科研产出
鸡新城疫病毒强毒株的分离鉴定及其生物学特性的研究
《中国兽医科学 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：为了探索湖北省黄冈市某鸡场在2016年9月自然发病的大批量鸡死亡的原因,为临床诊断新城疫病毒感染提供病理学依据。采集病死鸡的组织样品,经9日龄SPF鸡胚接种传代分离病毒后,利用HA和HI试验、RT-PCR扩增F基因,对分离株进行鉴定,并通过测定鸡胚最小致死剂量的平均死亡时间、1日龄雏鸡脑内接种指数及组织病理学观察评估分离株的毒力和致病性。结果,从送检的病死鸡中分离到1株NDV,命名为Chicken-China-Hubei0901-2016,简称HB0901。HB0901株F基因裂解区域氨基酸序列为112R-RQ-K-R-F117,符合强毒株特征。HB0901株与F17株同处于基因Ⅶ型分支上,其核苷酸序列同源性高达99.4%。该分离株的MDT和ICPI分别为47.8 h和1.96。显微镜下可见新城疫典型的组织病理学变化。结果表明,基因Ⅶ型新城疫毒株是导致该批鸡大量发病死亡的原因。
关键词： 新城疫病毒 分离鉴定 致病性 基因Ⅶ型 病理学观察
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基于文献计量学的小麦条锈病研究态势分析
《湖北农业科学 》 2017
摘要：采用文献计量学方法,基于Web of Science(WOS)平台的SCI-E和CNKI数据库中小麦(Triticum aestivum L.)条锈病相关研究的文献数据,从文献年代分布、文献学科分布、主要刊文期刊、核心作者、主要研究机构和高引论文等方面着手分析,并结合信息可视化软件CitespaceⅢ绘制小麦条锈病研究领域的知识图谱,分析和总结其发展趋势与研究热点。WOS数据库中,小麦条锈病研究文献近年来呈现快速上升趋势,其中,发文量前5位的国家为中国、美国、澳大利亚、墨西哥和加拿大,发文量占比均超过5%,中美两国发文量则分别超过30%,远高于其他国家和地区;在发文量前5位的机构中,华盛顿州立大学发文量位居榜首,其次为西北农林科技大学、悉尼大学、中国农业科学院和墨西哥国际玉米与小麦改良中心。发文学科主要分布在植物科学、农学、遗传、生物技术与应用微生物学,以及生化与分子生物学等领域。发文量前10位的期刊累计发文量高达47.809%,其中植物病理学(11.264%)、理论与应用遗传学(9.286%)和荷兰植物育种杂志(7.653%)发文量遥遥领先。从CNKI数据库看,西北农林科技大学和中国农业科学院发文数量居绝对主导地位,分别占24.786%和13.579%,而发文量前10名的期刊则囊括了47.659%的发文量,发文量最高的为《麦类作物学报》,占总发文量的9.031%。在小麦条锈病领域研究中,无论发表论文绝对数量,还是排名靠前的核心作者占比、核心机构占比和近期高突现度论文占比等方面,中国和美国都居于主导地位。小麦条锈病研究在分子标记和品种IR34两大聚类发表论文最多,研究持续时间最长;最近的热点则体现在尖端坏死、序列分析和生物防控3个方面。
关键词： 小麦(Triticum aestivum L.) 条锈病 文献计量分析 Web of Science CNKI Citespace Ⅲ
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甘薯根腐病病原菌rDNA-ITS区序列分析
《湖北农业科学 》 2017
摘要：2011年以来,从湖北省甘薯[Dioscorea esculenta(Lour.)Burkill]主产区采集了根腐病典型植株,分离得到引起甘薯根腐病的病原菌[茄病镰孢甘薯专化型病菌(Fusarium solani Mart.Sacc.f.sp.batatas Mc Clure,简称VSB)],并对分离得到的甘薯茄病镰孢甘薯专化型病菌核糖体基因转录间隔区进行测序分析,测序结果显示目的片段长度为526 bp。
关键词： 甘薯[Dioscorea esculenta(Lour.)Burkill] 根腐病 病原菌 ITS 序列分析
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水稻抗稻瘟病基因Pize(t)的定位与遗传分析
《分子植物育种 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：本研究前期在对205份水稻种质资源稻瘟病抗性鉴定中筛选到一份对稻瘟病达免疫级别的水稻品种"石梅抗",利用该抗原材料开展了两个方面的研究工作:(1)与现有栽培稻骨干亲本杂交后自交获得F2分离群体,通过病圃自然诱发抗性鉴定及表型筛选创造高抗稻瘟病种质资源。目前已经获得一百多份高抗稻瘟病、综合性状优异的中间材料并正在进行测配选育新的杂交稻组合;(2)利用集群分离分析法(bulked segregant analysis,BSA)和隐性群体分析法(recessive-class analysis,RCA)对抗源稻瘟病抗性基因分析,最终将抗性基因定位在水稻6号染色体AP22和SRM24之间,对应日本晴基因组片段1 080 kb,并将该基因暂时命名为Pize(t)。
关键词： 水稻 抗稻瘟病基因 集群分离分析法 隐性群体分析法
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转Fat-1基因猪的制备和整合检测
《基因组学与应用生物学 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：为了在转基因猪肌肉中高效率表达Fat-1基因,且进一步得到富含ω-3 PUFAs猪品系建立技术基础。将化学合成的人源化Fat-1基因克隆到表达载体上,构建能够在猪细胞中高效表达的质粒构件p MSTN-ω3,使用胚胎原核显微注射方法制备转h Fat-1基因猪。试验对16头供体母猪超数排卵,人工授精配种后手术法冲取320枚1~2细胞期猪胚胎。原核显微注射法向胚胎导入线性化质粒p MSTN-ω3,302枚1~2细胞期胚胎显微注射后移植10头受体母猪,5头母猪妊娠,生产26头仔猪。PCR法检测得到4头转h Fat-1基因阳性猪,Southern印迹杂交分析验证1头猪整合有h Fat-1基因,1头猪近似整合h Fat-1基因。有1头h Fat-1基因整合猪可用于转基因猪育种,表达构件p MSTN-ω3能够用于生产转Fat-1基因猪。试验成功采用显微注射法制备转h Fat-1基因猪,改进、规范了胚胎原核显微注射法制备转基因猪的试验操作程序。
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LPS诱导的肉鸡肺脏损伤中AQP1、AQP5表达变化研究
《黑龙江畜牧兽医 》 2017 北大核心
摘要：为了研究和探讨肺脏损伤肉鸡肺脏中的水转运机制,对防治肉鸡肺脏损伤提供理论基础,试验采用气管滴注LPS(Escherichia coli O_(55):B_5,sigma)的方法诱导肺脏损伤,对15日龄肉鸡肺脏湿干重比(W/D)、病理学改变、AQP1和AQP5的表达变化进行研究。结果表明:LPS组肺脏湿干重比上升;H.E.染色观察肺脏组织可见炎性浸润和水肿;免疫组化结果显示,AQP1主要在正常的呼吸毛细管上皮和血管内皮中表达,AQP5主要在三级支气管上皮细胞中表达;H-Score评分结果显示,AQP1、AQP5的表达量均减少。说明LPS导致肉鸡肺脏损伤,引发肺水肿后肺脏内AQP1、AQP5的表达量下降,佐证AQP1、AQP5在肉鸡肺脏水转运中有重要作用。
关键词： 脂多糖(LPS) 肉鸡 肺脏损伤 肺水转运 水通道蛋白(AQPs)
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山羊SKIP基因的分离、鉴定及与生长性状的关联分析
《华中农业大学学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：为研究SKIP基因对山羊生长发育的影响,并寻找与山羊生长性状相关的分子标记,利用绵羊与牛SKIP基因的同源序列设计引物,RT-PCR扩增得到一段长1 350bp的山羊SKIP基因表达序列,包括其完整编码区序列,编码449个氨基酸的蛋白。通过序列Blast比较和系统发育树的构建,发现山羊SKIP与绵羊SKIP序列相似性最高(99.52%)。利用生物信息学分析SKIP蛋白的理化性质,预测SKIP蛋白分子质量为52ku,等电点为5.18,包含典型的疏水区域和磷脂酰肌醇5-磷酸磷酸酶结构域,定位在细胞质(60.9%)和细胞核(26.1%)中。间接免疫荧光试验验证了SKIP的细胞定位,并发现位于细胞核中的SKIP在成肌细胞分化过程中转移到细胞质。通过波尔山羊和麻城黑山羊的DNA混池测序,发现SKIP内含子2有一处G/A突变,利用PCRRFLP方法对波尔×麻城黑山羊F2代杂交后代进行基因分型,性状关联分析发现该单核苷酸多态性位点(SNP)与出生体质量、胸围、管围、身高等性状显著相关,等位基因G与生长呈正相关。
关键词： 单核苷酸多态性位点 山羊 骨骼肌和肾脏富集的肌醇磷酸酶 生长性状 成肌分化
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固相萃取-高效液相色谱-荧光法测定方便面和烤肠中的苯并[a]芘
《分析科学学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：建立了固相萃取-高效液相色谱-荧光法检测方便面和烤肠中苯并[a]芘的方法。采用正己烷作为提取溶剂,经苯并[a]芘专用固相萃取柱HiCapt Benzo富集净化,高效液相色谱-荧光法对样品中苯并[a]芘进行分离分析。苯并[a]芘的质量浓度在0.5~20.0μg/kg范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系,相关系数R2为0.9997。方便面和烤肠中苯并[a]芘的加标回收率分别为92.2%~98.3%和95.9%~97.9%,日内和日间相对标准偏差分别为3.34%~5.01%和2.11%~4.07%。与传统方法相比,该方法快速简单、有机溶剂消耗少,在油炸烟熏食品的苯并[a]芘分析中具有较大应用前景。
关键词： 苯并[a]芘 固相萃取 方便面 烤肠 高效液相色谱-荧光法
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