了基础。

关键词: 陆地棉 GhBES1基因家族 系统进化分析 基因表达

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高浓度CO2对采后杏鲍菇乙醛和乙醇含量及其相关酶活性的影响

江苏农业学报 2017 北大核心 CSCD

摘要:为了探讨高浓度CO2对采后杏鲍菇生理变化的调控机理,首先研究了不同薄膜包装气调处理对杏鲍菇采后品质的影响.结果表明,低O2 (2%~4%)结合高浓度CO2 (30%~40%)处理可减缓采后杏鲍菇的衰老.进一步采用人工气调处理分析了2% O2+30%CO2对杏鲍菇乙醛、乙醇和丙酮酸含量,以及丙酮酸脱羧酶、乙醇脱氢酶和乳酸脱氢酶活性的影响.结果显示,与对照相比,2% O2+30%CO2处理提高了杏鲍菇中乙醛、乙醇和丙酮酸含量,并增强了丙酮酸脱羧酶、乙醇脱氢酶和乳酸脱氢酶的活性.可见,2% O2+30%CO2的高浓度CO2处理是一种延长杏鲍菇贮藏期限的有效采后处理方法,高浓度CO2的这种作用可能与其诱发的厌氧代谢有关.

关键词: 杏鲍菇 高浓度CO2处理 乙醛 乙醇

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灰飞虱雌激素相关受体基因的克隆、序列分析及在氟啶虫胺腈胁迫下的表达模式

昆虫学报 2017 北大核心 CSCD

摘要:【目的】雌激素相关受体(estrogen-related receptor,ERR)是一类依赖配体激活的转录因子,能感受外源物质胁迫调控靶基因的转录,参与外源物质的代谢过程。本研究旨在通过克隆灰飞虱Laodelphax striatellus ERR基因,分析其序列和在氟啶虫胺腈胁迫下表达谱,探析其生理功能及在杀虫剂代谢中的作用。【方法】根据灰飞虱转录组数据信息,利用RT-PCR克隆灰飞虱ERR基因,并进行生物信息学分析;通过实时荧光定量PCR,分析暴露于氟啶虫胺腈(0.76 ng/头)后,灰飞虱4龄若虫ERR基因在不同时间点和不同组织中的表达量。【结果】从灰飞虱中克隆到ERR基因,命名为Ls ERR(Gen Bank登录号:KY210878),其c DNA序列全长1 854 bp,开放阅读框长1 260 bp,编码419个氨基酸,预测编码蛋白的分子量为47.70 k D。序列分析显示,Ls ERR具有核受体(nuclear receptors,NRs)家族成员的共同特征性结构:DNA结合区(DNA-binding domain,DBD)(第75-168位氨基酸)和配体结合区(ligand-binding domain,LBD)(第194-416位氨基酸)。采用APSSP2法预测Ls ERR蛋白二级结构,其中α螺旋占43.53%,β折叠占5.49%,无规则卷曲占50.98%。其中,在DBD区,有6个β折叠和3个α螺旋;在LBD区,有3个β折叠和11个α螺旋。系统发育分析表明,Ls ERR与褐飞虱Nilaparvata lugens ERR亲缘关系最近。灰飞虱4龄若虫暴露于氟啶虫胺腈后,12 h时其体内Ls ERR基因上调表达,24 h时达到表达高峰,48 h时表达量下调;Ls ERR在头部微弱表达,在腹部特异性高表达。【结论】Ls ERR是参与灰飞虱代谢氟啶虫胺腈的候选基因。本研究为解毒酶基因的调控和新分子靶标农药的研制提供分子基础。

关键词: 灰飞虱 雌激素相关受体 基因克隆 序列分析 表达模式 氟啶虫胺腈

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猪肺炎支原体和猪鼻支原体双重荧光定量PCR检测方法的建立

畜牧兽医学报 2017 北大核心 CSCD

摘要:建立同时检测猪肺炎支原体和猪鼻支原体的双重荧光定量PCR方法。根据猪肺炎支原体P97序列和猪鼻支原体P37序列的特异性引物,分别标记FAM和Texas Red荧光报告基团的2条TaqMan探针,建立和优化双重实时荧光定量PCR反应条件和体系,同时检测其敏感性、特异性和重复性。建立的双重荧光定量PCR对猪肺炎支原体和猪鼻支原体的最低检测值均为10copies·μL-1;与猪源致病菌、病毒和其他常见细菌均无交叉反应;各浓度标准品的Ct值变异系数小于5%,重复性好。检测72份临床样本,其中猪肺炎支原体的肺阳性率为80%,鼻拭子阳性率22%,支气管肺泡灌洗液阳性率58.33%;猪鼻支原体的肺阳性率为40%,鼻拭子阳性率66%,支气管肺泡灌洗液阳性率41.67%。建立的双重荧光定量PCR方法比普通PCR更加敏感,实用性强,可用于临床样品的检测。该方法能同时快速和定量地检测猪肺炎支原体和猪鼻支原体,在短时间内获得样品的多个信息,快速地解决了多次检测所需的时间以及经济消耗,为猪肺炎支原体和猪鼻支原体的监测和防控提供了新型、可靠的检测技术。

关键词: 猪肺炎支原体 猪鼻支原体 双重荧光定量PCR

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饲粮中金针菇菌渣水平对山羊屠宰性能及肉品质的影响

动物营养学报 2017 北大核心 CSCD

摘要:本试验旨在研究饲粮中金针菇菌渣水平对山羊屠宰性能及肉品质的影响。试验选用28只体重为(23.35±2.45)kg的波杂羊(波尔山羊×徐淮山羊),随机分成4组(每组7只),分别饲喂含0(A组,作为对照组)、15%(B组)、25%(C组)、40%金针菇菌渣(D组)的试验饲粮。试验羊单独饲喂,在试验结束时(饲喂45 d后)进行屠宰,分别测定山羊的屠宰率、眼肌面积以及背最长肌的pH、色度、剪切力、蒸煮损失率和滴水损失率。结果表明:1)C组的屠宰率与B组差异不显著(P>0.05),但显著高于A和D组(P<0.05);C组的屠宰率分别比A、B和D组提高了2.46%、1.35%和8.32%。B和C组的眼肌面积与A组差异不显著(P>0.05),但显著高于D组(P<0.05)。2)C组山羊的背最长肌的滴水损失率与B和D组差异不显著(P>0.05),但显著低于A组(P<0.05);与A、B和D组相比,C组山羊的背最长肌的蒸煮损失率显著降低(P<0.05);B、C和D组的剪切力差异不显著(P>0.05),但均显著低于A组(P<0.05)。饲粮中添加不同水平的金针菇菌渣对山羊背最长肌宰后45 min pH(pH_(45 min))、宰后24 h pH(pH_(24 h))、红度(a~*)值和黄度(b~*)值无显著影响(P>0.05),但能显著降低背最长肌亮度(L~*)值。由此可见,饲粮中添加不同水平的金针菇菌渣对山羊的屠宰性能以及肉品质产生不同程度的影响,饲粮中金针菇菌渣水平为25%时对提高山羊的屠宰性能以及改善肉品质方面具有较好的效果。

关键词: 山羊 金针菇菌渣 屠宰率 肉品质

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大豆耐盐相关基因GmNcl1功能标记的开发及验证

江苏农业学报 2017 北大核心 CSCD

摘要:土壤盐渍化严重影响大豆生产,因而鉴定大豆耐盐种质的分子标记对大豆耐盐新品种的培育具有重要意义。本研究分析了大豆耐盐相关基因Gm Ncl1等位变异位点的限制性酶切位点,通过酶切PCR产物,琼脂糖凝胶电泳和酶切片段分析,开发建立了分子标记CAPS/Xba I。利用该标记对10份不同耐盐大豆种质进行酶切分型鉴定,然后通过测序试验进行验证。结果表明,用所开发的共显性标记CAPS/Xba I对10份大豆种质进行耐盐性鉴定,鉴定结果与依据表型进行鉴定的结果一致。由此可见,CAPS/Xba I可用于大豆品种的耐盐性鉴定。

关键词: 大豆 耐盐性 GmNcl1 酶切扩增多态性序列(CAPS)标记

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江苏贫困地区农业产业化帮扶模式研究

云南农业大学学报(社会科学) 2017 CSCD

摘要:新时期党和国家对扶贫开发工作提出了更高要求,农业产业化扶贫成为新时期扶贫工作的一个重点。这种帮扶模式是近年来扶贫方式的创新,是对精准扶贫要求的有效落实,也是推进农业供给侧结构性改革的突破,能够激发贫困群体脱贫致富的内生动力。本研究通过分析江苏六大重点扶贫片区农业产业化帮扶典型案例,归纳总结出当下几种主要应用推广的帮扶模式,包括:科技扶持特色产业、打造绿色生态产业、组织化规模化帮扶主体、创新农业产业销售渠道。系统分析出江苏农业产业化扶贫模式的主要特征,包括调研规划、优选产业、组织化农户、完善产业链条、引进科技人才、配套政策资金以及创新扶贫机制等方面,针对实际工作中出现的问题给出相应的建议意见。为我国农业产业扶贫研究提供了借鉴模式和理论支持。

关键词: 扶贫 产业化帮扶 特点分析

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原位土培秸秆育苗容器的降解特性光谱分析

光谱学与光谱分析 2017 EI SCI 北大核心 CSCD

摘要:为研究新型可降解育苗容器降解行为,以改性大豆胶为基体树脂,秸秆为增强材料热压制备的秸秆育苗容器为研究对象,利用原位土培降解秸秆育苗容器,采用纤维素测定仪、傅里叶红外光谱(FTIR spectra)、扫描电镜-X能谱(scanning electron microscopy-energy dispersive X-ray spectroscopy,SEM-EDS)以及热重(thermo-gravimetry,TG)等分析手段,对秸秆育苗容器土培降解前后物理、化学组分和结构变化进行表征。研究结果表明:与土培前秸秆育苗容器相比,土培降解秸秆容器中纤维素、半纤维素和木质素相对含量从29.03%,30.44%和12.52%降低至21.43%,21.41%和9.54%;FTIR分析表明土培降解后秸秆育苗容器中酯键和脂肪键发生断裂,且芳香族特征峰明显减弱;SEM-EDS谱图结果证明秸秆容器中微纤丝链段、基体树脂溶解,材料表面发生氧化降解;TGA结果分析表明土培秸秆容器内部存在大量小分子物质,分解后残余物耐热性提高。

关键词: 秸秆育苗容器 原位土培 降解特性 FTIR SEM-EDS

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