科研产出
香蕉凝集素BanLec基因转化毕赤酵母及转化子的鉴定
《生物技术通报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：以pMD-BanLec质粒为模板扩增BanLec基因片段,该片段经EcoR I/XbaI双酶切后定向克隆到同样经EcoRI/XbaI双酶切的pPICZα表达载体上。将连接产物转化感受态DH5α,用低盐Zeocin抗性LB固体培养基筛选阳性克隆菌落。将重组质粒电转化毕赤酵母菌GS115后,通过PCR鉴定目的基因整合入酵母菌的基因组中,将有助于进一步研究BanLec蛋白的表达,为探讨香蕉凝集素的活性及生化功能等奠定基础。
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推荐施肥中校验曲线模型选模方法研究
《土壤通报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：83个早稻氮磷钾肥效试验在土壤碱解氮、Olsen-P和速效钾试验点各剔除10.8%、6.0%和4.8%基础上,可分别建立土测值与稻谷相对产量的校验曲线。结果表明,用不同的数学模型拟合同一组试验资料,所得的土壤碱解氮或Olsen-P或速效钾在同一肥力等级的临界指标最大差异可达1.71倍。因此,综合考虑不同模型的数学特征、作物氮磷钾营养特点、土壤氮磷钾养分状况和农业环保需求等因素,土壤碱解氮最佳校验曲线模型是对数模型,Olsen-P则为指数模型,而土壤速效钾则为幂指数模型。结果表明,福建早稻土壤碱解氮含量"高""、中"和"低"的指标分别是大于212mgkg-1、121~85mgkg-1和小于85mgkg-1;Olsen-P含量的指标分别是大于21mgkg-1、21~8mgkg-1和小于8mgkg-1;速效钾则分别为111mgkg-1、111~29mgkg-1和小于29mgkg-1。
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新型鸭呼肠孤病毒NP03株S3基因序列分析
《农业生物技术学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：根据GenBank禽呼肠孤病毒(ARV)和番鸭呼肠孤病毒(MDRV)S3基因序列设计合成1对引物,特异性扩增新型鸭呼肠孤病毒NP03株的S3基因,并对其序列进行分析。结果克隆获得NP03株S3cDNA包含完整的阅读框架,同源性分析NP03分离株S3基因核苷酸序列与ARV、火鸡呼肠孤病毒(TRV)和MDRV的同源性分别为60%～60.2%、61.9%和58.2%～62.7%,氨基酸的同源性分别为68.2%～69%、68.2%和63%～70.4%。表明NP03株的S3基因具有不同于ARV和MDRV的特征,分离毒NP03是一株新型鸭呼肠孤病毒。
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大杯香菇辐射选育新株系数量性状的因子分析
《激光生物学报 》 2010 CSCD
摘要：对20个大怀香菇出种和辐射选育新株系的数量性状进行因子分析。结果表明,20个大杯香菇品种和辐射选育新株系的18个数量性状,可提取为7个公因子,其累积方差贡献率达91.85%,代表了所有性状绝大部分相关信息。按照主因子所包含的性状及其所反映的生物学、营养学和酶学含义,可把7个主因子命名并按方差贡献大小顺序排列为:促长因子1、CAT活性因子2、营养质量因子3、MDA因子7、化学评分因子4、氨基酸比值系数分因子5、粗壮因子6。从主因子出发进行大杯香菇辐射育种,可以加大目标性状的针对性的选择效率,比较容易获得综合数量性状优良的新品种。
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猪圆环病毒Ⅱ型单克隆抗体的制备及应用
《西北农林科技大学学报(自然科学版) 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：【目的】制备猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)Cap蛋白单克隆抗体,并对其进行鉴定和应用。【方法】以超离纯化的猪圆环病毒Ⅱ型作为免疫原,按常规方法免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,经间接ELISA筛选获得了2株分泌PCV2-Cap蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为8-60和10-48,对其生物学特性进行鉴定,并将其作为一抗,建立了间接免疫荧光诊断方法。【结果】8-60和10-48的染色体数平均为98～105对,间接ELISA检测其细胞培养上清液效价分别为1∶16和1∶32,小鼠腹水效价分别为1∶3×212和1∶3×213,抗体的免疫球蛋白亚型均为IgM。间接免疫荧光结果显示,8-60和10-48能与PCV2发生反应;利用这种特性,建立了能诊断PCV2病原的间接免疫荧光诊断方法,实际应用结果表明,其诊断结果与PCR方法诊断结果基本一致,阳性和阴性的符合率分别为93.75%和100%。【结论】以制备的猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)Cap蛋白单克隆抗体为一抗,建立了间接免疫荧光诊断方法。
关键词： 猪圆环病毒Ⅱ型 单克隆抗体 Cap蛋白 ELISA方法 间接免疫荧光
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红壤稻田不同生育期土壤氨氧化微生物群落结构和硝化势的变化
《土壤学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：以福建省红壤稻田土壤为对象,通过提取土壤总DNA,利用特异引物进行PCR(聚合酶链反应)扩增和DGGE(变性梯度凝胶电泳)并结合DNA克隆测序,研究了水稻生长过程中稻田土壤氨氧化细菌和氨氧化古菌群落结构的变化。结果显示:稻田土壤具有丰富的氨氧化细菌和氨氧化古菌资源。水稻生长过程中土壤氨氧化细菌群落组成较为稳定,只表现出水稻生长前期(苗期、分蘖期)和中后期(孕穗期、成熟期)间存在一定差异。而土壤氨氧化古菌群落组成变化较大,在水稻生长的苗期、分蘖期、孕穗期和成熟期4个时期间均存在一定差异。在水稻生长过程中,土壤氨氧化细菌群落多样性指数无显著性变化,但氨氧化古菌群落多样性指数随水稻生长明显提高,孕穗期后才达到平稳。水稻生长前期土壤硝化势也具有显著上升趋势,孕穗期时达到最高,而后有所下降。土壤硝化势与氨氧化古菌群落多样性指数具有显著正相关性,与氨氧化细菌没有相关性。研究表明,氨氧化古菌对红壤稻田土壤硝化作用的影响程度较大,证实了氨氧化微生物尤其是氨氧化古菌在稻田土壤微生物组成及其生态系统功能中的重要性。
关键词： 红壤稻田 氨氧化细菌 氨氧化古菌 PCR-DGGE 硝化势
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氮素对羽叶决明缩合单宁及相关酶活性的影响
《草业科学 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：缩合单宁对牧草品质的影响极大,适量的缩合单宁含量对于提高牧草的利用率和营养品质非常重要。研究以豆科牧草羽叶决明Cassia nictitoms为材料,分析了氮素梯度处理后茎和叶中缩合单宁的含量及其生物合成酶二氢黄酮醇还原酶(DFR)活性的变化特征。结果表明,羽叶决明叶片的缩合单宁含量高于茎,随氮素的增加,叶片中缩合单宁含量从14.78%下降到1.14%;茎中从4.62%开始降低,达到0.98%后趋于稳定;DFR活性表现出与缩合单宁相似的变化规律,二者在叶和茎中都呈显著(P<0.01)的二次曲线关系。植株粗蛋白含量测定发现,随氮素的增加粗蛋白含量无显著增加(P>0.05)。因此,适当增加氮素的使用量可以达到减少缩合单宁含量,从而提高羽叶决明的利用率和营养品质。
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检测禽多杀性巴氏杆菌环介导等温扩增(LAMP)方法的建立
《福建农林大学学报(自然科学版) 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：以禽多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)C48-1为研究对象,利用LAMP方法对Pm进行快速检测.结果表明:LAMP方法在恒温65℃下,1 h内就可以检测到Pm;LAMP方法最低可检测100 pg.μL-1Pm基因组DNA.该方法不需要精密的温度循环装置,有恒温加热设备就可以满足检测条件,适合基层临床应用.
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