科研产出
细粒棘球绦虫3-羟基酰基-CoA脱氢酶基因的克隆及在其不同阶段的差异表达和生物信息学分析
《中国病原生物学杂志 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：目的研究细粒棘球绦虫3-羟基酰基-CoA脱氢酶分子特性及其在细粒棘球绦虫不同发育阶段的表达差异.方法通过分析细粒棘球绦虫原头蚴高通量转录组测序文库对Unigene进行KEGG通路分析,筛选出一个脂肪酸代谢酶通路及该通路的一个主要调控基因3-羟基酰基-CoA脱氢酶基因.PCR扩增3-羟基酰基-CoA脱氢酶基因,分析其核苷酸序列及其编码蛋白的结构和功能;通过实时荧光定量PCR分析虫体的原头蚴、成虫发育阶段的mRNA的转录情况.结果细粒棘球绦虫3-羟基酰基-CoA脱氢酶基因具有完整的开放阅读框,cDNA全长为822bp,编码274个氨基酸.生物信息学预测3-羟基酰基-CoA脱氢酶蛋白质的相对分子质量及等电点分别为32.98*105和8.87.该蛋白无跨膜螺旋区,具有亲水性,且具有多个潜在的优势抗原表位.氨基酸序列多重比对分析显示其与多房棘球绦虫亲缘关系较近.实时荧光定量PCR检测对该基因在原头蚴和成虫期均有表达,以成虫阶段表达量更高.结论细粒棘球绦虫3-羟基酰基-CoA脱氢酶基因在原头蚴和成虫期高表达,其编码蛋白具有潜在的优势抗原表位该基因可作为细粒棘球绦虫终末宿主抗原候选基因.
关键词： 细粒棘球绦虫 3-羟基酰基-CoA脱氢酶 基因克隆 生物信息学分析 差异表达分析
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牛妊娠相关糖蛋白6基因密码子优化及其在HEK293细胞中的表达
《南方农业学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：[目的]解决天然牛妊娠相关糖蛋白(bPAG)不易分离纯化的问题,获得高效异源表达且具有良好免疫反应性的bPAG6,为国产bPAG检测产品的研发提供技术支持.[方法]根据宿主细胞对密码子的偏好性,利用MaxCodonTM在不改变氨基酸序列的前提下,对bPAG6基因密码子进行优化,采用全基因合成技术扩增优化后的bPAG6基因,构建proEM-bPAG6重组载体,并转染至HEK293细胞中进行高效表达;然后通过SDS-PAGE电泳、Western blotting和ELISA检测重组蛋白的表达效果及免疫反应性,并利用在线生物信息学分析软件对重组蛋白的结构及功能进行预测.[结果]优化后bPAG6基因的密码子适用指数(CAI)由0.80提高到0.96,G+C含量由49.4%提高到58.8%,其蛋白编码区(CDS)长度为1137 bp,共编码379个氨基酸残基.将全基因合成技术扩增获得的bPAG6基因插入proEM载体构建proEM-bPAG6重组载体,经EcoR I和Hind III双酶切鉴定可获得2条与预期结果相符的片段[proEM载体(4369 bp)和bPAG6基因(1176 bp)],测序结果也显示其碱基序列与优化后的bPAG6基因完全一致.proEM-bPAG6重组载体转染HEK293细胞表达获得的重组蛋白bPAG6分子量约46 kD.重组蛋白bPAG6可被抗bPAG6抗体识别,即具有良好的免疫反应性.重组蛋白bPAG6信号肽由N端的前15个氨基酸残基组成;存在5个N-糖基化位点,其N-糖基化修饰主要位于57Asn、73Asn、102Asn、124Asn和181Asn位点处;重组蛋白bPAG6为分泌性蛋白,无跨膜螺旋区,其二级结构由无规则卷曲(42.74%)、延伸链(31.93%)、α-螺旋(19.26%)和β-转角(6.07%)组成.[结论]通过基因优化及真核表达获得的重组蛋白bPAG6具有良好免疫反应性,可作为抗原应用于牛早期妊娠快速诊断产品的研发.
关键词： 牛妊娠相关糖蛋白6(bPAG6) 早期妊娠诊断 密码子优化 真核表达
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溶磷菌组合WF542的筛选及多菌剂联合对辣椒的促生作用
《食品工业科技 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：为了筛选溶磷菌组合,研究多菌剂联合对辣椒生长的影响.通过菌株形态特征、生理生化和16S rRNA序列分析鉴定实验室保存的5株溶磷菌(HSYQ18、SYC3、WS54、FWG2、SCPG-7),筛选溶磷菌组合,测定了溶磷菌组合对环境因素的响应、溶磷、分泌嗜铁素和植物生长激素(IAA)等特性.同时,盆栽实验分析多菌剂组合对辣椒幼苗的生长影响.结果 表明,HSYQ18为深红沙雷氏菌(Serratia rubidaea),SYC3为分散泛菌(Pantoea dispersa),WS54、FWG2和SCPG-7为假单胞菌(Pseudomonas).溶磷菌组合WF542在Pikovskaya培养基(PKO)中连续培养96 h后无机磷浓度可达530 mg/L.溶磷菌组合WF542具有分泌嗜铁素、吲哚乙酸(IAA)的能力.溶磷菌组合WF542最适生长温度为35℃,低温和高温生长缓慢;pH在5.5~8.0之间都能生长较好;在1%~7% NaCl浓度之间均能较好生长,当浓度达到9%以上时基本不能生长.通过盆栽实验得知,固氮菌与WF542菌剂联合能有效促进辣椒幼苗生长.综上表明固氮菌与溶磷菌组合WF542可以作为微生物菌肥投入到农业生产中,为优良的生物肥料菌种资源利用及蔬菜的绿色生产提供重要依据.
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转IGF-1基因超细毛羊与非转基因羊肠道粪便菌群多样性及组成差异分析
《畜牧兽医学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：旨在探究超细毛羊转入IGF-1基因后是否会引起超细毛羊肠道微生物菌群群落改变而导致转基因羊生物安全存在隐患的问题.本研究在同一羊场随机选取临床健康羊3组,其中转IGF-1基因阳性组(GP组)41只(24母(GDF),17公(GPM)),转基因阴性羊(GN组)43只(25母(GNF),18公(GNM)),非转基因超细毛羊(NG组)29只(18母(NGF),11公(NGM)).取直肠粪样,应用IIlumina HiSeq高通量测序技术测定粪便样本中细菌的16S rRNA V3-V4区序列,分析转基因超细毛羊与非转基因羊间肠道粪样细菌群落组成.结果表明,共计得到17个门,32个纲,56个目,94个科,228个属及185个种;LEfSe分析显示,GPF组有10个生物标记物;GPM组有5个,均是反刍动物肠道菌群的常见定植菌;NGF组的生物标记物为拟杆菌BS11科;NGM组为厚壁菌门.均为反刍动物肠道菌群的主要优势菌.3组肠道菌群的共享菌分析显示,在门纲目科属种6个分类水平拥有共享菌比例高达91%~94%.本研究证实,转入IGF-1基因并未改变超细毛羊肠道菌群的整体结构分布,转基因羊具有生物安全及环境安全性.
关键词： IGF-1基因 超细毛羊 肠道菌群结构 细菌多样性 高通量测序 转基因生物安全
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新疆棉花枯、黄萎病的发生现状及其快速分离技术
《植物保护 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：为明确新疆不同地区造成棉花萎蔫,维管束变褐的病原菌种类及其发生现状,本研究对新疆47个主要植棉区有萎蔫症状且维管束变褐的棉花病株进行了分离鉴定,并对其快速分离鉴定方法进行了改进。结果表明:南疆20个地点,得到358个纯化菌株,黄萎病菌占81.8%,枯萎病菌占18.2%;北疆27个地点,得到495个纯化菌株,黄萎病菌占93.9%,枯萎病菌占6.1%。南北疆均以黄萎病为主,枯萎病南疆重于北疆。维管束病害的快速分离方法每分离一个样品只需2 min,污染率仅为6.7%。
水氮施量对膜下滴灌棉花生长及水氮分布的影响
《灌溉排水学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：【目的】探究北疆地区膜下滴灌棉花最优水氮施量及土壤水氮分布特征。【方法】采用二因素完全随机试验,设置灌水量4个水平(W1:5 250 m~3/hm~2、W2:4 500 m~3/hm~2、W3:3 750 m~3/hm~2和W4:3 000 m~3/hm~2)和施氮量3个水平(N1:300 kg/hm~2、N2:262.5 kg/hm~2和N3:225 kg/hm~2),研究了不同水氮施量对植株形态、土壤含水率分布及土壤氮素分布的影响。【结果】施氮量对植株形态指标的影响程度低于灌水量,但植株形态指标不能反映产量;棉花盛蕾期,表层土壤含水率较低,直至盛花期,表层土壤含水率稳定在20%左右。且灌水量为3 750 m~3/hm~2时,更有利于土壤保持湿润,并且向深层流失的水分较少;0～20 cm土层内硝态氮和铵态氮量相对较高,随着灌水量和施氮量的增加,氮素向深层土壤的淋移程度不断增加,当施氮量为262.5 kg/hm~2时,根系层内的硝态氮含量相对较高,尿素转化的铵态氮也更多;当施氮量为262.5 kg/hm~2,灌水量为3 750 m~3/hm~2时,棉花产量达到最大,为6 460.5 kg/hm~2。【结论】施氮量为262.5 kg/hm~2,灌水量为3 750 m~3/hm~2,可作为该地区最优水氮施量组合。
关键词： 膜下滴灌 植株形态 含水率 土壤硝态氮 土壤铵态氮
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转录调控因子Lmo2672对LM环境适应性和应激的调控作用
《西南农业学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：[目的]本文为了解AraC家族转录调控因子Lmo2672对单核增生李斯特菌(LM)环境适应性和应激的影响.[方法]利用温控型质粒pKSV7构建LM-Δlmo2672缺失株,比较母源株LM EGD-e和缺失株LM-Δlmo2672在不同应激环境中生长情况的差异,并利用qRT-PCR方法分析转录调控因子Lmo2672缺失对应激调控基因及氧化应激相关基因转录水平的影响.[结果]与LM EGD-e相比,LM-Δlmo2672在37、42℃及含5%NaCl、0.3%胆酸盐、5 mM H2O2、1%Triton X-100的培养基中生长速度均显著降低(P<0.05);且环境适应性及应激相关基因(prfA、lexA、fri、perR、kat、sod)转录水平显著降低(P<0.05).[结论]提示lmo2672基因在LM环境适应性和应激中发挥重要的调控作用.
关键词： 单核增生李斯特菌 AraC家族 lmo2672基因 环境适应性
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滴灌磷肥在灰漠土中运移的研究
《中国土壤与肥料 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：磷在土壤中的迁移是影响农业系统磷利用效率的关键因素之一.应用同位素32P示踪和放射性同位素自显影技术,研究了滴施磷酸一铵在灰漠土中的运移.结果表明:与不施磷处理相比,滴施磷肥可以增加0~15?cm土层有效磷的含量.在0~20?cm土层均有不同比例32P的分布,但大部分32P仍集中分布在表层,0~10?cm土层中的32P占总量的72.7%~89.5%,最高可达99%.不同施肥时期磷的运移距离有很大差异,T3(0~20?cm)>T2(0~10?cm)>T1(0~5?cm),这可能是由于干湿交替导致土壤孔隙率变化,进而影响了磷的移动距离.平行于滴灌带方向上磷的运移距离比垂直于滴灌带方向更远.随着正磷酸盐浓度增加,磷的运移距离变大,滴施磷酸一铵处理32P的移动距离达到对照的2倍.
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不同植物生长调节剂对骏枣内源激素与果实品质的影响
《新疆农业科学 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：【目的】通过外援复配新型植物生长调节剂的应用,研究骏枣果实发育过程中内源激素的变化关系及对果实品质的影响,筛选可改善果实品质的复合型植物生长调节剂,为新疆红枣产业的可持续发展提供技术依据。【方法】选用6 a生密植骏枣为对象,以超敏蛋白、亚精胺、水杨酸、DA-6为材料进行复配3个配方,调查分析喷施对叶片与果实发育过程中内源激素含量、产量和果实品质的影响。【结果】通过外援亚精胺、水杨酸和DA-6复混试剂的应用,显著增强源叶的供应能力,减缓了库果的生长速度。在骏枣果实第一次快速生长期源叶、库果之间的IAA比值较对照提高了183.0%,单果重和产量分别较CK提高了27.69%和25.18%。超敏蛋白或水杨酸与亚精胺和DA-6的组合均显著提高了骏枣叶片从白熟到成熟期ZR的含量,ZR的叶果比能持续维持在1.37以上的高水平。30 mg/L的DA-6是提升骏枣叶片后期营养供应能力的核心物质之一。【结论】在枣树坐果后喷施0.25 mmol/L水杨酸与0.1 mmol/L亚精胺和30 mg/L DA-6的混合试剂,可解决骏枣因前期生长过快,后期营养不足致使干物质积累不够,果实不饱满、抗性不足的问题。
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早熟陆地棉主要性状配合力及杂种优势分析
《新疆农业科学 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：[目的]筛选新疆自育的优良亲本及强优势杂交组合,为棉花新品种选育奠定基础.[方法]选用不同来源的早熟陆地棉亲本17个,按照6×11的NC Ⅱ设计组配不完全双列杂交,得到66个杂交组合,通过随机区组3次重复试验,分析F1产量和纤维品质的杂种优势和配合力.[结果]17个亲本的一般配合力(GCA)和特殊配合力(SCA)存在显著或极显著差异.产量和品质性状广义遗传力和狭义遗传力大多比较低,株高广义遗传力可达74.28%,狭义遗传力达51.5%,其次为衣分和马克隆值.供试组合中以籽棉产量竞争优势、中亲优势和超亲优势最高,平均值分别为5.49%、11.77%和8.97%;与产量密切相关的果枝数、衣分、衣指等性状在中亲优势和超亲优势中都呈明显的正向优势;在竞争优势中,以果枝数、籽棉产量、衣分、百粒重、衣指和马克隆值为正向优势.产量性状GCA高的亲本是B3(23-90),B4(42-34),A4(H1-4),A6(惠远1403),A9(新农早112);品质性状GCA高的亲本是B1 (125-1),B3(23-90),A5(H7-143),A8(天云1133).[结论]通过F1代对株高、衣分和马克隆值等性状的亲本进行选择效果较好;籽棉产量的杂种优势最高;A1×B5(10-101 ×72-47),A3×B1(48-33×125-1),A4× B1(H1-4×125-1),A8×B1(天云1133×125-1)等组合具有较大利用潜力.
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