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夹心ELISA定量检测猪圆环病毒2b型抗原方法的建立

中国预防兽医学报 2017 北大核心 CSCD

摘要:为建立快速定量检测猪圆环病毒2b型(PCV2b)抗原含量的方法,本研究采用重组抗PCV2b纳米抗体作为捕获抗体,鼠抗PCV2b单克隆抗体为检测抗体,建立了定量检测PCV2b的夹心ELISA方法。该方法不仅能够用于猪圆环疫苗中PCV2b抗原的检测,还可用于大肠杆菌或杆状病毒表达的PCV2b衣壳蛋白(Cap)亚单位疫苗的检测,且与其它猪病毒无交叉反应。该方法检测细胞培养PCV2b的线性范围是104.3TCID50/mL~105.5TCID50/mL,样品回收率为89.3%~105.6%,该方法批内、批间变异系数小于5%,重复性好。该方法与间接免疫荧光方法(IFA)检测相同样品时误差值小于10%,并且ELISA检测结果离散度更小。分别用两种方法定量PCV2b抗原,取相同抗原量免疫猪,其诱导产生的PCV2b抗体效价无显著差异。本研究构建的夹心ELISA方法在定量猪圆环疫苗中PCV2b抗原方面,与传统的IFA方法比较其显示了良好的符合性,并具有更好的重复性和更短的检测周期,是替代IFA方法用于PCV2b定量检测的更优选择。

关键词: 猪圆环2型病毒 抗原定量 夹心ELISA 纳米抗体

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葡萄转录因子数据库中17个MADS-box成员在果实发育成熟过程中的表达特征分析

果树学报 2017 北大核心 CSCD

摘要:【目的】了解17个MADS-box转录因子成员在葡萄果实发育成熟过程中的调控作用。【方法】利用Plantcare软件分析了葡萄类型转录因子的启动子元件,预测其与果实发育、成熟过程相关的潜在作用;以二倍体欧亚种葡萄品种‘魏可’为试材,采用qRT-PCR技术分析了17个MADS-box成员在葡萄果实发育成熟过程中8个重要时期的时空表达模式,初步鉴定参与葡萄果实发育成熟调控的重要成员;果实转色前7 d通过ABA、NAA处理进一步验证其在葡萄果实发育与成熟中的作用。【结果】MADS-box成员的启动子均含有与果实发育、成熟相关的motif作用元件,且其含有的元件个数存在差异,表明其可能在调控葡萄果实发育与成熟过程中功能存在冗余,同时各自的作用可能存在一定的差异;qRT-PCR分析显示,所有成员均在葡萄果实发育成熟过程中表达,且在不同时期呈现差异表达;其中,VvAG和Vv FBP24在果实硬核期高表达,而在果实转色和成熟中几乎不表达,表明其可能参与果实生长发育的正调控;而VvMADS1、VvMADS9、VvSVP-like1和Vv AP3只在果实转色与成熟过程中高表达,说明它们可能促进了果实的转色与成熟;ABA在果实转色特定时期上调了MADS-box家族6个成员的表达,而NAA下调其表达;另一方面,NAA上调了MADS-box家族8个成员的表达,相反ABA下调其表达,表明这些成员可能响应ABA/NAA调控葡萄果实发育与成熟过程。【结论】葡萄转录因子MADS-box的17个成员均参与了果实发育过程的调控。其中,6个成员可能参与了葡萄果实的成熟过程的正调控,而另外8个成员可能促进了葡萄果实的生长发育从而抑制了果实的转色与成熟过程。

关键词: 葡萄 转录因子 荧光定量PCR 启动子元件 果实发育与成熟

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基于CSSL的水稻芽期耐盐性QTL定位

华北农学报 2017 北大核心 CSCD

摘要:水稻耐盐遗传位点的发掘可为其耐盐遗传机制的研究提供理论基础,为耐盐品种培育提供基因资源。利用一套以9311为背景亲本导入了日本晴染色体片段的染色体片段置换系(CSSL)为试验材料,对芽期耐盐性进行快速鉴定,并分析了耐盐QTLs。结果表明,9个CSSLs表现出显著耐盐性,经过遗传背景的高密度分子标记检测,利用代换作图方法定位到4个芽期耐盐相关QTLs,分别位于水稻第1,2,4和11号染色体上,命名为q SAT1、q SAT2、q SAT4和q SAT11,其中q SAT1在含4个重叠片段的CSSLs中被检测到,其余3个QTLs均在含2个重叠置换片段的CSSLs中被检测到,经比较发现4个QTLs与已克隆水稻耐盐基因均不在同一染色体区间,说明为新的耐盐基因候选位点。结果对进一步发掘和利用新的水稻耐盐QTL具有重要意义。

关键词: 水稻 芽期 耐盐 QTL

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醋糟对土壤改良及兔眼蓝浆果幼苗生长的影响

植物资源与环境学报 2017 北大核心 CSCD

摘要:为了探究醋糟对土壤改良及蓝浆果(Vaccinium spp.)生长的影响,以兔眼蓝浆果(V.ashei Reade)品种‘灿烂’(‘Brightwell’)的2年生幼苗为实验材料、纯土壤为对照(CK),采用盆栽法对S1[V(醋糟)∶V(土壤)=25∶75]、S2[V(醋糟)∶V(土壤)=50∶50]、S3[V(泥炭)∶V(土壤)=50∶50]和S4[V(松树皮)∶V(土壤)=50∶50]基质及种植于这些基质中品种‘灿烂’的相关指标进行了比较,并对该品种与基质的相关指标进行了相关性分析。结果表明:与对照相比,4种基质的电导率、全氮含量、全磷含量、有机质含量和脲酶活性大多显著(P<0.05)升高,而容重却明显下降;S1和S2基质的p H值略下降,S3和S4基质的p H值略升高,而酸性磷酸酶活性则相反。其中,S2基质的容重下降了15.29%,其电导率、全氮含量、全磷含量和有机质含量分别升高了102.71%、239.01%、92.86%和531.71%,其脲酶和酸性磷酸酶活性分别升高了533.33%和95.47%。4种基质中品种‘灿烂’的株高、基径以及叶全氮和全磷含量与对照无显著差异,而该品种的平均单果质量、果形指数、单株地上部和根干质量、根冠比以及根全氮和全磷含量则与对照有一定差异,并且,其单株根干质量和根冠比总体上显著高于对照。其中,S2基质中该品种的单株根干质量、根冠比以及根全氮和全磷含量分别较对照升高了83.94%、72.00%、23.89%和39.64%。相关性分析结果表明:基质的理化性质及脲酶和酸性磷酸酶活性对品种‘灿烂’的根冠比和根全氮含量影响较大。其中,该品种的根冠比与基质的电导率呈显著正相关,与脲酶和酸性磷酸酶活性呈极显著正相关;该品种的根全氮含量与基质的p H值呈极显著负相关,与基质的容重呈显著负相关,与脲酶和酸性磷酸酶活性呈极显著正相关。总体来看,醋糟对土壤具有一定的改良效果,并能够促进兔眼蓝浆果品种‘灿烂’根系生长,且以添加体积分数50%醋糟的效果最佳。

关键词: 醋糟 兔眼蓝浆果 土壤改良 幼苗生长 相关性分析

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新疆北部棉花黄萎病菌培养特性、致病型、致病性分化及ISSR遗传变异研究

棉花学报 2017 北大核心 CSCD

摘要:【目的】明确当前新疆北部棉区黄萎病菌菌系变异和致病力分析情况。【方法】从新疆北部植棉区获得17个棉花黄萎病菌单孢菌系,对其培养特性、致病型、致病力以及ISSR遗传变异进行了研究。【结果】供试17个菌株全部为菌核型,其中落叶型菌系(Defoliating type,D型)有13个,占76.5%;非落叶型菌系(Non-defoliating type,ND型)有4个,占23.5%;D型平均病指(58.72)略高于ND型平均病指(52.7)。在泗棉3号上D型平均病指高于ND型,而在奥3503上D型平均致病力低于ND型。供试菌株按强、中、弱三个致病力类型划分,分别占94.12%、5.88%和0%。ISSR遗传分化与致病型具有一定的相关性,大部分的D型和ND型处于各自不同分支。研究结果还发现,同一地块分离的菌株xj13-3(1)、xj13-3(2)和xj13-3(3)虽同为D型,但ISSR标记可将3个菌株分到不同的亚群上。【结论】试验结果表明了新疆北部棉花黄萎病菌遗传变异关系的复杂性。

关键词: 大丽轮枝菌 致病力分化 培养性状 落叶型 非落叶型

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南京钟山国际高尔夫球场杂草种类及种群变化

草业科学 2017 北大核心 CSCD

摘要:本研究旨在明确南京钟山国际高尔夫球场杂草种类及种群变化,为探讨杂草持续危害百慕大(Cynodon dactylon×C.transvaalensis)草坪的可能成因,制定控制杂草对策提供依据。2000-2016年在该球场通过实地踏勘及定点调查,明确该球场有杂草36科130种,含禾草类1科27种,莎草类2科8种,阔叶类32科94种和藻类1科1种。16年中持续查见杂草28科63种;2006-2016年新见杂草9科13种;2009年前查见、2010年后草坪中未见的杂草20科54种。研究表明,该球场杂草种群丰富,相对聚集于禾本科、菊科、莎草科及十字花科等,稳定又有消长变化。2016年底,尚有马唐(Digitaria sanguinalis)、一年生早熟禾(Poa annua)、多年生黑麦草(Lolium perenne)及匍匐剪股颖(Agrostis stolonifera)局部危害百慕大草坪。在球场长草区外围加拿大一枝黄花(Solidago canadiensis)迅速扩展,钻形紫菀(Aster stubulatus)被发现。这两种杂草已在华东地区向高尔夫球场场地扩展。

关键词: 高尔夫球场 百慕大草坪 杂草 种群变化

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猪流感H3N2型病毒特异性sIgA抗体分泌规律研究

中国人兽共患病学报 2017 北大核心 CSCD

摘要:目的研究不同品种猪应答猪流感病毒感染,呼吸道分泌特异性sIgA抗体的分泌规律,以及针对不同抗原蛋白sIgA抗体的分泌差异。方法将猪流感病毒A/swine/Nanjing/51/2010(H3N2)滴鼻感染试验猪(1×10~7 TCID50/mL,2mL/头),采集感染后21d内不同时间点的鼻拭子样品,用M1、NS1和PB1三种重组蛋白分别建立的间接ELISA方法检测特异性sIgA抗体,并分析其分泌规律及差异。结果显示针对3种重组蛋白的特异性sIgA抗体在整个检测周期内,分泌规律相似,差异无统计学意义,均表现为感染后第5d特异性sIgA抗体水平迅速升高,第14d达到高峰,随后开始逐渐下降。在不同品种猪之间,仅巴马猪分泌抗PB1蛋白的sIgA抗体在第14d和21d时高于二元猪(P<0.05),而抗M1和抗NS1蛋白的sIgA抗体在两种品种猪之间无统计学差异(P>0.05)。结论初步探索了猪在感染猪流感病毒后特异性sIgA黏膜抗体的分泌规律,为进一步研究SIV黏膜抗体诊断试剂奠定基础。

关键词: 猪流感病毒 间接ELISA sIgA抗体

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水生植物堆肥替代部分氮肥提高水稻产量与稻田土壤肥力

农业工程学报 2017 EI 北大核心 CSCD

摘要:为评价太湖流域水生植物堆肥对水稻产量及稻田土壤肥力效应,在太湖流域典型稻田连续进行4a的田间定位试验,比较在等氮条件下不同比例的水生植物有机堆肥替代处理(有机氮替代率分别为0、20%、40%、60%、80%和100%)引起的水稻籽粒产量、产量构成因子、氮磷钾吸收量以及土壤碳氮含量和pH值变化。结果表明:与单施尿素相比,水生植物有机堆肥与尿素配施利于水稻产量的提高,并随着有机肥替代率增加,水稻产量呈先增后降;当有机肥替代率达40%和60%时产量最高。单施有机肥和单施尿素处理水稻籽粒产量相当。单施有机肥显著降低了有效穗数,有机肥和尿素配合施用则可减轻甚至消除这一效应;有机肥替代率在40%和60%时,有效穗数、穗粒数和结实率均较高。随着有机肥施用量增加,水稻秸秆氮浓度降低,籽粒氮浓度无影响;水稻磷浓度和吸收量均无显著差异;有机肥与尿素配施均显著提高了秸秆钾吸收量,有机肥替代率在80%时可显著提高籽粒钾吸收量。表层土壤全氮和有机碳含量及土壤pH值均与有机肥替代率呈显著正相关关系。有机肥-尿素配施处理下土壤全氮和有机碳均较4 a前显著提高。有机肥替代率为80%和100%,土壤pH值较试验前土壤分别显著升高。由此可见,水生植物有机肥与尿素配施可以提高太湖稻作区水稻产量,增加土壤有机质含量和减缓土壤酸化程度,可作为太湖稻作区一项环保型施肥技术。

关键词: 土壤 肥料 太湖地区 水稻产量 养分吸收

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减数分裂期高温对水稻穗粒数影响的定量分析

中国水稻科学 2017 北大核心 CSCD

摘要:【目的】穗粒数是水稻产量构成因子之一。为明确减数分裂期高温对水稻穗粒数的可能影响,构建其定量估算模型,【方法】于2014-2015年以两优培九和南粳45为供试材料,于减数分裂期设置不同强度和持续时间的高温处理,以自然无高温环境为对照,分析了减数分裂期不同高温强度和高温持续时间对穗粒数的影响,建立了减数分裂期高温与穗粒数的定量关系,最后根据温度日变化特征,构建了自然环境下的减数分裂期高温对穗粒数的定量影响算法。【结果】减数分裂期高温对穗粒数的影响程度与高温强度、持续时间有关。同样高温条件下,穗粒数随高温持续天数增加呈指数减少;日相对穗粒数随温度增加而减少,可用二次曲线进行描述。穗粒数对高温敏感的终止时间大约为抽穗前5 d。利用2015年试验资料对上述模型进行了检验,两优培九和南粳45穗粒数模拟值的相对均方根差为0.094和0.085,说明模型可很好地模拟减数期高温对穗粒数的影响。【结论】对完善高温对水稻生长过程的定量影响具有重要作用。

关键词: 水稻 减数分裂期 高温 穗粒数 定量模型

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牛膝提取物对大鳞鲃生长、部分非特异性免疫指标及抗病性的影响

大连海洋大学学报 2017 北大核心 CSCD

摘要:为研究牛膝提取物对大鳞鲃Barbus capito生长性能、部分非特异性免疫指标和抗病性的影响,采用单因子试验方法,选取450尾体质量为(98.92±2.25)g的大鳞鲃,随机分成5组,分别投喂牛膝提取物水平为0(对照)、0.05%、0.10%、0.20%、0.40%的5种试验饲料,养殖周期为60 d。结果表明:在饲料中添加0.20%的牛膝提取物,能够显著提高大鳞鲃体质量、增重率和特定生长率;添加0.10%的牛膝提取物,可显著增加大鳞鲃的头肾体指数和脾体指数(P<0.05);与对照组相比,0.20%、0.40%牛膝提取物添加组大鳞鲃血清溶菌酶(LZM)和酸性磷酸酶(ACP)活力均有显著提高(P<0.05);用嗜水气单胞菌攻毒后,0.20%牛膝提取物添加组大鳞鲃存活率最高。研究表明,牛膝提取物可提高大鳞鲃生长性能、非特异性免疫力和抗病性,建议饲料中牛膝提取物的添加水平为0.20%。

关键词: 牛膝 大鳞鲃 非特异性免疫 生长性能

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