科研产出
红曲糟固态制曲对米曲霉3.042产孢子及产酶特性影响
《福建农业学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【目的】研究米曲霉3.042红曲糟固态制曲产孢子及产酶特性，为米曲霉固态发酵红曲糟制备调味液提供理论支持。【方法】以红曲糟为主要原料，以米曲霉3.042为发酵剂，以酸性蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶酶活力及蛋白质酶解率、氨氮转化率等为指标，研究红曲糟、麸皮与水做培养基料配比、发酵时间等因素对米曲霉生长及产酶效果的影响。【结果】成曲培养料适宜质量配比为红曲糟∶麸皮∶水为1∶0.8∶1.4，在此条件下培养72 h，成曲的孢子量、酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶和谷氨酰胺酶分别可达9.93、1 160.94 U·g-1、1 157.47 U·g-1、1 788.40U·g-1和10.49 U·g-1。利用该成曲发酵得到的调味液中氨基酸态氮、酶解率和氨氮转化率分别为8.2 g·L-1、63.40%和37.08%，利用红曲糟麸皮做培养基料，利用3.042发酵得到的调味液鲜味较高，色泽红褐有光泽，具备酱香浓郁、滋味醇厚的特征，具有典型的酱油风味。【结论】红曲糟适合做米曲霉固态制曲的培养基料的主要原料，其适宜的质量比为红曲糟∶麸皮∶水为1∶0.8∶1.4。
关键词： 米曲霉 红曲糟 培养料配比 产酶特性 固态制曲 酱油
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兔源F型多杀性巴氏杆菌荧光定量PCR检测方法的建立
《中国预防兽医学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为建立特异性强且敏感性高的兔源F型多杀性巴氏杆菌(Pm)快速检测方法,本实验根据F型Pm fcbD基因的保守序列设计特异性引物和探针,经反应条件优化,建立了检测兔源F型Pm的荧光定量PCR方法.利用该方法检测兔源F型Pm、兔源A和D型Pm、支气管败血波氏杆菌、肺炎克雷伯菌、大肠杆菌、魏氏梭菌和金黄色葡萄球菌等临床常见兔源病原菌,结果显示,该方法仅对兔源F型Pm检测为阳性,其余病原菌均为阴性,特异性强.利用该方法分别检测10倍倍比稀释(1×108拷贝/μL~1×100拷贝/μL)的兔源F型Pm基因组DNA,进行敏感性试验,结果显示该方法的检测限为10拷贝/μL,敏感性分别是已报导的双重PCR方法和环介导等温扩增方法的100倍和10倍,敏感性高.利用该方法对不同稀释度的质粒标准品进行批内和批间重复性试验,结果显示,批内和批间变异系数均小于3%,重复性好.利用该方法检测64份已知结果的临床样品,结果显示该方法的检测结果与已报导的双重PCR方法和环介导等温扩增方法检测结果的符合率均为100%,准确性高.本研究首次以fcbD为靶基因建立兔源F型Pm的荧光定量PCR检测方法,为兔源F型Pm的检测提供了有力的技术手段.
关键词： 兔 F型多杀性巴氏杆菌 fcbD基因 荧光定量PCR方法
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贮存时间和容器对香茅精油挥发性成分的影响
《饲料研究 》 2023 北大核心
摘要：试验旨在研究贮存时间和容器对香茅精油挥发性成分的影响。采用水蒸气蒸馏法提取精油，分装于2种不同精油瓶中贮存，通过顶空-气相色谱-质谱联用技术对不同贮存时间的精油进行挥发性成分分析。结果显示，随着贮存时间延长，内塞瓶香茅精油的挥发性成分数量逐渐增多，精油中的主要组分（萜类、单萜醛、（E）-柠檬醛和（Z）-柠檬醛）含量随贮存时间渐进性下降，非萜类物质含量显著增加。与提取当年相比，滴管瓶香茅精油贮存6 a后，挥发性成分数量增多，萜类、单萜醛、（E）-柠檬醛和（Z）-柠檬醛含量减少，酯类含量增加。内塞瓶不同贮存时间的精油样品相似率为0.989～0.996，内塞瓶与滴管瓶之间的相似率为0.697～0.723。研究表明，贮存时间和容器对精油的挥发性成分组成影响较大，内塞瓶更有助于保持精油的稳定性。
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施用秸秆和生物炭的茉莉园土壤微生物量及细菌多样性的差异
《环境科学学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：土壤微生物在农田生态系统的生物地球化学循环中起着重要作用，然而目前尚不清楚秸秆直接还田和炭化还田对土壤微生物量及细菌多样性影响的差异.本研究在福州茉莉（Jasminum sambac）种植基地开展了田间实验，并设置对照（0 kg·hm~(-2)）、秸秆（8000 kg·hm~(-2)）、生物炭（8000 kg·hm~(-2))3个添加处理，测定了土壤微生物量碳、氮、磷（MBC、MBN、MBP）含量，分析了细菌群落多样性和组成，以期为该区域土壤配肥和改良提供科学的理论依据.结果表明：与对照相比，秸秆施用下土壤MBC含量显著降低了16.85%(p<0.05），而生物炭施用下土壤MBC、MBN、MBP含量分别显著增加了23.17%、329.15%和40.09%(p<0.05）.其次，秸秆处理对细菌群落多样性无显著影响，而生物炭的施用显著提高了细菌群落多样性（p<0.05）.再之，施用生物炭促进了植物生长有益菌，如芽孢杆菌纲、α-变形菌纲、γ-变形菌纲、黏球菌纲的相对丰度.冗余分析（RDA）结果表明，土壤磷含量是影响茉莉园土壤细菌群落结构组成的关键因素.此外，PICRUSt功能预测分析显示，秸秆处理下“翻译、核糖体结构和生物发生”、“细胞壁/膜/包膜生物发生”等功能基因丰度值较对照组分别显著提高了16.52%、16.86%，生物炭处理下“细胞骨架”功能基因丰度值较对照组显著提高了40.71%(p<0.05).
关键词： 秸秆 生物炭 土壤微生物量 细菌 PICRUSt功能预测
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茶树品种'金牡丹'自然杂交后代遗传鉴定
《热带亚热带植物学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为了对‘金牡丹’茶树自然杂交后代进行遗传鉴定，利用EST-SSR毛细管电泳荧光标记技术对65个金牡丹自然杂交后代进行研究。结果表明，28对SSR标记共扩增出192个等位片段，平均等位基因数（Na）、平均观测杂合度（Ho）及遗传多态信息量（PIC）分别为6.86、0.540、0.532。单亲基因型已知时的累积排除概率为0.999，说明选择的28对SSR标记位点具有高度的多态性和较高的排除概率，适用于遗传分析和个体的亲子鉴定。15个‘金牡丹’自然杂交后代的遗传鉴定结果表明，MD44、JMD45、JMD47、JMD32为早生绿茶类型；JMD51、JMD53为闽北肉桂乌龙茶类型；MD2、JMD56为闽南‘铁观音’乌龙茶类型；JMD24、JMD26、JMD29、JMD55、JMD59、JMD27、JMD61为‘黄棪’乌龙茶类型。
关键词： 茶树 自然杂交 EST-SSR 遗传鉴定 模拟分析
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GnIH基因克隆、表达及对幼龄公兔生殖激素的影响
《畜牧兽医学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：旨在获得兔促性腺激素抑制素（gonadotropin-inhibitory hormone,GnIH）基因，检测其在不同组织和不同发育阶段下丘脑中的表达水平，研究其对幼龄公兔生殖激素分泌的影响。本研究以90日龄健康闽西南黑兔公兔为研究对象，采用RACE技术（rapid-amplification of cDNA ends）从下丘脑组织中克隆出GnIH基因，并对序列进行生物信息学分析；采用实时荧光定量PCR方法（real-time quantitative PCR,qPCR）检测GnIH基因mRNA在90日龄公兔不同组织表达水平（n=5）及11、30、60、90、120、150日龄公兔下丘脑中的表达水平（n=6）;连续10 d向80日龄公兔分别注射0、0.5、5和50μg鹌鹑GnIH相关肽（n=10）。第11天早上采集耳静脉血液后，屠宰公兔，采集睾丸组织，分别检测血清中生殖激素浓度（GnRH、FSH、LH、INHB和T）和睾丸组织中睾酮合成相关酶基因（StarR、3β-HSD和p450scc）mRNA的表达水平。结果表明，兔GnIH基因cDNA全长904 bp,包含5′UTR 41 bp, CDS区606 bp, 3′UTR 227 bp,编码201个氨基酸。该基因在90日龄公兔大部分组织中均有表达，其中在下丘脑中表达最高（P＜0.001）;在11到150日龄公兔下丘脑中，90日龄的表达量最低（P＜0.01）,90日龄后随着日龄增长其表达量极显著增加（P＜0.001）。注射GnIH后，50μg剂量组幼龄公兔的血清睾酮浓度极显著低于对照组和0.5μg剂量组（P＜0.001）,5μg剂量组睾酮浓度显著低于对照组和0.5μg剂量组（P＜0.05）,50μg剂量组的LH浓度显著高于对照组（P＜0.05）;此外，5μg组的p450scc mRNA表达量极显著高于其他处理组（P＜0.001）,而其他组睾酮合成相关酶基因表达量则差异不显著（P＞0.05）。结果提示，GnIH基因可能与LH和睾酮的分泌与合成有关，并参与公兔的生殖发育调控，长期注射高剂量GnIH相关肽会导致公兔对药物不敏感，其具体调控机制还需后续研究。
关键词： GnIH 闽西南黑兔 基因克隆 基因表达 生殖激素
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兔源强毒力金黄色葡萄球菌荧光定量PCR检测方法的建立
《中国兽医学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为了建立一种快速、特异性强且敏感性高的兔源强毒力金黄色葡萄球菌检测方法，本试验根据金黄色葡萄球菌pvl基因的保守序列设计了特异性的引物和探针，通过反应条件的优化，建立了检测兔源强毒力金黄色葡萄球菌的荧光定量PCR检测方法。结果显示，该方法耗时短，仅需约50 min就能完成检测，较已报道的双重PCR方法和环介导等温扩增方法均省时；该方法特异性强，对兔源低毒力金黄色葡萄球菌、多杀性巴氏杆菌、支气管败血波氏杆菌、肺炎克雷伯菌、魏氏梭菌、大肠杆菌和阴性对照（灭菌ddH2O）均无交叉反应；该方法敏感性高，最低检测限为10拷贝/μL,分别是已报道的双重PCR方法和环介导等温扩增方法的1 000倍和10倍。此外，该方法重复性好，批内和批间重复性试验的变异系数均小于2%。应用该方法检测126份已知结果的临床样品，检测结果与已知结果、已报道的双重PCR方法和环介导等温扩增方法的检测结果完全一致。该方法的建立不仅丰富了兔源强毒力金黄色葡萄球菌的检测方法，也为该菌的快速检测提供了更有力的技术支持。
关键词： 兔 强毒力金黄色葡萄球菌 pvl基因 荧光定量PCR检测方法
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长期施肥对黄泥田土壤团聚体中氮素积累和有机氮组成的影响
《中国农业科学 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【目的】氮是南方黏瘦型中低产田重要的限制因子。研究长期施肥对黄泥田团聚体中氮素累积及有机氮组成的影响，为合理培肥及土壤氮库管理提供依据。【方法】采集黄泥田36年定位试验中不施肥（CK）、单施化肥（NPK）、化肥+牛粪（NPKM）、化肥+全量稻秸还田（NPKS）4种处理耕层土壤，采用湿筛和Bremner有机氮分级方法，分析团聚体氮素累积与有机氮组分含量及分配的变化。【结果】施肥处理＞2 mm团聚体全氮含量较CK显著增加12.7%—51.9%（P＜0.05）;NPKM与NPKS处理＞2 mm团聚体对原土全氮累积贡献率较CK分别显著提高24.7与20.0个百分点（P＜0.05）。施肥处理＞2 mm团聚体酸解性氮与非酸解性氮含量分别较CK增加10.1%—36.3%与20.7%—100.5%，并相应提高两组分对原土全氮累积贡献率，NPKM与NPKS处理增加尤为明显。对于＞2 mm团聚体，施肥处理酸解铵态氮含量较CK显著增加17.2%—40.4%（P＜0.05），以NPKM处理增加最为明显；酸解氨基酸态氮与酸解未知态氮含量分别以NPKS与NPKM处理增加最为明显，分别较CK显著提高24.0%与52.1%（P＜0.05）。＞2 mm与0.25—2 mm团聚体的非酸解性氮及酸解铵态氮与相应粒级团聚体中的碱解氮含量呈显著正相关（P＜0.05）。配合稻秸还田较配施牛粪更有利于＞2 mm团聚体非酸解性氮的累积。配施牛粪对提高＞2 mm团聚体酸解铵态氮、酸解未知态氮含量与对原土全氮累积贡献率最为明显，配合稻秸还田则对提高酸解氨基酸态氮含量及对原土全氮累积贡献最为明显。冗余分析表明，水稻氮吸收量受＞2 mm与0.25—2 mm团聚体非酸解性氮组分影响较大，NPKM和NPKS处理水稻氮吸收量受土壤有机氮组分影响高于NPK与CK处理。【结论】长期施肥增加了黄泥田耕层土壤＞2 mm团聚体全氮含量及对原土全氮累积贡献率，有机无机肥配施尤为明显。＞2 mm团聚体中非酸解性氮、酸解性氮及酸解铵态氮含量与该团聚体中碱解氮含量以及水稻氮吸收量关系密切，是重要的有效氮库。
关键词： 长期施肥 有机氮组分 土壤团聚体 黄泥田 化肥 有机肥
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拮抗酵母菌的筛选鉴定、生物学特性及其对葡萄灰霉病菌的抑菌活性研究
《中国生物防治学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：本研究以葡萄灰霉病菌Botrytis cinerea为靶标菌，筛选获得2株拮抗酵母菌G17515和G31887，经形态学和分子生物学方法分别鉴定为Starmerella bacillaris和Meyerozyma caribbica（卡利比克迈耶氏酵母）。菌株G17515和G31887的培养温度为20℃～30℃（最佳培养温度为30℃），pH值为p H5.0～7.0（最佳pH 6.0）,NaCl浓度为0.1%～5%（最佳Na Cl浓度为0.1%）。酵母菌G17515和G31887发酵液可以明显抑制葡萄灰霉病菌丝的生长，其抑制率分别为80.86%和69.05%，并且导致菌丝和孢子形态发生异常。离体接种试验结果表明，这2株酵母菌可显著抑制葡萄灰霉病菌斑的扩展，对葡萄叶片灰霉病抑制率分别为64.21%和57.22%，对果实灰霉病的生防效果分别为48.56%和77.13%。综上所述，S.bacillarisG17515和M. caribbica G31887对葡萄灰霉病具有显著的抑制效果，有望作为防治葡萄灰霉病的菌株资源。
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