科研产出
兔巴氏杆菌和波氏杆菌多重PCR检测方法的建立
《中国兽医学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：参考GenBank中兔巴氏杆菌16SrRNA和波氏杆菌的fim2的基因序列,应用Premier 5.0软件在二者高度保守区设计了2对引物,建立了适合巴氏杆菌和波氏杆菌快速检测的多重PCR检测方法。以该方法对巴氏杆菌和波氏杆菌参考菌株进行PCR扩增,分别能从各自的基因组中扩增出与试验设计相符的644bp和425bp的特异性DNA片段。将扩增所得的DNA片段进行克隆测序,测序结果表明分别为巴氏杆菌16SrRNA和波氏杆菌fim2基因序列。该方法对波氏杆菌的检测下限为4×102 CFU,对巴氏杆菌的检测下限为6×101 CFU。对兔源性沙门菌、葡萄球菌、大肠杆菌、魏氏梭菌扩增结果为阴性。表明所建立的RT-PCR检测技术具有特异、快速和敏感的特点,可用于鉴别诊断兔巴氏杆菌和波氏杆菌以及2者混合感染。
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核桃油的超临界C02流体萃取及其脂肪酸成分分析
《中国粮油学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：采用超临界CO2流体萃取技术对核桃仁中核桃油的提取进行了研究.通过单因素试验,考察了萃取压力、温度、时间以及CO2流量对核桃油萃取率的影响.在单因素试验的基础上,用正交试验进行了工艺参数优化,其最佳萃取条件为:压力30MPa、温度45℃、时间3h、CO2流量4L/rain,在此条件下萃取率达到了50.1%.最后,通过气相色谱仪测定了核桃油的脂肪酸组成成分,结果表明,不饱和脂肪酸的质量分数92.2%,其中油酸、亚油酸和亚麻酸的质量分数分别为36.1%、14.2%和1.4%.
关键词： 超临界CO2 流体萃取核桃油 萃取率 脂肪酸成分 extraction of supercritical carbon dioxide fluid, walnut oil, extraction rate, fatty acid components
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浙江省现代农业地理信息系统的构建及成效研究
《浙江农业学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为充分发挥农业信息化在现代农业生产经营中的科技示范和技术支撑作用,切实加强粮食生产功能区、现代农业园区和标准农田(以下简称"两区一田")的科学管理,浙江省自2010年起着手开展了现代农业地理信息系统建设。文章主要介绍了浙江省现代农业地理信息系统建设的主要内容、技术方案、进展及成效。浙江省目前已基本完成现代农业地理信息系统一期软件研发和9个县(市、区)的系统建设试点工作,在保障政府部门科学决策、实现农业生产要素信息化管理、提升农业部门服务能力、规范农业行政管理活动、降低行政运维成本方面成效明显,初步实现了生产要素管理、农业项目监管、实时监控调度、网络科学决策等功能。
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连续低剂量黄曲霉毒素B1对大鼠肝肾损伤作用
《中国兽医学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：用含有不同质量浓度黄曲霉素B1(AFB1)(0、4、20、25、50μg/kg)的污染饲料连续饲喂各试验组大鼠60d,于7、15、30、60d静脉取血,测定各组大鼠肝功能与肾功能生化指标。每周检测大鼠体质量,试验第60天断头处死大鼠,检测肝肾组织病理学变化并计算各组大鼠的脏体系数。试验期间各组受试动物未发现明显的中毒症状和异常情况,60d内无受试动物死亡。与对照相比,不同剂量组AFB1对大鼠体质量无显著性影响;连续喂饲7d,大鼠血清AST和BUN含量显著升高(P<0.05);连续喂饲15d,大鼠血清AST、BUN和ALB含量显著升高(P<0.05),连续喂饲30d,大鼠血清BUN含量显著升高(P<0.05),连续喂饲60d,大鼠血清CR和BUN含量显著升高(P<0.05)。在各测试质量浓度条件下,大鼠虽未发现明显的中毒症状和异常情况,试验期间无动物死亡,但与空白对照相比,各剂量组AFB1对大鼠均产生了显著的肝肾组织病理学损伤,中毒程度与给毒剂量成正相关性。随着毒素暴露时间延长,大鼠肝脏对低剂量AFB1表现出一定的耐受性,而大鼠的肾脏损伤与毒素暴露时间表现出显著的积累效应。
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农杆菌介导Cry1 Ab/Ac抗虫转基因玉米植株的获得
《江苏农业学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：转基因技术的迅速发展有效地打破了物种间的遗传壁垒,从而加快了优良基因定向聚合的进程,然而遗传转化率低及转基因安全问题成为制约其进一步发展的限制因素。基于此,本研究以玉米自交系H99为材料,将Ac/Ds双元表达载体(包含抗虫Cry1 Ab/Ac基因和gfp报告基因等)通过农杆菌介导法转入由110粒玉米幼胚诱导出的愈伤组织中,获得28株抗性转基因植株。经PCR及RT-PCR的验证结果显示,其中8株为含有Cry1 Ab/Ac目的基因且该基因有效表达的阳性植株,转化效率达7%。通过农杆菌介导法所获得的玉米转基因植株为今后剔除抗生素筛选标记,从而获得安全的玉米抗虫新种质提供了遗传材料。
关键词： 玉米 转基因 Ac/Ds转座系统 Cry1 Ab/Ac抗虫基因
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夏秋用雄蚕品种限7×平48的育成
《蚕业科学 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：饲养雄蚕品种是提高蚕丝品质和蚕茧生产效益的重要途径之一。以引进的性连锁平衡致死系S-14为母本,用普通家蚕品种夏6为优良性状基因供体回交改良性连锁平衡致死系,经2轮杂交、自交、回交组成的循环改良和纯化,育成经济性状优良的家蚕性连锁平衡致死系平48,将该品种与家蚕限性皮斑品种限7组配成夏秋用雄蚕杂交组合限7×平48。经浙江省家蚕新品种实验室联合鉴定,该雄蚕品种的雄蚕率达99%以上,在农村生产鉴定试验中表现出强健好养、产量高、丝质优等特点:张种产茧量和50 kg桑产值分别较对照品种秋丰×白玉提高8.4%和9.4%;茧丝长、解舒丝长、解舒率和干茧出丝率分别较对照种提高7.9%、12%、2.57个百分点、1.54个百分点。新品种2009年通过浙江省家蚕新品种审定,适合在长江中下游蚕区的夏秋季饲养。
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兔岩藻糖基转移酶基因的克隆与原核表达
《西北农林科技大学学报(自然科学版) 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：【目的】克隆兔岩藻糖基转移酶(FUT2)基因,并进行原核表达,为进一步研究RHDV的感染过程和致病机理奠定物质基础。【方法】从兔肌肉组织中抽提基因组DNA作为模板,PCR扩增出FUT2基因,然后将该基因亚克隆入原核表达载体pET30a中,获得重组原核表达质粒pET30a-FUT2。将该重组原核表达质粒转化E.coliBL21(DE3)感受态细胞,用IPTG进行诱导表达,分别用SDS-PAGE和Western-blot方法对表达产物进行鉴定。【结果】成功克隆了FUT2基因,该基因长度为1 044bp。成功构建了原核重组表达质粒pET30a-FUT2,其诱导表达产物分子质量约为45ku;表达的重组FUT2蛋白可与His标签抗体发生抗原抗体反应。【结论】成功克隆了兔岩藻糖基转移酶基因,获得了分子质量约为45ku的FUT2蛋白。
SPME-GC-MS分离鉴定山核桃的挥发性风味物质
《中国粮油学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：采用顶空固相微萃取方法提取山核桃成品的挥发性风味物质,利用气相色谱-质谱联用技术对提取的挥发性风味物质进行分离鉴定。通过正交试验确定了固相微萃取的最佳萃取条件:使用65μm PDMS-DVD萃取头,萃取温度60℃,萃取时间30 min。采用气质联用技术从山核桃中分析鉴定出33种挥发性风味物质成分,包括杂环类化合物、萜烯类、醛类、酸类、醇类、酯类和酮类,这些物质成分的共同作用构成了山核桃独特的风味。其中杂环类化合物、萜烯类化合物和醛化合物类含量较高,是对山核桃整体风味起关键作用的挥发性风味物质。
关键词： 山核桃 顶空固相微萃取法 气相色谱-质谱法 挥发性成分
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