科研产出
反转录-重组酶介导等温扩增(RT-RAA)快速检测猪繁殖与呼吸综合征
《新疆农业科学 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：【目的】针对PRRSV Nsp2基因建立反转录重组酶介导等温扩增（RT-RAA）荧光法快速检测方法。【方法】设计经典毒株和高致病毒株引物及探针，检测RT-RAA的敏感性及特异性等。【结果】方法与猪瘟病毒（CSFV）、伪狂犬病毒（PRV Bartha-K61）、猪流行性腹泻病毒（PEDV Purdue）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV LJX）的核酸均无交叉反应；方法对高致病性毒株最低检出限为1.71×101 copies/μL,对经典株最低检出限为2.19×10～3 copies/μL。高致病毒株方法敏感性为95.5%,特异性为100%;经典株方法敏感性为93.0%,特异性为100%,2种方法具有高度的一致性。【结论】建立的PRRSV RT-RAA荧光法可以区分2种不同的毒株并且特异性良好、灵敏度高。
关键词： 猪繁殖于呼吸综合征病毒 RT-RAA Nsp2基因 特异性 敏感性 高致病毒株 经典毒株
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菜心减数分裂相关基因BrASY2参与植株耐热性的功能分析
《中国农业科学 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：【目的】菜心属于不耐热、喜冷凉的蔬菜，高温是夏秋菜心生产中面临的主要问题之一。实验室前期在菜心高温胁迫转录组数据库中挖掘到一个可能与高温胁迫响应相关的基因片段，将其命名为减数分裂相关基因BrASY2。通过进一步研究其理化性质、蛋白结构、系统进化及表达特性，并探究其在耐热性调控中的功能，以期为耐热菜心分子育种提供参考。【方法】采用全基因合成的方法获得BrASY2全长，利用ExPASy ProtParam、ProtScale、SignalP-5.0、SOPMA、Swiss-Model和PlantCARE对其理化性质、信号肽、蛋白结构、顺式作用元件进行分析，使用MEGA 6.0构建系统发育树，采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术分析其在高温胁迫下的表达特性。分别构建酵母异源超表达载体pYES2-NTB-BrASY2和基因沉默表达载体pK7GWIWG2（I）-BrASY2，获得转基因酵母和沉默表达菜心植株，并进行耐热性功能分析。采用花药压片法对BrASY2沉默表达植株细胞减数分裂染色体行为进行细胞学观察。【结果】BrASY2长度为852 bp，编码283个氨基酸，蛋白相对分子量为69.16 kDa，理论等电点为5.09。基因结构分析表明，其含有丰富的α-螺旋和无规则卷曲。信号肽预测发现，BrASY2为无信号肽的亲水性蛋白。顺式作用元件分析显示，BrASY2含有9个高温胁迫响应元件CAAT-box。系统进化分析表明，BrASY2与白菜、甘蓝型油菜同源性最高，亲缘关系更近。转录组数据分析表明，在高温胁迫前（0 h）,BrASY2在热敏自交系CX7-3和耐热自交系CX1-7中的转录表达水平均较低；在高温胁迫6 h后，BrASY2在CX1-7中的转录表达水平均迅速上升，而在CX7-3中的表达量变化不明显。qRT-PCR结果显示，随着高温胁迫处理时间的延长，耐热自交系CX1-7叶片中BrASY2的表达量呈上调趋势，在处理后24 h时表达量最高，而在热敏自交系CX7-3中始终处于低水平表达状态，表达量无明显变化。经酵母异源超表达分析，超表达酵母菌pYES2-NTB-BrASY2更耐高温，能够帮助酵母菌度过高温逆境。BrASY2沉默表达分析表明，高温胁迫后，与对照植株相比，沉默表达植株的BrHsfA2、BrHsp90和BrMn-SOD的表达均受到抑制，植株叶片颜色变浅，叶绿素含量降低，相对电导率和H2O2含量升高，SOD活性下降。减数分裂细胞学观察显示，与对照植株相比，BrASY2沉默植株减数分裂各时期的染色体行为均表现正常，减数分裂后期的均衡分裂细胞和四分体占比，均未表现出明显差异。【结论】成功获得菜心BrASY2,BrASY2在菜心响应高温胁迫中发挥正向调控作用。
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海南普通野生稻稻瘟病抗性鉴定与评价
《植物遗传资源学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为了对海南普通野生稻稻瘟病叶瘟、穗颈瘟的抗性进行综合鉴定与评价,2022-2023年连续两年对来自海南省11个不同市县的2002份普通野生稻材料进行苗期叶瘟人工接种和田间自然抗病鉴定,并对995份已经抽穗的普通野生稻材料进行穗颈瘟人工接种抗性鉴定.结果表明:2002份叶瘟鉴定材料中,人工接种抗叶瘟材料为494份(占24.68%),其中免疫7份,高抗17份;田间自然状态下抗叶瘟材料1160份(占57.94%),其中免疫24份,高抗233份.995份穗颈瘟人工接种鉴定材料中,抗穗颈瘟材料506份(占50.85%),其中免疫23份,高抗136份.由结果可知,海南普通野生稻普遍抗叶瘟或穗颈瘟,这些抗性资源的生长习性大多为半直立型或倾斜型,少数为直立型或匍匐型;高抗叶瘟的材料在抽穗后也普遍抗穗颈瘟,免疫或高抗穗颈瘟的材料也普遍抗叶瘟.经过鉴定和评价,筛选出双抗叶瘟、穗颈瘟的普通野生稻材料共有128份.本研究为海南普通野生稻资源抗稻瘟病研究和育种利用提供参考.
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植物转化酶家族基因鉴定及序列进化分析
《分子植物育种 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：转化酶CWIN （Cell wall invertase）、VIN （Vacuolar invertase）和CIN （Cytoplasmic invertases）是蔗糖代谢途径中蔗糖转化成葡萄糖和果糖的关键酶，直接参与了植物蔗糖代谢的生物合成。为了系统梳理转化酶相关基因在植物基因组中的状况，实验室对其基因进行了全面的鉴定和进化分析，并重点考察植物在拟南芥和番茄中的表达。首先，实验室针对CWIN、VIN和CIN的基因序列，鉴定得到其保守结构域，在此基础上对相关基因进行了全面鉴定，从而构建了其进化树；其次，将拟南芥（Arabidopsis thaliana）和番茄（Solanum lycopersicum） CDS序列比对到各探针，从而从数据库中提取组织中的表达数据；最后，通过结构域鉴定、进化树和表达量的分析，得出CWIN、VIN和CIN在植物中的生物合成的机理。本研究为转化酶相关基因提供了基因信息，为植物中蔗糖代谢生物合成途径的作用机理及对蔗糖代谢影响相关基因进化机制的研究提供帮助。
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海南辣椒抗南方根结线虫种质资源的筛选
《分子植物育种 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：鉴于根结线虫的专化特性及其引发的植物病症防治的困难性与易复发性，选育并种植抗性品种仍然是目前最经济和最有效的防治策略之一，为加快辣椒抗南方根结线虫新品种的选育进程，有效应对近年来海南辣椒种植中大面积发生的南方根结线虫问题，通过PM6a和PM54 2个分子标记筛选，结合苗期接种抗性鉴定的方法，对本单位已有的53份商品性较好的辣椒种质资源进行了抗南方根结线虫筛选，4份通过分子标记筛选，并在接种鉴定试验中抗性达到抗(R)，其中包括泡椒1份，尖椒2份，线椒1份，且各辣椒资源的商品性较好，加深了对本单位抗性辣椒资源的分布情况，并为进一步抗南方根结线虫辣椒新品种选育工作提供了切实基础。
关键词： 辣椒 南方根结线虫(Meloidogyne incognita) 分子标记
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28份木薯种质苗期耐水淹性初步评价
《热带作物学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：木薯(Manihot esculenta Crantz)作为热带地区第三大粮食作物,是世界近六亿人的口粮.木薯主要栽培于热带地区,常受到雨季水淹的危害,导致产量和品质严重下降,筛选耐水淹木薯种质具有重要意义.为研究不同木薯种质苗耐水淹性差异,采用盆栽模拟苗期水淹胁迫的方法,对水淹胁迫 6 d下 28 份木薯种质的株高增长量、叶绿素相对含量、相对电导率和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化物酶(peroxidase,POD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活性进行测定,采用变异系数分析、方差分析、相关性分析、主成分分析和隶属函数分析对其苗期耐水淹性进行综合评价.结果表明:28 份木薯种质耐水淹性存在较大的差异,水淹胁迫显著抑制了 15 份种质生长(P<0.05),不同木薯种质对水淹胁迫的响应机制并不一致.相关性分析结果表明:株高增长量和叶绿素相对含量呈极显著正相关关系(P<0.01),相关系数为 0.253;叶绿素相对含量和相对电导率呈极显著负相关关系(P<0.01),相关系数为 0.266.主成分分析结果显示:前 4 个主成分可代替 6 个指标的 82.85%贡献率,其中第Ⅰ主成分的载荷主要是CAT,第Ⅱ主成分的载荷主要是株高增长量,第Ⅲ主成分的载荷主要是SOD,第Ⅳ主成分的载荷主要是叶绿素相对含量.通过隶属函数综合分析,28 份木薯种质耐水淹性从强到弱依次为琼中 1 号、SC6068、SC201、ME191、M-F532、GR891、C222、GR3、F2000、罗勇 80、46-12、GR5、KU58、H660、SC5、F03P、M-GR911、CH20、M-F671、COL713、老板 2 号、JG1301、GR911、E407、F274、SC8、M-SC5、泰国.本研究结果将为木薯耐水淹性新品种培育和耐水淹机理研究提供理论基础和材料支持.
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施肥调控对设施甜瓜生长与产量、品质的影响
《新疆农业科学 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：[目的]研究海南省设施栽培条件下长效肥对甜瓜生长发育及产量品质的影响.[方法]以甜瓜品种纳斯密为供试材料,设置不施肥(CK)、长效肥(K1)、长效肥(K2)、长效肥(K3)、常规施肥(CF)共 5 个处理.在设施栽培条件下施用长效肥普乐特(17-17-17)≥51%,在甜瓜伸蔓期、花果期、成熟期调查作物的农艺生长指标,成熟期测定甜瓜产量和品质指标,并测定土壤养分和植株各器官的氮、磷、钾含量.[结果]5 个施肥处理中,CF处理的产量与裂果率均高于其它处理,CF和长效肥K1 处理品质高于其它处理.长效肥各处理甜瓜植株氮、磷、钾积累量低于CF处理.[结论]综合产量、裂果率及品质特征,长效肥(K1)可保证设施甜瓜正常生长并达到较高的商品产量和品质.
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槟榔叶表微生物前处理方式对基因组DNA提取效果的影响
《分子植物育种 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为了快速获取高质量的槟榔叶表微生物基因组DNA，本研究分别使用悬摇振荡和超声波洗脱微生物，使用真空抽滤和冷冻高速离心进行富集，利用超微量分光光度计对获取的叶表微生物DNA浓度和纯度进行测定，最后进行DNA电泳检测和PCR扩增检验对比提取效果。使用超声波法作为前处理时，所提基因组DNA浓度较低、纯度不在合格范围内；悬摇法提取的DNA浓度更高，且在悬摇20 min时所提基因组DNA浓度达最大值（25.67±0.96）μg/mL、（38.67±0.85）μg/mL；真空抽滤法较离心法而言，所提样本DNA浓度、纯度均更高。以悬摇振荡与真空抽滤相结合的方式为槟榔叶表微生物最佳收集方法，可以提高槟榔叶表微生物分离和收集的效率和质量，同时提高了叶表微生物DNA提取的成功率，本研究结果可为槟榔植物叶表微生物的收集提供参考依据。
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苦瓜种质资源耐热性评价及其鉴定指标的筛选
《热带作物学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：本研究以 27 个苦瓜自交系 4 叶 1 心的幼苗为材料,预培养 1 d后,置于 39℃高温培养,观察其高温胁迫 72 h后的热害情况,通过计算热害指数(TDG)筛选评价出高、中、低耐热性的苦瓜种质;从中选取 6 个不同耐热性的自交系,测定 39℃胁迫 0 h和 48 h的株高(PH)、茎粗(SD)、鲜物质量(SFW)和干物质量(SDW)等形态学指标以及叶片相对叶绿素含量(SPAD)、电导率(REL)、过氧化物酶活性(POD)、过氧化氢酶活性(CAT)、超氧化物歧化酶活性(SOD)、丙二醛含量(MDA)、脯氨酸含量(Pro)和可溶性糖含量(SS)等生理指标;主成分分析上述 12 个指标的耐热系数(α),综合评价 6 个自交系材料的耐热性;利用逐步回归分析法建立耐热性评价数学模型获得苦瓜耐热性鉴定指标体系.结果表明:以TDG为依据,27 个苦瓜自交系中有耐热型 3 个,中等耐热型 18 个,热敏型 6 个;6 个不同耐热性材料的综合评价结果与热害指数鉴定结果基本一致;耐热性的评价数学模型为:Y=-0.426+0.049X1-0.011X2-0.009X3-0.018X4,利用建立的最优回归方程预测供试材料的耐热性,预测值与Y值基本一致.说明SFW(X1)、POD活性(X2)、CAT活性(X3)和SS含量(X4)这 4 个指标的耐热系数可以快速准确地评价苦瓜耐热性差异,可用作苦瓜耐热性鉴定指标.本研究筛选出苦瓜耐热种质并构建苦瓜耐热性评价体系,为海南夏季耐热苦瓜新品种选育提供依据.
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大宝鸽、石岐鸽和杂交王鸽生产性能和肌肉营养成分分析
《中国畜牧杂志 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为了解大宝鸽、石岐鸽和杂交王鸽的生产性能和肌肉营养成分,本实验分别测定分析大宝鸽、石岐鸽、杂交王鸽 3 种鸽子 0~30 日龄及成年鸽(3 年龄鸽)生长性能、30 日龄鸽屠宰性能、成年鸽(3 年龄鸽)胸肌中的常规营养成分、氨基酸及脂肪酸含量.结果表明:大宝鸽的宰前活重和胸肌重高于石岐鸽和杂交王鸽(P<0.05),但是屠宰率低于石岐鸽和杂交王鸽(P<0.05);大宝鸽的生长速度、体重、体斜长、龙骨长、胸宽、骨盆宽及胫长高于石岐鸽和杂交王鸽(P<0.05);杂交王鸽和大宝鸽的肌肉蛋白质含量高于石岐鸽(P<0.05),杂交王鸽的肌肉脂肪含量低于大宝鸽和石岐鸽(P<0.05),杂交王鸽的肉质与大宝鸽和石岐鸽相比更符合高蛋白低脂肪的理想型可食用肉质消费理念,并且杂交王鸽的风味氨基酸含量与大宝鸽相似且高于石岐鸽(P<0.05),但是不饱和脂肪酸含量低于大宝鸽和石岐鸽(P<0.05).研究表明大宝鸽的宰前活重和生长速度、杂交王鸽高蛋白低脂肪的肉质和屠宰率以及石岐鸽的屠宰率都是表现突出的遗传特性,可以作为后期专门化品系培育选择的遗传特性.
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