科研产出
转Fat-1基因猪的制备和整合检测
《基因组学与应用生物学 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：为了在转基因猪肌肉中高效率表达Fat-1基因,且进一步得到富含ω-3 PUFAs猪品系建立技术基础。将化学合成的人源化Fat-1基因克隆到表达载体上,构建能够在猪细胞中高效表达的质粒构件p MSTN-ω3,使用胚胎原核显微注射方法制备转h Fat-1基因猪。试验对16头供体母猪超数排卵,人工授精配种后手术法冲取320枚1~2细胞期猪胚胎。原核显微注射法向胚胎导入线性化质粒p MSTN-ω3,302枚1~2细胞期胚胎显微注射后移植10头受体母猪,5头母猪妊娠,生产26头仔猪。PCR法检测得到4头转h Fat-1基因阳性猪,Southern印迹杂交分析验证1头猪整合有h Fat-1基因,1头猪近似整合h Fat-1基因。有1头h Fat-1基因整合猪可用于转基因猪育种,表达构件p MSTN-ω3能够用于生产转Fat-1基因猪。试验成功采用显微注射法制备转h Fat-1基因猪,改进、规范了胚胎原核显微注射法制备转基因猪的试验操作程序。
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LPS诱导的肉鸡肺脏损伤中AQP1、AQP5表达变化研究
《黑龙江畜牧兽医 》 2017 北大核心
摘要：为了研究和探讨肺脏损伤肉鸡肺脏中的水转运机制,对防治肉鸡肺脏损伤提供理论基础,试验采用气管滴注LPS(Escherichia coli O_(55):B_5,sigma)的方法诱导肺脏损伤,对15日龄肉鸡肺脏湿干重比(W/D)、病理学改变、AQP1和AQP5的表达变化进行研究。结果表明:LPS组肺脏湿干重比上升;H.E.染色观察肺脏组织可见炎性浸润和水肿;免疫组化结果显示,AQP1主要在正常的呼吸毛细管上皮和血管内皮中表达,AQP5主要在三级支气管上皮细胞中表达;H-Score评分结果显示,AQP1、AQP5的表达量均减少。说明LPS导致肉鸡肺脏损伤,引发肺水肿后肺脏内AQP1、AQP5的表达量下降,佐证AQP1、AQP5在肉鸡肺脏水转运中有重要作用。
关键词： 脂多糖(LPS) 肉鸡 肺脏损伤 肺水转运 水通道蛋白(AQPs)
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山羊SKIP基因的分离、鉴定及与生长性状的关联分析
《华中农业大学学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：为研究SKIP基因对山羊生长发育的影响,并寻找与山羊生长性状相关的分子标记,利用绵羊与牛SKIP基因的同源序列设计引物,RT-PCR扩增得到一段长1 350bp的山羊SKIP基因表达序列,包括其完整编码区序列,编码449个氨基酸的蛋白。通过序列Blast比较和系统发育树的构建,发现山羊SKIP与绵羊SKIP序列相似性最高(99.52%)。利用生物信息学分析SKIP蛋白的理化性质,预测SKIP蛋白分子质量为52ku,等电点为5.18,包含典型的疏水区域和磷脂酰肌醇5-磷酸磷酸酶结构域,定位在细胞质(60.9%)和细胞核(26.1%)中。间接免疫荧光试验验证了SKIP的细胞定位,并发现位于细胞核中的SKIP在成肌细胞分化过程中转移到细胞质。通过波尔山羊和麻城黑山羊的DNA混池测序,发现SKIP内含子2有一处G/A突变,利用PCRRFLP方法对波尔×麻城黑山羊F2代杂交后代进行基因分型,性状关联分析发现该单核苷酸多态性位点(SNP)与出生体质量、胸围、管围、身高等性状显著相关,等位基因G与生长呈正相关。
关键词： 单核苷酸多态性位点 山羊 骨骼肌和肾脏富集的肌醇磷酸酶 生长性状 成肌分化
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固相萃取-高效液相色谱-荧光法测定方便面和烤肠中的苯并[a]芘
《分析科学学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：建立了固相萃取-高效液相色谱-荧光法检测方便面和烤肠中苯并[a]芘的方法。采用正己烷作为提取溶剂,经苯并[a]芘专用固相萃取柱HiCapt Benzo富集净化,高效液相色谱-荧光法对样品中苯并[a]芘进行分离分析。苯并[a]芘的质量浓度在0.5~20.0μg/kg范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系,相关系数R2为0.9997。方便面和烤肠中苯并[a]芘的加标回收率分别为92.2%~98.3%和95.9%~97.9%,日内和日间相对标准偏差分别为3.34%~5.01%和2.11%~4.07%。与传统方法相比,该方法快速简单、有机溶剂消耗少,在油炸烟熏食品的苯并[a]芘分析中具有较大应用前景。
关键词： 苯并[a]芘 固相萃取 方便面 烤肠 高效液相色谱-荧光法
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酶溶性胶原蛋白肽及其β-环糊精包合物理化性质分析
《中国食品学报 》 2017 EI 北大核心 CSCD
摘要：采用红外扫描、扫描电镜、透射电镜和气质联用仪研究β-环糊精(β-cyclodextrin,β-CD)对酶溶性胶原蛋白肽(Papain soluble collagen peptide,PSCP)的包合作用,腥苦味的遮掩效果及抗氧化成分的保护作用。红外扫描结果显示,PSCP-β-CD包合物在3347 cm~(-1)处产生1个强而宽的吸收峰,说明主客体分子之间形成大量的氢键,PSCP进入β-CD的空腔。电镜结果显示,PSCP及PSCP-β-CD包合物分子分别为直径100~200 nm和400~600 nm的纳米球,后者聚合冻干后表面呈网状结构。与PSCP相比,PSCP-β-CD包合物不仅胺类、醛类等腥味成分下降,其挥发性抗氧化成分——2,4-二叔丁基苯酚也显著降低;此外,PSCP-β-CD包合物超声稳定性上升,抗氧化缓释力增加,对DPPH自由基的清除力上升。结果表明:β-CD可很好地包合PSCP分子,有效改善PSCP的不良口感,并且减少其抗氧化成分的损失。
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26%精恶唑禾草灵·氰氟草酯·五氟磺草胺防除水稻直播田杂草的效果及对产量和水肥的影响
《湖北农业科学 》 2017
摘要：为探究26%精恶唑禾草灵·氰氟草酯·五氟磺草胺可分散油悬浮剂防除水稻直播田杂草的效果及对产量和水肥的影响,进行了田间药效对比试验。结果表明,施用26%精恶唑禾草灵·氰氟草酯·五氟磺草胺可分散油悬浮剂对水稻直播田稗草(Echinochloa crusgalli(L.)Beauv)、千金子(Leptochloa chinensis(L)Nees)、异型莎草(Cyperus difformis L.)、鸭舌草(Monochoria vaginalis(Burm.F.))的防效达89.75%以上。通过测定,施用26%精恶唑禾草灵·氰氟草酯·五氟磺草胺可分散油悬浮剂能有效降低杂草对田间氮、磷、钾和水分的吸收,有效改善了田间的光照条件。测产结果表明,比CK未施药增产47.11%~54.76%,增产效果显著。
关键词： 水稻直播田 杂草防效 恶唑禾草灵·氰氟草酯·五氟磺草胺 水肥 产量
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不同生长阶段的油菜饲用营养价值评价研究
《饲料工业 》 2017 北大核心
摘要：探索不同生长阶段油菜的营养价值,为油菜的饲用提供数据支撑和参考。以同一品种、不同时期(蕾薹期、初花期、盛花期、结荚初期、结荚后期)采集的油菜以及油菜秸秆作为试验素材,通过常规营养成分的检测分析以及随意干物质采食量(DMI)、体外干物质消化率(IVDMD)、粗饲料分级指数(GI和GI’)的预测,分析油菜的饲用价值。结果表明:(1)随着油菜生长阶段的发展,结合常规营养成分、随意干物质采食量(DMI)、体外干物质消化率(IVDMD)以及粗饲料分级指数(GI)分析,油菜饲用的营养价值呈逐渐下降的趋势;(2)油菜生长的不同阶段饲用价值不一样,通过预测分析,应结合生物产量以及饲喂动物,综合营养指标选择合适的生长阶段进行采收、贮存和饲用。
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超高效液相色谱-柱前衍生法测定葡萄和大白菜中防腐保鲜剂仲丁胺的残留
《农村经济与科技 》 2017
摘要：建立葡萄和大白菜中防腐保鲜剂仲丁胺残留的超高效液相色谱-柱前衍生的检测方法。样品中的仲丁胺经过水蒸气蒸馏分离,2,4-二硝基氟苯(DNFB)衍生,超高效液相色谱检测。结果表明,仲丁胺在0.01~5.00mg/L范围内浓度和响应峰面积线性关系良好,相关系数(r)为0.9997。在0.1、1.0和5.0 mg/kg添加浓度下,平均回收率73.9%~85.5%,相对标准偏差(RSD)为2.0%~9.8%(n=5),仲丁胺在葡萄和大白菜中的定量限(LQD)均为0.005mg/kg。该方法快速、高效、准确度高,适用于葡萄和大白菜中仲丁胺的检测。
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水稻新品种松辽122选育技术报告
《北方水稻 》 2017
摘要：水稻新品种松辽122是公主岭市松辽农业科学研究所于2006年夏以优质基因资源材料"长6-2-1"为母本,以抗逆性强的基因资源材料松辽2130为父本配组,品种间有性杂交,经穿梭育种,系谱法育成。具有熟期适中,株型理想,受光率高,丰产性好,抗逆性强,品质佳,适应性较广等综合性状优良的特点,适于北方稻区早粳晚熟区域种植。
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红地球葡萄健康叶片内生细菌多样性分析
《植物病理学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：本研究利用平板分离方法和变性凝胶梯度电泳(DGGE)技术,分析了北京、成都、合肥、武汉等4个地区的红地球葡萄在开花期、成熟期和衰老期健康叶片中内生细菌的群落结构。平板分离培养结果表明不同地区葡萄叶片中的内生细菌数量在8.0×10~3~2.8×10~4CFU·g~(-1)之间,其中武汉地区最高;不同生长时期葡萄叶片中的内生细菌数量在0.8×10~3~1.5×10~4CFU·g~(-1)之间,其中成熟期数量最大。扩增16S rRNA基因序列鉴定,分离获得的内生细菌属于芽胞杆菌属、泛菌属、短小杆菌属、假单胞菌属和葡萄球菌属,芽胞杆菌属为常见菌群。DGGE分析结果显示,同一地区和同一生长时期的样品间相似性较高;不同地区以成都地区的内生细菌种类最丰富;不同生长时期以成熟期种类最多。对特征条带回收测序,结果显示不可培养细菌和未确认的海洋浮游细菌在葡萄叶片中大量存在。
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