科研产出
用Cre/LoxP和CRISPR基因工程技术构建猪肌肉生长抑制素双等位基因敲除细胞系
《中国生物化学与分子生物学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：肌肉生长抑制素(myostatin,Mstn)基因失活可引起哺乳动物的肌肉增生,但其调控机制尚不清楚,且缺乏可靠的试验材料验证Mstn相关分子通路的变化。本研究所用PK3108细胞系是在野生型PK15细胞系的基础上成功靶向敲除一条等位基因,在其靶位点敲入标记基因,敲除了204bp的外显子3序列,LoxP锚定在其标记基因两侧。利用Cre/LoxP重组酶删除系统删除插入PK3108Mstn靶位点的标记,借助流式细胞仪和荧光蛋白甄别得到无标记的过渡型细胞系PK3108-2。将Cas9/sgRNA表达载体和供体DNA共转染PK3108-2,借助G418抗性筛选和倒置荧光显微镜挑选出仅带阳性标记的克隆L18,对其基因组进行PCR产物凝胶电泳与PCR产物测序,证明克隆L18在预设位点发生同源重组;对其蛋白质进行Western印迹实验表明,Mstn被成功地敲除失活。综上结果证明,本研究实现了双等位基因的精准敲除,构建了Mstn双敲除梯度回复表达细胞系。本研究为揭示Mstn的作用机制提供理想的实验材料,也为双等位基因的敲除提供了可借鉴的技术路线。
乌骨山羊体尺体重性状的相关及回归分析
《中国草食动物科学 》 2017
摘要：为乌骨山羊品种选择和育种提供理论依据,利用SPSS软件对64只乌骨山羊成年母羊体尺体重性状进行相关分析,并采用逐步回归法,建立最优回归方程。结果表明:乌骨山羊体高(X_1)、体长(X_2)、胸围(X_3)、管围(X_4)与体重(Y)均呈极显著正相关(P<0.01),胸围、体长及体高的直接作用和间接作用对体重影响极大(P<0.01);乌骨山羊体尺指标(Xi)对体重(Y)的最优回归方程为Y=-69.923 19+0.326 27X_1+0.138 46X_2+0.961 72X_3。
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蛋鸭极低密度脂蛋白受体基因多态性与蛋品质相关性分析
《中国家禽 》 2017 北大核心
摘要：极低密度脂蛋白受体基因(VLDLR)在卵生动物蛋黄物质形成过程起关键作用。研究以国绍Ⅰ号母鸭为研究对象,采用一代测序法对VLDLR基因外显子12至外显子13区域进行SNPs筛选,并分析各多态位点间的连锁不平衡状态及不同基因型与蛋品质的相关性。结果显示:共发现4个多态位点,其中S1(A7120G)位于12号外显子,未引起氨基酸序列改变;S2(A7261G)位于12号内含子;S3(C7325T)和S4(A7337G)位于13号外显子中,分别导致Thr突变为Met,Asn突变为Asp。位点S1、S2和S4为强连锁不平衡位点,存在3种单倍型和3种双倍型,单一位点基因型和双倍型与蛋黄比例、蛋重、蛋黄重、蛋壳重和蛋黄颜色的相关性分析结果均为不显著相关,在国绍Ⅰ号VLDLR基因外显子12-外显子13区域内未发现与蛋黄比例等蛋品质相关的分子标记SNPs位点。
关键词： 极低密度脂蛋白受体基因(VLDLR) 蛋鸭 核苷酸多态性(SNP) 蛋品质
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湖北省小麦全程机械化生产技术
《湖北农业科学 》 2017
摘要：小麦(Triticum aestivum L.)生产全程机械化是实现湖北省小麦优质高产高效目标的重要技术手段。从小麦生产的种子要求、耕作整地、播种、田间管理及收获等方面介绍了湖北省小麦全程机械化生产技术的主要内容,以期为湖北省及相似地区小麦生产提供理论依据。
关键词： 小麦(Triticum aestivum L.) 全程机械化 湖北省
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稻虾共作模式对稻田杂草的控制效果及其经济效益
《湖北农业科学 》 2017
摘要：为明确稻虾共作在稻田的应用效果及经济效益,研究了不同稻虾共作模式对稻田杂草的控制作用。结果表明,稻虾共作对田间主要杂草稗(Echinochloa crusgalli)、异型莎草(Cyperus difformis)、鸭舌草(Monochoria vaginalis)、陌上菜(Lindernia procumbens)及水苋菜(Ammannia baccifera)均具有良好的控制作用,防效可达85%以上,总体效果与化学除草处理36%苄嘧磺隆·二氯喹啉酸WP270 g(a.i)/hm~2相当。实施稻虾共作的稻田净收益为68 967.3~88 813.8元/hm~2,显著优于化学除草处理,较其收益增加4.7~6.3倍。
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