科研产出
植物甜蛋白基因Thaumatin Ⅱ转化番茄的初步鉴定
《浙江农业学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：以番茄无菌苗的子叶为外植体,以抗卡那霉素的NPTⅡ作为选择标记基因,通过根癌农杆菌介导法,将甜蛋白Thaumatin Ⅱ基因导入番茄中,共获得10株独立的抗性转化株系。对抗性转化株系进行了PCR和Southern blotting鉴定,PCR检测得到了预期的特异条带,Southern blotting结果表明其中1个转化株系插入了2个拷贝的Thaumatin Ⅱ cDNA。以上试验结果证明Thaumatin Ⅱ基因已经整合到转基因番茄植株的基因组中,为最终获得在蛋白质水平表达Thaumatin Ⅱ的无选择标记的转基因番茄打下了基础。
关键词： 番茄 植物甜蛋白 Thaumatin Ⅱ基因 遗传转化
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基于AFLP的家蚕性连锁平衡致死系Z染色体连锁分子标记筛选
《浙江农业学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：平48(以下简称P48)是通过转育方法将性连锁平衡致死系的群体性比控制基因转移到白云品系培育而成的。研究以P48与白云(BY)这对近等位基因系为分析材料,利用AFLP筛选并分析差显标记,经PAGE电泳、片段回收、克隆、测序及与家蚕(P50)基因组数据库序列比对发现家蚕性连锁平衡致死系Z染色体特异性连锁标记C094,该标记与P50的对应序列间存在明显差异。进一步设计差异引物对P48与P50及其杂交F1代进行PCR验证,确定C094标记与家蚕性连锁平衡致死系P48致死基因l1连锁,这为进一步鉴定及克隆致死相关基因奠定了基础。
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梨火疫病菌新的Ⅲ型泌出系统(T3SS)分析及在其他菌株中的分布
《湖北农业科学 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：试验分析了梨火疫病菌(Erwinia amylovora)Ea273基因组上新的T3SS(TypeⅢSecretion System,T3SS)致病岛特征并验证它们在Erwinia属的21个菌株基因组上是否存在。生物信息学分析发现,Ea273基因组不同位点上存在两个新的T3SS致病岛,称为PAI-2和PAI-3,大小分别为32.889kb和21.792kb。经PCR和Southern blot证明Ea273、Ea246、Ea262、Ea528以及Ea6445个菌株基因组存在PAI-2和PAI-3。PAI-3和PAI-2在基因结构和组成上相似,同源性超过70%,PAI-3包含PAI-2所有基因,两者和昆虫内生菌S.glossinidius编码的T3SS的SSR-1致病岛非常相似。
关键词： 梨火疫病菌 新的T3SS致病岛 PCR Southern blot
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萝卜叶片和肉质根硫代葡萄糖苷组分与含量分析
《浙江农业学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：采用HPLC分析法对‘滁州小五缨’、‘古岭夏萝卜’和‘云南白萝卜’3个萝卜品种叶片和肉质根的硫苷进行了分析。结果表明,3个地方品种叶片和肉质根硫苷组分相同,均含6种脂肪族硫苷和3种吲哚族硫苷,但品种及器官之间的硫苷含量存在显著差异。3个品种肉质根总硫苷含量分别为22.59,12.44和27.94mg/g DM,其中95%以上是脂肪族硫苷。3个品种肉质根总硫苷与总脂肪族硫苷含量分别是叶片2.6~4.9倍与2.8~6.0倍;‘滁州小五缨’肉质根总吲哚族硫苷含量是叶片1.7倍,而‘古岭夏萝卜’和‘云南白萝卜’却只有0.37和0.77倍。4-甲基硫代-3-丁烯基硫苷是肉质根和叶片主要硫苷组分,相对含量分别为90.43%~93.92%和62.42%~74.05%。结果表明萝卜肉质根和叶片都含有丰富的硫苷,且不同品种以及器官之间的硫苷含量差异显著。
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鸭疫里默氏菌病和大肠杆菌病多重PCR诊断方法的建立
《中国兽医学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：参考GenBank中鸭疫里默氏菌和大肠杆菌的外膜蛋白A(OmpA)基因序列,应用PrimerPremier5.0软件在二者高度保守区设计了2对引物,建立了适合鸭疫里默氏菌和大肠杆菌的快速检测的多重PCR检测方法。以该方法对已分离并保存的鸭疫里默氏菌和大肠杆菌进行PCR扩增,分别扩增出与试验设计相符的670、408bp的特异性DNA片段。将扩增所得的DNA片段进行克隆测序,测序结果表明分别为鸭疫里默氏菌和大肠杆菌OmpA基因序列。该方法对鸭疫里默氏菌和大肠杆菌的检测下限分别为4×104CFU/mL和3×104CFU/mL。表明所建立的PCR方法具有特异、快速和敏感的特点,可用于诊断鸭疫里默氏菌、大肠杆菌以及两者的混合感染。
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遮光率及施肥浓度对凤梨丹尼斯生长与开花的影响
《江苏农业科学 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：针对江浙地区的夏季高温,在具有内外双层膜和水帘风扇降温设备的大棚内,进行了4种遮光率(0、30%、50%、70%)和3种施肥浓度(凤梨专用肥花多多9号稀释500、1 000、1 500倍)共12个处理对凤梨品种丹尼斯生长与开花的影响试验。结果表明,不同的遮光率对凤梨丹尼斯的生长与开花影响非常显著,以遮光率30%下表现最好,凤梨株高、新叶数以及花的高度、直径、花色都是最好的,并且催花时间最短,催花成功率最高;其次为不遮光和遮光率为50%的处理,遮光率70%的效果最差。施肥浓度对凤梨丹尼斯的营养生长影响不显著,对催花率、花型及花色有较大影响,在光照过强或不足的情况下稀释500倍的施肥浓度降低了催花成功率,施肥浓度以稀释1 500倍和1 000倍表现较好。
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盆栽对柑橘叶片光合和叶绿素荧光特性的影响
《浙江农业学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：以杂柑类品种‘天草’为试验材料,研究大田栽培下及不同体积盆栽限根条件下柑橘的光合特性和叶绿素荧光特性。结果表明,在不同光强下大盆栽培柑橘的净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、胞间CO2浓度(C i)及蒸腾速率(Tr)与大田栽培相比均无显著差异;而小盆栽培显著降低了柑橘植株的Pn,Gs及Tr,但C i无明显变化。大盆栽培会引起植株对高浓度CO2的利用能力降低,但小盆栽培植株对不同浓度CO2的利用能力都显著低于大田栽培。从叶绿素荧光参数来看,大盆栽培除了导致天线色素转换效率(Fv′/Fm′)下降以外,对PSⅡ最大光化学效率(Fv/Fm)、PSⅡ的实际光量子产量(ΦPSⅡ)、PSⅡ的电子传递速率(ETR)、光化学猝灭系数(qP)及非光化学猝灭系数(NPQ)均无显著影响;而小盆栽培导致Fv′/Fm,′ΦPSⅡ,ETR显著下降,NPQ显著上升。能量分配分析的结果与光合和叶绿素荧光参数变化相一致。
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响应面分析法优化香菇中γ-谷氨酰转肽酶的超声辅助提取条件
《食品科学 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：采用响应面分析法对香菇中γ-谷氨酰转肽酶的超声提取工艺进行优化。在单因素试验基础上,根据中心组合(Box-Benhnken)试验设计原理,采用三因素三水平的响应面分析法,以γ-谷氨酰转肽酶的提取率为响应值进行回归分析。结果表明超声辅助提取GGT的最佳条件为提取功率、提取时间、料液比的最佳条件分别为204.84W、28.19min、1:52.29。在上述提取条件下,提取液中GGT的提取率达到11.19U/g,与模型预测值基本相符。
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番茄抗黄化曲叶病毒病基因的AFLP分子标记
《浙江农业学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：用番茄抗黄化曲叶病毒病品系‘T0727’与高感黄化曲叶病毒病品系‘T9179’配制杂交组合,接种鉴定其F1代及F2代分离群体的黄化曲叶病毒病发生情况。用64对EcoRⅠ/MseⅠ引物组合对‘T0727’、‘T9179’两个亲本及其F1代和F2代抗病和感病基因池进行AFLP分析,共扩增出4 023条可分辨的条带,其中3条为稳定的差异。用‘T0727’和‘T9179’杂交产生的F2代分离群体对3个特异条带与目的基因的遗传连锁性进行分析,发现特异条带E-ACC/M-CAG与抗黄化曲叶病毒病基因紧密连锁,二者之间的遗传距离为9.5 cM。将E-ACC/M-CAG片段回收、克隆和测序,成功地将其转化为SCAR标记,暂定名为Afty-196,可以用于对番茄黄化曲叶病毒病基因的标记辅助选择。
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