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小鼠精原干细胞冷冻保存

解剖学报 2009 北大核心 CSCD

摘要:目的 探索小鼠精原干细胞(SSCS)冷冻保存方法 以及解冻后体外快速增殖的条件. 方法 实验以6D龄雄性昆明小白鼠为材料,两步酶消化法分离小鼠睾丸生殖细胞,PERCOLL非连续密度梯度离心法富集小鼠精原干细胞,随后加入不同的冷冻液以及采用不同的降温速率冷冻小鼠精原干细胞.以MEMα为基本培养基,加入10%胎牛血清和100μG/L的胶质细胞源性神经营养因子, WST-8比色法分析培养SSCS 复苏后的增殖率,运用碱性磷酸酶细胞化学染色和RT-PCR技术,对培养的SSCS进行鉴定. 结果 冷冻液中添加10%二甲基亚砜、10%胎牛血清、0.07MOL/L蔗糖时,以1℃/MIN程控降温方式冷冻小鼠SSCS,细胞解冻后活率最高,达84%以上;采用非程控降温方式冻存SSCS,尽管细胞解冻后活率相对于程控降温方式略低,但具有方法 简单、易于操作、无需昂贵仪器的优点,复苏后SSCS贴壁时间为8~12H,24H可见细胞分裂,48H细胞出现迅速增殖,96H可见较多含20~25细胞的细胞团,此时精原干细胞增殖近5倍. 结论 本实验所用培养条件,可以使经长期冷冻的SSCS短期快速增殖.

关键词: 冷冻保护剂 降温速率 细胞培养 精原干细胞 小鼠

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新疆海岛棉的丛生芽诱导和茎尖遗传转化的研究

棉花学报 2009 北大核心 CSCD

摘要:以新疆海岛棉新海17号、新海14号、85H为材料,对海岛棉器官发生再生体系和遗传转化进行研究。结果表明:茎尖系统再生能力强,茎尖组培成苗率可达90.5%。在MSB5培养基中,6-BA浓度为0.5 mg.L-1时,芽诱导率最高;但每个外植体的出芽数所需的最佳浓度是1.5 mg.L-1;当浓度为2.0 mg.L-1时,开始有抑制出芽的现象;每个外植体最多能诱导4个芽。用农杆菌介导法转化棉花的茎尖,对侵染的损伤和Kan的耐受能力强,对Kan棉花的茎尖选择压达100 mg.L-1;抗性绿苗率可达88.9%。

关键词: 海岛棉 丛生芽诱导 遗传转化

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抑制素质粒的提取与纯化研究

安徽农业科学 2009 北大核心

摘要:[目的]为抑制素质粒的大量提取与纯化寻找一种成本低的方法。[方法]采用碱裂解法与DEAE-纤维柱层析法提取与纯化抑制素质粒DNA,用分光光度法测定其浓度和纯度。[结果]抑制素质粒DNA的等电点为2.0~2.5,低于大部分蛋白质。pH值为8.0时,抑制素质粒DNA带负电荷,且电荷数量与RNA和蛋白质不同。用紫外分光光度计测定的柱层析后洗脱峰1、2、3在260和280 nm波长处的吸光度值分别为3.01和2.9、0.95和0.51、0.84和0.76,其OD260 nm/OD280 nm分别为1.04、1.86和1.10。3 mol/LNaCl的洗脱峰1大部分是蛋白质,0.6 mol/LNaCl的洗脱峰2是浓度为93.0 ng/ml的抑制素质粒DNA,3 mol/LNaCl的洗脱峰3是杂质。[结论]利用碱裂解法能从大肠杆菌细胞中分离出抑制素质粒DNA,DEAE-纤维柱层析法纯化的抑制素质粒DNA达到了要求的纯度。

关键词: 质粒 提取 纯化 碱裂解法 DEAE-纤维柱层析

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乳清酒发酵剂的优选

乳业科学与技术 2009

摘要:以2株乳酵母菌、地方性奶酒酵母泥、乳酸菌、丹宝利活性酿酒干酵母为发酵菌种,研究其在乳清酒发酵中各发酵剂的发酵能力、发酵特性并对发酵所得乳清酒品质进行了分析,筛选出5#组合菌种(乳酵母菌2,丹宝利活性酿酒干酵母、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌比例为10∶0.1∶1)为本研究最佳试验用发酵菌种。

关键词: 乳清 酵母菌 乳酸菌 发酵

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兵团农机节能的重要性及可行性

新疆农机化 2009

摘要:1农机节能的现状农业是新疆生产建设兵团的主要产业之一。经过50余年的开拓与发展,兵团拥有耕地面积105.02hm~2。2008年末,兵团农业机械总动力319.07万kW,其中柴油动力239.52万kW,占总动力的

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新玉21号密度比较试验报告

新疆农业科技 2009

摘要:0引言新玉21号是新疆农垦科学院作物所育成的高产优质、粮饲兼用中晚熟玉米品种,2005年2月通过新疆自治区品种审定委员会审定命名。为了更好地推广玉米新品种新玉21号,找出其最适宜的种植密度,我们进行了新玉21号密度试验的研究,现将试验情况总结如下。

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鸡传染性法氏囊病综合防治措施

河南畜牧兽医(综合版) 2009

摘要:传染性法氏囊病是由呼肠孤病毒科中的传染性法氏囊病病毒引起的一种危害鸡的烈性、高度接触性传染病,主要损害雏鸡法氏囊。目前该病作为危害养禽业的三大主

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扩展莫尼茨绦虫引发酶蛋白基因的克隆和cDNA序列分析

中国畜牧兽医 2009 北大核心

摘要:分离和鉴定扩展莫尼茨绦虫(Moniezia expansa)新基因,为进一步研究该基因的功能奠定基础。构建扩展莫尼茨绦虫成虫cDNA文库,随机挑取重组阳性克隆进行测序,对部分序列进行引物步移法测序,获取其全长cDNA序列;采用生物信息学等分析技术对该cDNA序列进行开放阅读框(ORF)的寻找、编码氨基酸的推导、核苷酸和氨基酸同源性比较及蛋白质二级结构的初步预测。获得了1个扩展莫尼茨绦虫新基因——引发酶蛋白,全长1269 bp,编码422个氨基酸,属于AE_Prim_S家族。编码蛋白的理论分子质量为47.1598 ku,等电点为4.83。获得了扩展莫尼茨绦虫反应结合蛋白的全长cDNA序列,为该基因功能的试验性鉴定工作奠定基础。

关键词: 扩展莫尼茨绦虫 引发酶 序列分析 表达序列标签

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新疆生产建设兵团棉花学会活动报道

新疆农垦科技 2009

摘要:2008年12月20日,兵团棉花学会在石河子市与新疆惠远农业科技发展有限公司共同举办了《新疆棉花生产和棉种产业化发展论坛》,论坛围绕新疆棉花生产的现状与问题展开讨论,就棉花区划种植和棉种产业化的发展提出了对策。论坛由新疆农垦科学院副院长、兵团棉花学会副理事长李保成研究员主持,新疆农垦科学院棉花所

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影响绵羊繁殖力的基因研究进展

草食家畜 2009

摘要:绵羊繁殖力是一个低遗传力的限性性状,用传统育种手段很难有效提高其遗传进展。随着分子生物学的发展,人们在基因水平上深入研究了影响绵羊繁殖力的主要因素并取得了一定进展,为进一步提高绵羊繁殖力提供了更为有效的技术途径。本文就BMP15、FecB、FecX等在基因水平对影响绵羊繁殖性能加以综述,从而为基因辅助育种提高绵羊繁殖力提供理论参考。

关键词: 绵羊 繁殖力 BMP15 FecB FecX

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