猪体细胞克隆研究进展

张德福; 吴华莉; 刘东; 陈学进; 陈莹; 王凯; 《上海农业学报 》 2007 CSCD

摘要：综述了用核移植方法生产体细胞克隆猪的技术关键和难点及应用情况,并对提高猪体细胞核移植效率的策略进行了分析。

关键词： 核移植 克隆 转基因 猪

 全文链接 请求原文

口蹄疫病毒结构蛋白基因vp1的表达与应用研究

邢继兰; 潘洁; 陈波; 饶忠; 尤永进; 徐泉兴; 刘惠莉; 《中国预防兽医学报 》 2007 北大核心 CSCD

摘要：体外克隆口蹄疫病毒vp1基因,构建重组表达载体pET28a-vp1。将此重组质粒转化到受体菌BL21(DE3)中,进行诱导表达,SDS-PAGE和蛋白质印迹分析表明,诱导5h后表达量达到最高,表达产物大小约为33Ku～40Ku,表达蛋白能与口蹄疫病毒阳性血清产生特异性免疫反应。经HPLC纯化后,以重组蛋白为抗原,建立检测VP1蛋白抗体的ELISA方法,检测猪牛血清样品,免疫抗体检测结果与口蹄疫液相阻断ELISA检测结果呈正相关,能反映出免疫抗体动态变化,对临床样品口蹄疫病毒血清抗体检测,两种方法有一定相关性,但不显著。所以以重组VP1蛋白为检测抗原的ELISA方法有望用于口蹄疫免疫抗体监测。

关键词： 口蹄疫病毒 结构蛋白 vpl基因表达

 全文链接 请求原文

NaCl处理对抗感赤霉病小麦种子发芽和生根的影响

陆瑞菊; 王亦菲; 单丽丽; 周润梅; 黄剑华; 《湖南农业大学学报(自然科学版) 》 2007 北大核心 CSCD

摘要：以NaCl处理后,不同小麦品种的胚根、胚芽生长和发根数的促进、抑制率为指标,研究了抗、感赤霉病品种对不同NaCl预处理及NaCl胁迫的反应.结果表明,抗病品种经0.5%NaCl预处理种子后置于1.5%NaCl培养基上和3.0%NaCl预处理种子后置于1.0%NaCl培养基上的发根数受到明显的促进,感病品种则受到抑制.

 全文链接 请求原文

提高粳稻花药小孢子离体培养反应的研究

陆瑞菊; 孙月芳; 王亦菲; 单丽丽; 黄剑华; 《湖南农业大学学报(自然科学版) 》 2007 北大核心 CSCD

摘要：以大田种植的粳稻品系为供试材料,比较了基因型、离体穗低温预处理和诱导培养基中0.5mg/L2,4-D、2,4,5-T与50g/L蔗糖、麦芽糖配合使用、渗透压以及添加0.5mg/LNAA对粳稻花药培养的影响.结果表明:基因型对培养效果有着重要的影响,敏感性与迟钝型在愈伤组织产量和绿苗数量上有较大的差异;对离体穗进行5℃8d低温预处理培养效果比5℃4d的好;诱导培养基中0.5mg/L2,4,5-T和50g/L蔗糖搭配获得了最佳的培养效果.以05P-27和05P-40为供试材料,培养其游离小孢子,获得了大量胚状体和绿苗.

关键词： 水稻 花药培养 小孢子培养

 全文链接 请求原文

法氏囊活性肽对传染性法氏囊病毒弱毒疫苗的免疫增强效果

杨智满; 姚惠娟; 缪德年; 樊生超; 《上海农业学报 》 2007 CSCD

摘要：将7日龄黄羽肉鸡300只均分为5组,即对照组、常规疫苗剂量配合活性肽组、常规疫苗剂量减半配合活性肽组、生理盐水组和活性肽组。通过间接ELISA测定血清抗体水平及计算法氏囊指数等试验方法,研究活性肽和传染性法氏囊弱毒疫苗联合应用的免疫效果。结果表明:常规免疫剂量配合活性肽组和疫苗剂量减半配合活性肽组的法氏囊指数显著高于对照组,常规免疫剂量配合活性肽组的血清抗体滴度显著高于对照组,而常规剂量减半组与对照组在血清抗体滴度上差异不显著。说明活性肽对传染性法氏囊弱毒疫苗有免疫增强作用,疫苗剂量减半配合法氏囊活性肽应用能达到常规疫苗免疫效果。

关键词： 法氏囊活性肽 法氏囊指数 染性法氏囊弱毒疫苗

 全文链接 请求原文

不同供体细胞及其处理对猪核移植重构胚体外发育的影响

张德福; 刘东; 汤琳琳; 王英; 陈茵; 王凯; 王根林; KARL Schellander; 《遗传 》 2007 北大核心 CSCD

摘要：系统探讨了体细胞的组织来源及培养代数对猪核移植重构胚发育的影响。体外成熟培养40~44h的猪卵母细胞去核后,将经血清饥饿(0.5%FBS)培养2~9天、0.1mg/LAphidicolin(APD)培养+0.5%FBS培养2~9天或一般培养法(10%FBS)培养的卵丘细胞、颗粒细胞、输卵管上皮细胞和耳皮成纤维细胞,直接注射到去核的卵母细胞质中,或注射到卵周隙中,再经电融合(100V/mm,30μs,电脉冲1次)构建重构胚。重构胚以钙离子载体A23817或电脉冲结合6-DMAP激活处理,体外培养6天。耳皮成纤维细胞和颗粒细胞经0.1mg/LAPD+0.5%FBS培养处理后的重组胚卵裂率,均高于血清饥饿和一般培养处理的同种供体细胞(P<0.01)。卵丘细胞、颗粒细胞经0.1mg/LAPD+0.5%FBS处理后进行核移植的分裂率和发育率均高于输卵管上皮细胞和耳皮成纤维细胞(P<0.05)。以猪颗粒细胞为核供体时,电融合法的重构胚分裂率显著高于胞质内注入法(P<0.05),但囊胚发育率无显著差异(P>0.05)。培养3代和6代的猪颗粒细胞以及培养6代和10代的耳皮成纤维细胞,其具有正常二倍染色体的细胞比例均无显著差异(P>0.05);以这2种细胞不同培养代数做供体进行核移植时,各代之间核移胚的体外分裂率、囊胚发育率无显著差异(P>0.05)。这些结果表明:(1)猪耳皮成纤维细胞和颗粒细胞经培养传代所建立起来的细胞系相对比较稳定;(2)0.1mg/LAPD预培养处理供体细胞能提高猪体细胞核移植的效果,血清饥饿培养则无明显效果;(3)猪颗粒细胞和耳皮成纤维细胞等均可做供核细胞,核移植后都能得到体细胞克隆的囊胚,但前者的效果略优于后者,且其核移植效果不受供核细胞培养代数的影响;(4)电融合核移植胚胎的发育率高于胞质内直接注入法,但两者的总体效率相近。

关键词： 猪 体细胞核移植 细胞周期

 全文链接 请求原文

加强甜玉米鲜食期籽粒品质变化研究

沈雪芳; 黄璜; 曹林奎; 楼坚锋; 郑洪建; 张保国; 侯根宝; 王义发; 《上海农业学报 》 2007 CSCD

摘要：研究加强甜玉米和普通玉米2种不同类型玉米鲜食期籽粒品质变化,以明确各品质变化的动态规律。试验采用不同基因型的玉米材料,测定果穗鲜食期可溶性总糖含量、水分含量、蛋白质含量和百粒鲜重,并进行相关分析。结果表明:鲜食期籽粒发育过程中加强甜玉米可溶性总糖含量和积累速度高于普通玉米;水分的下降速度加强甜玉米比普通玉米慢;蛋白质含量加强甜玉米略低于普通玉米,蛋白质的积累与籽粒鲜重的增加过程基本一致;鲜粒重积累速度加强甜玉米低于普通玉米;授粉13 d和授粉28 d加强甜玉米和普通玉米蛋白质含量和鲜粒重都相近。

关键词： 加强甜玉米 鲜食期 籽粒 可溶性总糖含量 水分含量 蛋白质含量 鲜粒重

 全文链接 请求原文

电子束辐照在农产品贮藏保鲜中的应用

李牧; 邢增涛; 冯志勇; 李玉; 《激光生物学报 》 2007 CSCD

摘要：对电子束辐照保鲜机理和特性进行了阐述,并对近年来电子束辐照技术在水果、食用菌、蔬菜、肉类、谷物等农产品保鲜中应用情况进行了评述。与钴源辐照相比,电子束辐照具有杀菌作用强、方便快捷、安全环保等优势,因此该技术在农产品保鲜应用上具有广阔的前景。

关键词： 电子束辐照 农产品 贮藏 保鲜

 全文链接 请求原文

猪耳成纤维细胞的体外培养及EGFP基因的转染

刘伟; 吴华莉; 张德福; 《上海农业学报 》 2007 CSCD

摘要：优化脂质体Liperfectamin 2000转染EGFP(加强型绿色荧光蛋白)至猪耳成纤维细胞的参数,如DNA和脂质体的用量、细胞汇合度、细胞暴露于DNA和脂质体复合物的时间。试验显示:24孔板内1.0μgDNA和2.4μL脂质体的用量转染效率最高,DNA和脂质体过量会对细胞产生毒性,影响转染效率;细胞汇合85%~90%才能得到较高的转染效率;细胞暴露4h转染效率最高,时间过长反而使转染效率下降。

关键词： 猪 耳成纤维细胞 绿色荧光蛋白基因

 全文链接 请求原文

甘蓝抽薹性状基因的分子标记定位

杜辉; 潘俊松; 何欢乐; 薄天岳; 吴爱忠; 蔡润; 《分子植物育种 》 2007 CSCD

摘要：选用耐未熟抽薹性状差异较大的甘蓝亲本材料2002-45和2002-49配制杂交组合,并构建F2分离群体。用60个SRAP引物组合对F2代分离群体进行PCR分析,共筛选到19个有多态性的引物组合,得到91条多态性条带。其中ME7EM2c和ME8EM2d两个标记与抽薹性状较紧密连锁,遗传距离分别为27.5cM和31.7cM。这两个标记可用于甘蓝耐未熟抽薹的分子标记辅助选择育种。

关键词： 甘蓝 抽薹性状 分子标记

 全文链接 请求原文