科研产出
巴西蘑菇菌丝体中抗肿瘤活性物质提取工艺的比较
《湖北农业科学 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：以产物得率、纯度和抗肿瘤活性为指标,对巴西蘑菇深层发酵所得菌丝体的先水后醇提取工艺和先醇后水提取工艺进行了比较。结果表明,先水后醇提取工艺所得粗多糖(P1,多糖纯度29.34%)和醇提物(AE1,麦角甾醇纯度5.67%)得率分别为7.62%和7.41%,P1和AE1对S180肉瘤小鼠体内瘤重抑制率分别为50.36%和56.83%;先醇后水提取工艺所得粗多糖(P2,纯度38.62%)和醇提物(AE2,麦角甾醇纯度4.18%)得率分别为5.68%和22.42%,P2和AE2对S180肉瘤小鼠体内瘤重抑制率分别为54.75%和54.34%。先醇后水提取工艺能使菌丝体中28.10%的部分得到利用(5.68%粗多糖加22.42%醇提物),而先水后醇提取工艺仅能利用其中15.03%(7.62%粗多糖加7.41%醇提物);且两种工艺所获粗多糖或醇提物的抑瘤活性差异不大(P>0.05),因此先醇后水提取工艺有更大的优势。
关键词： 巴西蘑菇 菌丝体 提取工艺 粗多糖 醇提物 得率 抑瘤率
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糯玉米DNA提取方法的优化及SSAP方法的建立
《西北农业学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：在综合现有DNA提取方法和试验材料本身性质的基础上,对糯玉米基因组DNA提取方法进行了优化和改进,筛选出一种适合于糯玉米特异序列扩增多态性(sequence-specific amplification polymorphisms,SSAP)分析的高纯度DNA提取方法。所得DNA的A260/280在1.8~2.0间,A260/230大于2.0,琼脂糖凝胶电泳检测结果也证明该方法获得的DNA完整、无降解现象。通过对不同酶切组合、引物组合等因素的对比试验,初步建立了适用于糯玉米SSAP分析的方法体系,得到了一组条带清晰和多态性丰富的图谱。
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高效毛细管电泳法测定牛奶和奶粉中残留的三聚氰胺
《色谱 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：建立了牛奶和奶粉中三聚氰胺的高效毛细管电泳-二极管阵列检测器(HPCE-DAD)检测方法。使用长度58.5cm、内径75μm的毛细管柱,分离电压25kV,进样量3.5kPa(35mbar)×8s,分离温度25℃,缓冲溶液20mmol/L柠檬酸-40mmol/L磷酸氢二钠(pH2.6),检测波长232nm。分析物在1～100mg/L范围内线性良好,r2>0.997;牛奶和奶粉的定量限分别为0.5mg/kg和1.0mg/kg。在添加水平为定量限浓度至50mg/kg时的回收率为72.2%～97.3%,相对标准偏差为2.1%～3.9%。
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甘蓝型油菜中一类AP2/ERF转录因子的克隆和生物信息学分析
《中国生物工程杂志 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：AP2/ERF转录因子家族是植物中广泛存在的一类转录因子,AP2/ERF这类转录因子主要参与植物的细胞周期、生长发育以及生物和非生物胁迫相关基因的表达调控。由于拟南芥和油菜同属于芸薹属,具有相似的基因信息,利用油菜UniGene数据库,以拟南芥ERF转录因子保守序列为探针,通过电子克隆从一个UniGene C luster中分离得到三个同类的AP2/ERF转录因子,从cDNA序列、氨基酸序列的相似性、组成成分、理化性质、疏水性/亲水性分析、序列比对、进化树、功能域、二级结构、三级结构、无序化特性进行了预测和较为全面的分析。结果显示油菜来源的BnaERF1、BnaERF2和BnaERF3属于AP2/ERF转录因子的B-2亚族,是亲水性蛋白,在蛋白质的三级结构上与AtERF1相似。蛋白质无序化分析发现,油菜BnaERF1、BnaERF2和BnaERF3无序化程度小于拟南芥AtERF1。设计引物通过PCR和RT-PCR方法分别从甘蓝型双低油菜沪油15幼苗的DNA和cDNA中扩增了上述基因,初步分析BnaERF2没有内含子,BnaERF1和BnaERF3有内含子。另外,通过EST丰度分析显示,该类转录因子的表达最高峰在种子中,其次为花,在芽、茎和分生组织中没有检测出表达的存在。
关键词： AP2/ERF 转录因子 克隆 生物信息学 甘蓝型油菜 沪油15
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多重RT-PCR检测猪流感病毒及血清亚型
《中国兽医学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：根据GenBank登录的猪流感病毒各血清亚型NP基因,H1、H3亚型HA基因,N1、N2亚型NA基因核苷酸序列,经DNAstar软件类比选择保守区设计引物,sPCR筛选出引物对,用于扩增猪流感病毒NP基因、血凝素H1/H3亚型、神经氨酸酶N1/N2亚型基因片段。根据NP、H1N1、H3N2亚型引物扩增片段大小和反应条件的差异,将各引物配比组合,形成引物组合,建立多重RT-PCR体系。经对不同亚型模板的扩增、检验,建立的2个多重RT-PCR体系可用于猪流感病毒及H1/H3血凝素亚型、N1/N2神经氨酸酶亚型的快速鉴别、诊断。特异性试验检测多重RT-PCR不能扩增其他猪病毒核酸,核酸的最低检测量达0.2ng。采集临床具有呼吸道症状的猪肺、鼻腔棉试子等85份,与鸡胚分离及血凝/血凝抑制试验比较,阴性样品检测符合率达100%。
关键词： 猪流感病毒 血凝素亚型 神经氨酸酶亚型 多重RT-PCR
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夏季高温对大白菜不同发育期生化特性的影响研究
《上海农业学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：研究了大白菜在夏季高温下不同发育期的脯氨酸、可溶性蛋白质、丙二醛含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性的变化。结果表明:不同品种(组合)大白菜脯氨酸含量在苗期大于其他时期,对高温较敏感;可溶性蛋白质和丙二醛含量以及CAT活性均出现"高-低-高"的变化趋势,并且CAT活性在耐热性品种(组合)与热敏性品种间差异达到显著水平;SOD活性出现下降的趋势,而POD的活性则出现逐渐升高的趋势,且耐热组合与早熟5号差异显著。说明各物质含量及酶活性的变化可能与大白菜耐热性的生化机理有关。
关键词： 大白菜 夏季高温 脯氨酸 可溶性蛋白质 丙二醛 酶活性
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