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甲氧基有机磷杀虫剂广谱特异性抗体的制备

分析化学 2008 SCI 北大核心 CSCD

摘要:以通用结构O,O-二甲基硫代磷酸酯为目标检测基团,制备针对甲氧基有机磷杀虫剂的广谱特异性抗体。利用O,O-二甲基硫代磷酸钠和氯乙酸合成半抗原S-羧甲基-O,O-二甲基二硫代磷酸酯(CMP),通过混合酸酐法(MA)和活性酯法(AE)分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联。CMP-MA-BSA、CMP-AE-BSA作为免疫原均获得了免疫应答。其中,CMP-AE-BSA所获得的抗血清效价最高,为256000。研究了有机溶剂种类及含量、pH因素对ELISA曲线的影响,确定CMP酶联免疫分析方法(ELISA)的最佳工作条件,CMP的最低检测浓度为0.076μg/L,IC50为93.97μg/L。以14种常见有机磷杀虫剂为对象,检测抗体对其交叉反应,测定结果表明:抗体对马拉硫磷、稻丰散、乐果、亚胺硫磷、倍硫磷、甲基嘧啶磷、甲基对硫磷、杀螟硫磷及杀扑磷等均有识别作用。IC50分别为69.92、136.90、230.39、416.84、508.57、510.38、607.21、835.30和850.21μg/L。该技术可用于多种甲氧基有机磷杀虫剂的快速定性或半定量检测。

关键词: 甲氧基有机磷 杀虫剂 广谱特异性抗体 酶联免疫分析(ELISA)

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一个新的水稻白化转绿突变体的生理特性和基因定位(英文)

遗传学报 2007 SCI 北大核心 CSCD

摘要:秋丰M来源于粳稻秋丰的自然白化转绿突变株。其主要特征为前三叶白化带绿,第四叶及以后叶片均为淡绿色,抽穗时,秋丰M的颖壳和前三叶一样仍出现带绿的白化现象。不同生长时期对野生型和突变型水稻叶片色素含量测定的结果与田间观察结果一致,秋丰M确实存在着一个叶色显著变化的过程。主要农艺性状的比较结果表明,秋丰与秋丰M除穗颈长和千粒重达到极显著差异外,其他农艺性状均无明显差异。遗传分析发现该突变性状受一对隐性核基因控制。以209株培矮64S×秋丰M F_2的隐性突变个体为定位群体,将突变基因定位在水稻第2染色体长臂上,位于 SSR 标记RM475和RM2-22之间,其遗传距离分别为17.3 cM和2.9 cM,并将该基因命名为gra_(t)。

关键词: 水稻 白化转绿突变体 基因定位 SSR标记

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水稻抗白叶枯病基因Xa-25的分子定位

遗传学报 2005 SCI 北大核心 CSCD

摘要:Xa 2 5是从体细胞突变体HX 3中鉴定出的水稻抗白叶枯病基因。通过花药培养构建了 0 2 4 2 8(粳稻 )和HX 3(籼稻 )的双单倍体 (DH)群体 ,该群体包含了 12 9个稳定株系 ,以我国长江流域水稻白叶枯病的代表菌株浙173对DH群体进行抗病性鉴定 ,抗病株系数和感病株系数分别为 6 2和 6 7。共选用覆盖水稻 12条染色体的 30 0对SSR引物对 0 2 4 2 8和HX 3进行多态性分析 ,有 74对引物在双亲之间表现差异。利用这些差异引物对DH群体进行连锁分析 ,从而将抗白叶枯病基因Xa 2 5定位到第 4染色体长臂末端的两个SSR标记RM6 74 8和RM 115 3之间 ,连锁距离分别为 9 3cM和 3 0cM。

关键词: 分子定位 体细胞突变体 水稻白叶枯病 Xa-25

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水稻籼粳亚种间杂种低温花粉不育的QTL分析

遗传学报 2005 SCI 北大核心 CSCD

摘要:为探明籼粳杂种低温花粉不育的遗传基础,以籼稻品种3037和粳型广亲和品种02428的F2分离群体进行了低温花粉不育的遗传分析。推迟播种后,F2群体各单株孕穗期的日平均温度为21~23℃,调查了F2群体各单株的花粉育性。利用108对SSR引物构建了包含157个F2单株,覆盖12条染色体的分子标记连锁图谱。该连锁图的总长度为1857.8cM,标记间平均距离为16.26cM,标记较均匀地分布在12条染色体上。采用区间作图法对F2群体花粉不育进行QTL分析,共检测到2个低温花粉不育QTLs,即qLTSPS2和qLTSPS5,分别位于第2、5染色体,其加性效应分别为0.021、0.045,显性效应分别为-0.246、-0.251,显性度分别为11.7和4.8,具有超显性效应,超显性是QTL作用的主要方式,这2个位点杂合基因型在低温环境下具有降低花粉育性的作用,分别解释表型变异的15.6%、11.9%。另外,两因素的方差分析表明这两个QTL之间不存在互作。

关键词: 水稻 籼粳杂种 低温 花粉不育 QTL定位

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脆茎基因在水稻亚种间杂种后代中的遗传

遗传学报 2004 SCI 北大核心 CSCD

摘要:脆茎基因在水稻粳型品种间杂种后代中按孟德尔遗传比例传递 ,而在亚种间杂种后代中呈脆茎 (bc1bc1)频率显著增加和显著降低两种偏离孟德尔比例的异常分离型。Kamairazu/ /KetanNangka/KamairazuF1呈脆茎频率增加型 ,F2 群体则呈正常分离 ,但F3 和F4仍出现少数增加型和降低型的株系。IR36 /Kamairazu的F2 呈降低型分离 ,F3 和F4株系中有正常型和降低型两种 ,F4还出现个别增加型株系。KetanNangka/IR36 / /Kamairazu的F2中除了有增加型和降低型外 ,出现部分正常型。水稻bc1基因的异常分离与花粉育性无关 ,而是由雄配子选择性授精引起 ,与位于第 3染色体的配子体基因ga2、ga3和 ga14有关

关键词: 水稻 杂种 脆茎性状 配子体基因 遗传

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利用重组自交系群体检测水稻条纹叶枯病抗性基因及QTL分析

遗传学报 2004 SCI 北大核心 CSCD

摘要:利用 8 1个株系组成的Kinmaze(japonica) DV85(indica)重组自交系 (recombinantinbredlines ,RIL)群体 ,采用苗期强迫饲毒的鉴定方法 ,以病情指数作为条纹叶枯病的表型值 ,鉴定亲本及 81个RILs对水稻抗条纹叶枯病毒(ricestripevirus ,RSV)的抗性。利用QTLCartographer软件 ,对水稻条纹叶枯病抗性基因进行检测分析。检测到 3个QTL位点 :qStv1、qStv7、qStv11分别位于第 1、7、11染色体上 ,各QTL的LOD值为 2 44~ 3 83 ,贡献率为 19 8%~3 0 9%。根据抗性基因加性效应的方向 ,在qStv7、qStv11位点上 ,亲本DV85存在抗条纹叶枯病增效基因 ,Kinmaze具有抗条纹叶枯病减效基因 ,而qStv1位点抗性基因效应来源正好相反

关键词: 水稻条纹叶枯病毒 重组自交系群体 抗性基因 QTL分析

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玉米pepc基因在杂交转育的转基因水稻后代中的传递和表达特征

遗传学报 2004 SCI 北大核心 CSCD

摘要:在合肥、海南两地以高光效转玉米pepc基因水稻为父本 ,与培矮 64S、2 3 0 2S、2 3 0 4S、2 3 0 6S、512 9、0 2 42 8、皖粳97和双九A等 8个受体杂交 ,转育转pepc基因水稻新种质材料。至 2 0 0 2年已转育成一批转pepc基因水稻品系 ,对这些材料世代跟踪研究显示 :(1)玉米pepc基因以一个显性基因稳定传递给后代 ,符合孟德尔分离规律 ,自交F2 呈3∶1分离 ,BC1为 1∶1分离 ;(2 )玉米pepc基因在杂交转育的转基因水稻中高水平表达 ,与受体亲本相比 ,PEPC活性提高 3 7~ 17 4倍 ,表达水平与受体亲本和转基因拷贝数有关 ,来源相同的世代间有相似的表达水平 ,但同一世代不同个体间表达水平有差异 ,这可能与其位置效应、拷贝数和环境条件有关 ;(3 )杂交后代结实率不高 ,容易产生异交结实导致转基因材料混杂分离。采取抗生素催芽初筛、PCR分析抽检、PEPC活性测定和田间表型观测的转玉米pepc基因水稻选育筛选体系 ,辅之以受体为轮回亲本适当回交可有效地控制。利用该途径已育成 3个稳定的高表达的转玉米pepc基因水稻品系H1596、H1597和Y14 70 ,说明通过常规杂交转育的方法 ,可以培育实用的稳定高表达的转玉米pepc基因水稻品种

关键词: 转基因水稻 玉米pepc基因 遗传方式 PEPC活性表达

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3B染色体短臂小麦赤霉病抗性主效QTL的分析

遗传学报 2003 SCI 北大核心 CSCD

摘要:采用区间作图和复合区间作图方法对重组自交系群体宁 894 0 37 Alondra、望水白 Alondra和苏麦 3号 Alon dra进行了抗赤霉病QTL分析 ,结果表明 ,用在田间和温室的赤霉病抗性鉴定资料 ,在 3个赤霉病抗源宁 894 0 37、望水白和苏麦 3号的 3B染色体短臂上均检测到主效QTL的存在。宁 894 0 37主效QTL位于标记BARC133与Xgwm4 93之间的 5 0cM的区间内 ,最高可解释 4 2 8%的赤霉病抗性 ;望水白的主效QTL位于标记BARC14 7与Xgwm4 93之间11 5cM的区间内 ,最高可解释 15 1%的赤霉病抗性 ;苏麦 3号的主效QTL位于Xgwm5 33a与Xgwm4 93之间 13 0cM的区间内 ,最高可解释 10 6 %的赤霉病抗性。与赤霉病抗性主效QTL紧密连锁的标记均为SSR标记 ,可直接用于分子辅助育种

关键词: 小麦 赤霉病 数量性状位点

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苏麦3号感赤霉病近等基因系的选育及分子标记

遗传学报 2002 SCI 北大核心 CSCD

摘要:小麦品种苏麦 3号高抗由禾谷镰刀菌 (FusariumgraminearumSchw .)引起的小麦赤霉病 ,已成为全世界广泛应用的抗源。为更精确地研究苏麦 3号的赤霉病抗性 ,实验用感病品种川 980为供体亲本 ,苏麦 3号为轮回亲本 ,通过不断回交和自交 ,把川 980的赤霉病感病基因导入苏麦 3号 ,创造了感赤霉病的苏麦 3号近等基因系 (S0 16 ) ,并得到以下结果 :(1)育成的苏麦 3号感赤霉病近等基因系 ,经两年多点抗赤霉病性状鉴定 ,表明该近等基因系感赤霉病感病性稳定 ,而其他形态特征、特性与苏麦 3号一致。 (2 )用RAPD、RFLP分析抗、感苏麦 3号近等基因系之间的差异 ,RFLP分析发现该近等基因系在 2D染色体上存在差异。RAPD的随机扩增产物OPH1914 0 0 可能与近等基因系中的赤霉病感病基因存在连锁。 (3)用近等基因系验证已报道的与小麦抗赤霉病基因有关的分子标记 ,均未发现这些分子标记与导致该近等基因系抗性差异的基因有关。

关键词: 小麦 苏麦3号 近等基因系 感病基因 分子标记

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转C_4光合酶基因水稻的CO_2 交换和荧光特性(英文)

Acta Botanica Sinica 2002 SCI 北大核心

摘要:用转PEPC、PPDK、NADP_ME、PEPC +PPDK酶基因水稻 (OryzasativaL .)及原种为材料 ,研究了光合作用对光照、温度、CO2 的响应和光抑制条件下的叶绿素荧光特性 ,结果如下 :1.转C4 光合酶基因水稻的饱和光合速率比原种高 ,其中转PEPC、PEPC +PPDK双基因水稻的光饱和点比原种高 2 0 0 μmol·m-2 ·s-1,饱和光合速率比原种分别高5 1.6 %和 5 8.5 % ;转PEPC基因水稻的羧化效率比原种高 49.3% ,CO2 补偿点降低 2 6 .2 % ;在高温 (35℃ )下 ,转PEPC基因水稻的光合速率比原种高 17.5 %。 2 .经光抑制处理 8d后 ,转PEPC、PEPC +PPDK酶基因水稻的PSⅡ光化学效率 (Fv/Fm)和光化学猝灭 (qP)下降 2 0 % - 30 % ,非光化学猝灭 (qN)增加了约 30 % ;但原种的Fv/Fm 和qP下降了 5 0 %多 ,qN变化不明显 ,表明转C4 光合基因水稻耐光抑制能力增强。这些结果为用生物技术提高水稻光合效率研究提供了新的依据和途径

关键词: 转基因水稻 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC) 丙酮酸磷酸二激酶(PPDK) 光合作用光抑制 叶绿素荧光

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