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供核细胞对绵羊体细胞克隆效率的影响

新疆农业科学 2020 北大核心 CSCD

摘要:【目的】在制作克隆胚胎时,供核细胞直接制约着重构胚的融合数量和发育潜力。研究供核细胞对绵羊体细胞对克隆效率的影响。【方法】从供核细胞的静置时间,研究传代次数与周期处理,供核细胞不同克隆株,不同羊源细胞等,以重构胚融合率和囊胚发育率为检测指标,判定单因素供核细胞对克隆胚胎的影响。【结果】在供核细胞静置时间方面,供核细胞静置15~30 min内完成重构胚制作的融合率极显著高于静置2 h左右的供核细胞组(90.10%vs 78.84%)(P<0. 01),但囊胚率差异不显著(15.58%vs 14.65%)(P>0.05);在供核细胞传代次数(d1~d3)和汇合期生长时间方面(24 and 48 h),各组的融合率差异不显著(70.37%、76.03%、71.92%vs 72.97%)(P>0.05),但囊胚率有增高的趋势(5.96%、9.06%、15.85%vs 20.16%);在同一供核细胞不同克隆株方面,供核细胞对融合率和囊胚率存在显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)的影响;在不同个体方面,供核细胞株对融合率和囊胚率存在极显著的影响(P<0.01)。【结论】15~30 min内的静置供核细胞、传代3次并延长汇合期细胞生长时间(48 h),多选细胞株更有利于克隆胚的制作。

关键词: 供核细胞 静置时间 传代次数 细胞株 克隆胚胎

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基于密码子优化策略的牛妊娠相关糖蛋白9(bPAG9)的原核表达及纯化

江苏农业学报 2020 北大核心 CSCD

摘要:为了构建pET30a-bPAG9重组表达载体,并在BL21(DE3)感受态细胞中转染高效表达牛妊娠相关糖蛋白9(bPAG9),通过生物信息学技术对bPAG9基因进行密码子优化,人工合成bPAG9全基因序列,经双酶切法将bPAG9基因插入到表达载体pET30a中。将构建的重组质粒pET30a-bPAG9转染至BL21(DE3)感受态细胞中进行原核表达,经过超声波裂解和亲和层析方法获得重组蛋白bPAG9。用SDS-PAGE和Western Blot方法检测重组蛋白bPAG9的表达效果。结果显示,PCR扩增得到1 128 bp的优化bPAG9基因片段,构建的重组质粒pET30a-bPAG9经双酶切获得约5 244 bp和1 125 bp的2条片段,与预期值相符;对重组载体测序,测序结果与优化后的基因碱基序列完全一致,编码的氨基酸序列未发生突变;SDS-PAGE和Western Blot鉴定结果显示,获得相对分子质量约为4.0×10~4的bPAG9重组蛋白,通过亲和层析纯化后,重组蛋白bPAG9纯度到达90%以上。

关键词: 牛妊娠相关糖蛋白 密码子 重组蛋白 原核表达

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基于表型和SSR标记筛选海岛棉优异种质资源

棉花学报 2020 北大核心 CSCD

摘要:【目的】筛选海岛棉某一性状特别突出的优异种质资源,加快其新品种的选育进程。【方法】本研究以178份海岛棉核心种质资源为试验材料,通过调查和测定铃重、单株铃数、衣分、纤维长度、纤维比强度和马克隆值6个性状的表型数据,开展变异度和遗传多样性分析。每个性状表型值按10%最优取样策略,初步筛选海岛棉优异种质资源;同时利用120对simple sequence repeat (SSR)引物对178份海岛棉核心种质进行多态性分析,并开展群体结构分析及基因型聚类分析,依据聚类结果对初选海岛棉优异种质进一步筛选,鉴定出最终的海岛棉优异种质资源。【结果】海岛棉核心种质资源中上述6个性状的变异度和遗传多样性较丰富。120对SSR引物在178份海岛棉种质中共检测出262个等位变异位点,平均值为2.18;多态信息含量(Polymorphism information content, PIC)为0.067 8~0.630 0,平均为0.296 0,属于中度多态。聚类分析将178份海岛棉核心种质划分为2大类群。基于表型值和SSR标记的聚类分析结果,最终筛选出23份单一性状特别突出的海岛棉优异种质资源。【结论】基于表型和SSR标记能较好地分析与评价海岛棉种质资源、发掘海岛棉优异种质资源,为海岛棉遗传育种提供材料基础,同时也为作物优异种质资源的筛选与鉴定提供重要参考和依据。

关键词: 海岛棉 表型 SSR标记 优异种质

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基于高光谱数据的滴灌甜菜叶片全氮含量估算

作物学报 2020 北大核心 CSCD

摘要:本文旨在明确甜菜叶片全氮含量与高光谱地面植被遥感的定量关系,建立干旱区甜菜叶片全氮含量精确估测模型,及时监测甜菜生长状况。本研究选取新疆滴灌甜菜(Beta356)为材料,利用ASD野外高光谱仪在甜菜叶丛快速生长期、块根膨大期与糖分积累期采集各处理反射光谱,并同时测定全氮含量,分析原始光谱反射率及一阶微分光谱反射率与全氮含量的相关性,并进一步建立光谱特征参数与敏感波段植被指数全氮含量估算模型。结果表明,光谱特征参数Dr762幂函数下估算模型具有较好估算甜菜叶片全氮含量的能力,其决定系数R2=0.747,验证相对误差RE(%)为21.635,验证均方根误差RMSE为4.914;通过植被指数与叶片全氮含量建立多种函数估测模型,其中差值植被指数Dr762–Dr496下一元线性函数具有较好估算甜菜叶片全氮含量的能力,其决定系数R2=0.794,验证相对误差RE(%)为23.008,验证均方根误差为5.372。

关键词: 全氮 高光谱 特征参数 植被指数 估算模型

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利用无人机可见光遥感影像提取棉花苗情信息

农业工程学报 2020 EI 北大核心 CSCD

摘要:为提高棉花苗情信息获取的时效性和精确性,该文提出了基于可见光遥感影像的棉花苗情提取方法。首先,利用自主搭建的低空无人机平台获取棉花3~4叶期高分辨率遥感影像,结合颜色特征分析和Otsu自适应阈值法实现棉花目标的识别和分割。同时,采用网格法去除杂草干扰后,提取棉花的形态特征构建基于SVM的棉株计数模型。最后,基于该模型提取棉花出苗率、冠层覆盖度及棉花长势均匀性信息,并绘制棉花出苗率、冠层覆盖度的空间分布图。结果显示,模型的测试准确率为97.17%。将模型应用于整幅影像,计算的棉花出苗率为64.89%,与真实值误差仅为0.89%。同时基于冠层覆盖度、变异系数分析了棉花长势均匀情况。该文提出的方法实现了大面积棉田苗情的快速监测,研究成果可为因苗管理的精细农业提供技术支持。

关键词: 无人机 遥感 棉田 出苗率 覆盖度 可见光

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糖代谢对甜瓜果实后熟软化的影响

食品与发酵工业 2020 北大核心 CSCD

摘要:为研究糖代谢及其基因表达与甜瓜果实后熟软化的关系,将甜瓜果实分别在20、2℃下直接贮藏、1-MCP处理后在20℃下贮藏,测定果实后熟软化过程中硬度、呼吸速率、乙烯释放量、淀粉和可溶性糖含量及相关酶活性,并对其关键酶基因(AM、SPS、SS和AI)进行实时荧光定量PCR分析。结果显示,甜瓜果实采后淀粉快速降解,在此过程中,果实硬度也迅速下降,淀粉酶(amylase, AM)是果实软化初期的关键酶。在果实后熟软化过程中,蔗糖、果糖和葡萄糖含量均有所下降,蔗糖代谢也参与了甜瓜果实后熟软化。此外,低温和1-MCP处理对甜瓜果实糖代谢、淀粉代谢过程中酶活性与相关基因表达均有抑制作用。

关键词: 甜瓜 后熟 软化 糖代谢 酶活性 基因表达

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生物炭对葡萄幼苗根际土壤养分、酶活性及微生物多样性的影响

中国土壤与肥料 2020 北大核心 CSCD

摘要:以一年生"弗雷"葡萄幼苗为试验材料,采用盆栽试验,根据生物炭施用方式与炭土质量比,设置5个处理,研究了生物炭不同施用方式及施用量对葡萄幼苗根际土壤养分、酶活性和微生物多样性的影响.结果表明:与不施生物炭(CK)相比,生物炭混施(HA、HB)和穴施(JA、JB)增加了土壤有机质、有效磷、速效钾含量及蔗糖酶、过氧化氢酶活性,但小幅度降低土壤容重和pH.同一施用方式下,生物炭施用量越高土壤碱解氮、速效钾含量及蔗糖酶、过氧化氢酶活性越高;同一施用量下,混施处理土壤有机质和速效养分(碱解氮、有效磷、速效钾)含量及蔗糖酶、过氧化氢酶活性优于穴施处理,其中HB(混施5%生物炭)处理土壤有机质和速效养分含量及蔗糖酶、过氧化氢酶活性增加幅度最大,分别比CK高73.7%、19.2%、42.3%、20.8%、10.5%、8.6%.土壤细菌Alpha多样性分析表明HB处理可以提高细菌丰度,但对细菌群落多样性影响甚微.穴施处理下硝化螺旋菌属菌群数量高于混施处理,而混施处理下节细菌属和假单胞菌属菌群数量高于穴施处理.UPGMA聚类分析及RDA冗余分析表明混施处理引起根际土壤微生物群落组成和结构发生较大变化,土壤碱解氮、有机质、速效钾及pH对细菌群落结构影响较大.综上,生物炭混施对葡萄幼苗根际土壤养分、酶活性及微生物多样性的影响优于穴施,其中HB处理效果较优.

关键词: 生物炭 土壤养分 土壤酶 微生物多样性 葡萄

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滴施生物菌剂对西红柿生长、品质及土壤理化性状的影响

西南农业学报 2020 北大核心 CSCD

摘要:[目的]本文旨在探明不同生物菌剂对西红柿生长的作用效果.[方法]2017-2018年设置田间小区试验,采用生物统计学方法,研究了4种生物菌剂(枯草芽孢杆菌可湿性粉剂30 kg·hm-2、"施倍健"哈茨木霉菌剂22.5 kg·hm-2、渝峰"99"植保30 kg·hm-2、中农绿康45 kg·hm-2)随水滴施对西红柿生长、产量、品质及土壤理化性状的影响效应,并与常规化肥处理(2179.5 kg·hm-2)进行对比分析.[结果]4种菌剂滴施后植株长势整齐、主茎发育强壮,株高较对照增加了10~26 cm,茎粗增加了0.6~1.3 cm;果实产量较对照增加1.22~1.53倍,较化肥处理增幅34.33%~53.65%;西红柿脐腐病和灰霉病发病率显著减轻;西红柿外观和内在品质得到不同程度改善,较化肥处理,果色均匀度、果实成熟度显著提高,较对照果实Vc含量提高14.40%~49.94%,糖分含量增加了8.68%~37.85%,可滴定酸下降了28.89%~56.76%.同时,4种生物菌剂滴施后对土壤理化性状具有显著影响,较化肥处理土壤pH、电导率略有下降,降低了土壤盐渍化的发生,有机质含量增加了30.43%~83.48%;较对照处理土壤有机质、速效氮、磷、钾养分元素显著增加,有机质增加了66.67%~134.44%,表明所用生物菌剂具有改良土壤肥力的作用.[结论]4种生物菌剂应用于西红柿,均起到促生增产、抑制病害及改善品质作用,作用效果由大到小依次为:渝峰"99植保"、中农绿康、枯草芽孢杆菌可湿性粉剂、"施倍健"哈茨木霉菌剂,这与不同菌剂的成分、作用机理及其对土壤微环境改良效果密切相关.

关键词: 生物菌剂 随水滴施 西红柿 生长发育 产量 品质 土壤理化性状

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不同生长状况下新疆野苹果内源激素含量的变化

新疆农业科学 2020 北大核心 CSCD

摘要:【目的】分析不同生长状况下新疆野苹果野果林在生长发育过程中内源激素的变化规律,为新疆野苹果保护研究提供科学依据。【方法】分别于不同发育周期、不同年限、不同生长状况的新疆野苹果叶片与果实鲜样,采用高效液相法测定IAA、GA_3、ABA、ZR、JA这5种激素的含量。【结果】从6~9月,正常的新疆野苹果叶片ZR、GA_3含量下降,JA、IAA、ABA含量上升;退化的新疆野苹果叶片ZR、JA、GA_3、IAA、ABA含量上升;退化和正常的果实ZR、JA、GA_3、IAA变化趋势相同,均呈下降的趋势。2018年相比于2017年,正常的新疆野苹果叶片ZR、JA、ABA含量上升,GA_3、IAA含量下降;退化的新疆野苹果叶片ZR、ABA含量上升,GA_3、IAA含量下降;正常和退化的果实内源激素含量变化趋势相同,均是JA含量上升,ZR、GA_3、IAA、ABA含量下降。在5种不同存活率的新疆野苹果中,得出100%存活率新疆野苹果林叶片的IAA、ZR、GA_3含量最高,20%存活率新疆野苹果林叶片的JA含量最高,10%存活率新疆野苹果林叶片的ABA含量最高,得出存活率越高,促进生长的激素含量也会越高。【结论】2种不同生长状况下,新疆野苹果5种内源激素含量在不同月份和不同年份表现出不同趋势。

关键词: 新疆野苹果 退化 生长势 内源激素

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早熟陆地棉纤维品质性状与生育期的相关性分析

广东农业科学 2020 北大核心 CSCD

摘要:[目的]为选择品质优良的早熟陆地棉品种提供理论依据和指导信息.[方法]采用Excel 2003、SPSS19.0软件,对2015-2017年参加新疆自治区早熟组区域试验的陆地棉品系的纤维品质性状及不同生育阶段进行数据统计,采取相关性分析、通径分析、逐步回归分析等统计分析方法,分析纤维品质性状与生育期间的相互关系,明确重要影响因子,并建立最优回归模型.[结果]通过通径分析表明,棉花出苗-开花阶段对棉纤维的整齐度具有很强的间接作用,对纤维长度、断裂比强度、马克隆值具有很强的直接作用;开花-吐絮阶段对棉纤维的纤维长度、伸长率具有很强的间接作用.逐步回归分析表明,出苗-开花期天数对陆地棉纤维长度、伸长率存在极显著正效应,对断裂比强度存在显著正效应,与马克隆值存在显著负效应,且可构建逐步回归模型,且t检验显著.[结论]出苗-开花期天数对陆地棉纤维长度、断裂比强度、马克隆值、断裂伸长率等纤维品质性状存在显著直接作用及间接作用;开花-吐絮天数对陆地棉纤维长度、断裂伸长率存在显著间接作用.

关键词: 早熟陆地棉 品质性状 生育期 相关性分析 通径分析 逐步回归分析

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