科研产出
双重放大酶免疫传感器检测鸡白痢鸡伤寒沙门菌
《畜牧兽医学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为探求新型鸡白痢鸡伤寒沙门菌快速检测技术,本研究首次利用多壁碳纳米管与离子液体[BMIM]PF6修饰四通道丝网印刷碳电极,制成双重放大信号检测鸡白痢鸡伤寒沙门菌的酶免疫传感器。用原子力显微镜表征其表观形态,循环伏安法监测其电化学特性。结果表明,在优化的检测条件下,免疫电极对目标菌的线性响应范围为103～109 cfu.mL-1,检出限为3.93×102 cfu.mL-1(S/N=3),4℃放置28d后,响应电流为初始值的90.15%,具有良好的稳定性、特异性、重现性和准确性。多壁碳纳米管与离子液体结合制备的鸡白痢鸡伤寒沙门菌酶免疫传感器实现了检测信号的双重放大,检测灵敏度高,离子液体有助于保持酶标抗体的活性,延长免疫电极的有效时间。依据该方法构建的酶免疫传感器为快速检测其它致病菌酶免疫传感器的研究提供了良好的参照模型。
关键词： 快速检测 鸡白痢鸡伤寒沙门菌 酶免疫传感器 双重放大 多壁碳纳米管 离子液体
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蜂王浆水溶性蛋白质及其水解多肽对自由基的清除能力和对胰脂肪酶和α-葡萄糖苷酶的抑制活性
《中国食品学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：蜂王浆是公认的保健食品,研究表明其中富含的水溶性蛋白质及活性多肽具有降血压、抗氧化和抑菌消炎等作用。蜂王浆中不同分子质量的水溶性蛋白质和小分子肽,经过不同的消化道蛋白酶水解后,其生物活性会有所变化。本试验中研究了蜂王浆水溶性蛋白质和不同蛋白酶水解产物对自由基的清除能力,对胰脂肪酶和α-葡萄糖苷酶的抑制活性,及不同的酶解条件下水解程度的差异。试验发现,样品对DPPH自由基的清除能力与水解度有关,而O2-自由的清除能力与样品中多肽的含量有关;胃蛋白酶水解产物对脂肪酶和α-葡萄糖苷酶的抑制活性相对较高,其中分子质量小于650u的小肽有最高的抑制活性,这说明蜂王浆蛋白质酶解产物活性的变化与水解程度、多肽含量及肽段大小有关。
关键词： 蜂王浆蛋白质 酶解 清除自由基能力 脂肪酶抑制活性 α-葡萄糖苷酶抑制活性
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纳豆菌抗菌肽APNT-6对凡纳滨对虾的低温保鲜效果
《水产学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为了解决因凡纳滨对虾货架期短而滥用化学保鲜剂等问题,实验通过微生物发酵,柱状色谱纯化得到一种新型生物保鲜剂——纳豆菌抗菌肽APNT-6,采用牛津杯法测定了其对凡纳滨对虾腐败菌的抑菌效果,并用浸保鲜剂方式将抗菌肽应用于凡纳滨对虾保鲜,通过测定对照组和保鲜剂组在(4±1)℃贮藏过程中的pH、挥发性盐基氮(TVB-N)、细菌总数、感官评分等鲜度指标的变化规律,评价了抗菌肽对凡纳滨对虾在(4±1)℃贮藏条件下保鲜效果。结果表明,纳豆菌抗菌肽APNT-6对凡纳滨对虾中Pseudomonas、Shewanella等8株腐败菌有良好的抑菌效果,经0.5 mg/mL抗菌肽保鲜剂处理后,保鲜剂组在(4±1)℃贮藏过程中pH、挥发性盐基氮(TVB-N)和细菌总数增加缓慢,货架期延长了2～3 d。
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支气管败血波氏杆菌外膜蛋白双向电泳图谱的建立
《中国预防兽医学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为建立支气管败血波氏杆菌(Bb)外膜蛋白(OMPs)双向电泳(2-DE)图谱,本研究利用碳酸钠法提取OMPs,并分别对裂解液、pH值、上样量、聚焦条件、染色方法等进行优化。2-DE结果表明,用裂解液5 MUrea、2 M Thiourea、2%CHAPS、2%SB3～10溶解蛋白,pH4～7的13 cm线性胶条考染上样量为750μg、银染上样量为75μg,聚焦条件为500 V,2 h,1 000 V,1 h,8 000 V,2∶30 h,8 000 V,4 h时,能获得聚焦良好、分离清晰的Bb OMPs图谱。本研究首次建立了Bb OMPs的2-DE图谱,为其蛋白质组学研究奠定了基础。
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大肠埃希氏菌ERIC-PCR指纹图谱构建及贝类污染微生物源示踪
《中国食品学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：目的:采用rep-PCR的ERIC引物(ERIC-PCR)构建象山港周边粪污染指示因子大肠埃希氏菌(E.coli)的DNA指纹图谱库,并根据所建DNA指纹图谱库对贝类产品污染进行微生物源示踪(Microbial Source Tracking,MST)。方法:在选定的贝类养殖区域周边的畜禽养殖场采集鸡、鸭、鹅和猪来源的粪样,从已知来源的粪样中分离鉴定大肠埃希氏菌并构建ERIC-PCR指纹图谱库;用InfoQuestFPTM(Bio-rad)软件对指纹图进行聚类分析与判别分析,并对分离于象山港滩涂贝类及养殖水域的未知来源大肠埃希氏菌进行多维尺度(MDS)的分析,判别其可能来源。结果:216株不同粪样来源的大肠埃希氏菌经聚类分析后得到37种聚类;经Jackknife分析,正确判别率分别为猪源91.7%,鸡源76.9%,鸭源100%和鹅源94.4%;此外,分离自贝样和水样的未知来源得到有效区分,区分率达80.0%(12/15),正确判别率为78.8%。结论:建立的ERIC-PCR微生物源示踪方法能区分贝类和水体中指示菌的不同来源,该方法的建立为查找贝类粪便污染可能的来源以及确保贝类产品安全提供了新技术。
关键词： 微生物源示踪 大肠埃希氏菌 ERIC-PCR 指纹图谱 贝类安全
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柑橘黑点病的发病规律和防治
《浙江农业学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：近年来,柑橘黑点病(Diaporthe citri)在浙江、江西等柑橘产区普遍发生,逐渐成为柑橘最主要病害之一,严重影响鲜销果实的外观品质和销售价格。2008年以来,通过对该病的症状、发生规律和防治技术开展研究发现,果实整个生长期都能感病,但以果实膨大期最感病;黑点病的严重度与树龄、施肥水平和杀菌剂的使用次数关系密切;以座果后每隔20 d使用保护性杀菌剂代森锰锌防治效果较好,代森锰锌中添加0.25%～0.50%矿物油(绿颖)能有效地提高其防效。文章同时结合国内外相关研究,对黑点病症状、病原、发生规律和防治技术作了较为详尽的综述。
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温州蜜柑叶片黄化果园土壤及叶片的养分含量特征
《水土保持学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：弄清叶片黄化柑橘园土壤与叶片的养分含量特征,为改善柑橘园营养状况,提高柑橘产量和品质提供理论与技术支撑。通过对黄化和无黄化温州蜜柑园土壤、叶片的养分含量进行分析,研究影响温州蜜柑叶片黄化的关键因子。结果表明,温州蜜柑叶片的钙、镁、硼含量与SPAD值呈显著或极显著正相关,叶片黄化是由叶片中钙、镁、硼含量不足所造成的,属于综合缺素型,同时叶片中钾、铁、锰含量较高,叶片对钙、镁、硼的吸收与对钾、铁、锰的吸收之间存在相互拮抗的关系;土壤酸化是叶片黄化的主要驱动因子,pH值较低一方面降低了土壤中钙、镁、硼的有效性,另一方面,土壤中较高的铁、锰含量抑制了柑橘对钙、镁、硼的吸收,最终导致叶片因缺钙、缺镁、缺硼而出现黄化。喷施含钙、镁、硼的叶面肥料,防止土壤酸化是改善温州蜜柑叶片黄化的有效措施。
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柑橘花瓣灰霉病诱导的果面疤痕研究
《果树学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：【目的】为了解柑橘花瓣灰霉病是否与成熟果实表面疤痕有关、所形成疤痕的特征以及灰霉病菌的种类,【方法】通过终花期挂牌跟踪调查、人工接菌试验和喷药防治,综合分析花瓣灰霉病与果面疤痕的关系及疤痕特征。【结果】结果表明,柑橘花瓣可受灰霉病菌感染而腐烂,腐烂花瓣不易脱落,黏贴在幼果上,滋生的病菌可引起幼果表皮形成凹陷斑点或斑块。受害组织随后木栓化,呈痘疮状或脊状凸起。随着果实的膨大,凸起部位逐渐变平坦,甚至稍下陷。疤痕表面粗糙,大小形状各异,有浅裂纹,质地似软木塞。菌丝块接种发现病菌可以引起幼果表面产生黑褐色凹陷的斑点或斑块,花期喷施速克灵可以部分降低疤痕果的比例。形态学和分子鉴定证明花瓣上的灰霉菌主要为灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea Pers.Ex.Fr.)。【结论】花瓣灰霉腐烂与果实表面疤痕有关。
关键词： 柑橘果面疤痕 花瓣灰霉病 跟踪调查 施药试验 接种试验
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仙客来软腐病拮抗细菌鉴定及其生物防治效果
《中国微生态学杂志 》 2012 CSCD
摘要：目的为筛选出仙客来软腐病拮抗细菌及评价其生防效果。方法通过分离和筛选,从温州泽雅高山基地采集健康的仙客来植株分离到13株内生细菌对仙客来软腐病病原菌有较强的抑制作用,其中菌株Y1活性最强且遗传稳定。通过形态特征、生理生化特性分析、16S rDNA序列测定及其系统发育分析研究。结果菌株Y1鉴定为芽胞杆菌,将菌株Y1以发酵液灌根方式回接正常仙客来植株,菌株Y1的发酵液处理仙客来软腐病的防效均大于60%以上。结论菌株Y1具有生防的特点,在花卉产业上具有应用潜力。
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