基于电子微生物生长分析仪快速筛查食品中的活性沙门氏菌

梁若寒; 普小丹; 卢峰; 朱雪婷; 张圆圆; 王笑旸; 杨倩倩; 李昊; 张旭志; 李晨钟; 刘珊; 《分析化学 》 2025 EI SCI 北大核心 CSCD

摘要：由沙门氏菌(Salmonella)引起的食源性疾病对全球公共卫生安全构成巨大威胁.本研究基于电子微生物生长分析仪(EMGA)建立了一种快速筛查蚝油和牛奶中活性Salmonella的方法.将食品样品用RVS肉汤稀释10倍后,装入检测管中,置入EMGA测定细菌的生长动力学曲线和达到最大生长速率所需的时间(Tmgr).以鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium)为例,在5×101~5×106 CFU/mL范围内,活性细菌浓度的对数值与Tmgr呈良好的线性关系,检出限为10 CFU/mL.对于蚝油,线性方程为Tmgr(min)=-80.775lg[C/(CFU/mL)]+754.96(R2=0.9907),细菌的回收率为95.2%~119.8%,相对标准偏差(RSD)为3.5%~16.3%;对于牛奶,线性方程为Tmgr(min)=-71.922lg[C/(CFU/mL)]+618.65(R2=0.9985),细菌的回收率为98.4%~110.6%,RSD为6.4%~12.8%.EMGA法只采用一台便携式仪器,仅需稀释、装管和上机 3 个人工操作步骤.当食品中S.typhimurium的浓度为106 CFU/mL时,测定所需时间少于7h.本方法对实际蚝油和牛奶样品中Salmonella的筛查阳性率结果与平板计数法具有良好的一致性.本方法在准确度、精密度、简便性和检测效率等方面均优于平板计数法,为现场定量筛查蚝油和牛奶的Salmonella污染提供了新手段.

关键词： 食源性病原菌 活性沙门氏菌 筛查 定量快检 电子微生物生长分析仪

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基于模型试验的矩形养殖舱进排水方式优化研究

张琛; 刘晃; 张成林; 姚淳婧; 张帆; 《南方水产科学 》 2025 北大核心 CSCD

摘要：养殖舱作为养殖工船的核心功能单元，进排水方式的优劣对其内部流场环境具有重要影响。为优化养殖舱内流场环境并提升适渔性，以30万吨级养殖工船的矩形养殖舱为原型，采用1∶100的几何缩尺比建立物理模型，并基于粒子图像测速试验技术（Particle Image Velocimetry, PIV）开展了系统的水动力试验研究。通过控制进水流量和进水口数量等关键参数，定量分析了不同进水工况下养殖舱模型内流场结构的演变规律；同时针对不同出水口结构，重点探究了其对舱内涡流场特性的影响机制。结果表明：1)进水流量是养殖舱内流速的主要调节因子，当进水流量从1 800 L·h^-1降至900 L·h^-1时，高流速区面积占比从33.2%减至8.4%，低流速区扩散至舱体65%以上区域，舱内平均流速降幅达52.89%，且进水流量与舱内平均流速呈线性关系；2)相较于改变进水流量，调整进水口数量对养殖舱内流场均匀性的调控效果更显著；随着进水口数量的减少，同一工况下不同深度截面的速度分布均匀性系数（DU50）最大降幅为33.62%，而不同工况下同一截面的DU50最大降幅为39.68%;3)底部出水口数量和位置的改变会显著影响舱内漩涡流场的分布特性，当底部设置4个出水口时可有效避免涡流对舱内水体的影响。

关键词： 矩形养殖舱模型 进水流量 进水口数量 出水口结构 图像测速试验技术

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南极磷虾亮氨酸氨肽酶基因的克隆、异源表达及其酶学性质研究

谭佳豪; 邹华英; 盛军; 王芳; 陈梦瑶; 宋佳; 徐甲坤; 《中国水产科学 》 2025 北大核心 CSCD

摘要：本研究旨在从南极磷虾(Euphausia superba)基因转录组中筛选克隆获得一种亮氨酸氨肽酶基因EsLAP,构建重组表达载体EsLAP-pET-28a,通过共表达分子伴侣在大肠杆菌中实现可溶性表达.采用三因素三水平响应面法对诱导条件进行优化,并对其重组酶酶学性质进行系统表征.EsLAP基因全长 1569 bp,编码 522 个氨基酸,理论分子量为 55302.67 Da,等电点为 6.16.序列与结构分析表明,EsLAP具有M17 家族肽酶的典型肽酶催化结构域及底物特异性结合位点.通过响应面优化确定EsLAP最佳表达条件为:IPTG浓度 0.7 mmol/L、接种量 3%、诱导时间 19 h.酶学性质分析显示,EsLAP最适反应温度为60℃,最适pH为8.5,其中粗酶酶活为265.6 U/mL,比酶活为33.15 U/mg.金属离子Co2+和Mn2+可显著增强其酶活,其中Co2+可使酶活提高至原始水平的 296%.EDTA可以显著抑制其酶活,表明EsLAP是金属蛋白酶.β-mercaptoethanol、NaBH4、DTT等强还原剂显著抑制酶活,可以使剩余酶活降低至 10%以下.底物特异性分析显示,EsLAP对Leu-pNA具有最高的催化效率,进一步验证其为亮氨酸氨肽酶.本研究首次报道南极磷虾来源的亮氨酸氨肽酶的克隆表达及酶学特性,相关结果可作为其在食品与医药工业中用于降解N-端含亮氨酸的功能肽的潜在应用基础.

关键词： 南极磷虾 氨肽酶 异源表达 酶学性质

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罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)高温胁迫下的行为反应及转录组分析

许珊华; 孔天赐; 马笑凯; 金抒豪; 吴慧玲; 易少奎; 杨国梁; 唐琼英; 《海洋与湖沼 》 2025 北大核心 CSCD

摘要：为探究罗氏沼虾高温胁迫下的行为反应和基因表达模式，以罗氏沼虾虾苗为研究对象，设置常温对照组和高温实验组，从29℃以1℃/4 h的速率进行升温，观察虾苗的行为反应，同时采集高温胁迫下不同死亡时间点包括早期死亡(高温敏感组)、死亡一半(高温半死组)和最后死亡(高温耐受组)及对照组每组3个样本进行转录组测序分析。结果显示，在水温30～36℃时，虾苗游动和摄食频率增加，打斗行为增多；37℃时活动减少且停止摄食，死亡率上升；38～39℃时大量死亡，死亡个体肌肉发白松散。12个样本转录组测序共获得79.06 Gb质控后数据，共有11 879个差异表达基因，包括7 105个上调基因和4 774个下调基因；热休克蛋白家族基因(HSPs)显著富集到抗原加工与呈递通路和内质网中蛋白质加工通路，其中hsp70基因家族成员显著上调(P<0.05)，可作为罗氏沼虾遭受胁迫的指示基因，暗示其在罗氏沼虾高温胁迫响应中具有重要的调控作用。推测高温会影响罗氏沼虾的免疫系统及细胞内蛋白质合成，HSPs可能在维持细胞内稳态以及促进胁迫条件下正常生理功能的恢复方面发挥重要作用。研究结果可为进一步探索罗氏沼虾响应高温胁迫的分子机制和抗逆品种的培育提供参考。

关键词： 罗氏沼虾 高温胁迫 基因表达模式 差异表达基因

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虾鱼贝多营养层次养殖池塘浮游微藻群落变化特征

武思雨; 苏浩昌; 曹煜成; 徐煜; 文国樑; 徐武杰; 沈斌; 胡晓娟; 《南方农业学报 》 2025 北大核心 CSCD

摘要：[目的]分析虾鱼贝多营养层次养殖池塘的浮游微藻群落变化特征,为凡纳滨对虾的健康养殖和养殖池塘的水质调控提供理论依据.[方法]选取广东省茂名市主养凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei),混养草鱼(Ctenopha-ryngodon idella)、斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)和缢蛏(Sinonovacula constricta)的多营养层次养殖池塘,在养殖前期、中期、后期分别采集水样和浮游微藻样品,分析养殖过程中水质指标和浮游微藻群落的变化,并对其进行冗余分析(RDA).[结果]随着养殖阶段的推移,池塘水体的氨氮、硝酸盐氮和亚硝酸盐氮等氮营养盐含量整体呈增加趋势.整个养殖过程中,池塘浮游微藻密度为1.65×106~9.34×106 cell/L,浮游微藻总生物量随着养殖阶段的推移呈升高趋势.在不同养殖阶段,共鉴定出浮游微藻8门53属,其中绿藻门(Chlorophyta)有28属,蓝藻门(Cyanophyta)有10属,硅藻门(Bacillariophyta)有6属,蓝藻门的平裂藻属(Merismopedia)、颤藻属(Oscillatoria)等为数量优势属,硅藻门的小环藻属(Cyclotella)、绿藻门的栅藻属(Scenedesmus)、蓝藻门的鱼腥藻属(Anabaena)等为生物量优势属.整个养殖过程中,池塘浮游微藻群落数量多样性指数为1.32~2.83,生物量多样性指数为2.85~3.89.RDA分析结果表明,影响虾鱼贝多营养层次养殖池塘浮游微藻群落的环境因子主要为氮、磷营养盐.[结论]凡纳滨对虾、草鱼、斑点叉尾鮰和缢蛏多营养层次养殖模式可有效控制养殖过程中池塘浮游微藻的增殖,维持浮游微藻群落多样性,有利于养殖水体环境稳定.

关键词： 浮游微藻 池塘环境 群落结构 多营养层次养殖

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中国大水面网箱养殖技术研究进展

魏念; 朱永久; 杨德国; 李学梅; 《南方水产科学 》 2025 北大核心 CSCD

摘要：中国大水面资源禀赋突出，湖泊、水库数量众多且分布广泛，在环境变化、生态服务、水资源安全及流域经济发展等方面发挥着重要作用，大水面网箱养殖在淡水渔业中占据重要地位。中国大水面网箱养殖经历了“粗放扩张—环境治理倒逼退出和调整—技术升级与生态转型”3个阶段。从早期的无序发展导致的环境问题，到近年来在生态文明建设要求下，网箱养殖逐步退出部分水域并进行规范化治理。目前主要养殖技术包括投饵式、不投饵式、多层立体式和集污式4类，分别通过精准投喂、利用天然饵料、多营养级套养及废弃物收集等方式实现生态友好型养殖。文章系统梳理了这4类网箱养殖技术的特点及其应用特征，解析了现存技术的核心问题，如养殖容量与生态适配性矛盾、饲料转化效率低、信息化管理不足等，并提出将不投饵式、多层立体式和集污式养殖作为未来重要发展方向，旨在为行业技术优化与生态管理决策提供科学支撑。

关键词： 大水面网箱养殖 生态承载力 投饵式养殖 集污式养殖 多层立体式养殖

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高糖诱导鲤鱼肝胰脏胰岛素抵抗产生机制及其营养缓解策略研究进展

范泽; 王连生; 《动物营养学报 》 2025 北大核心 CSCD

摘要：鲤鱼在高糖负荷后肝胰脏会产生胰岛素抵抗,已成为限制糖类对于蛋白质节约作用的关键制约因素.关于其产生机制的研究主要集中在胰岛素信号通路等蛋白质编码基因上.目前,针对这一限制因素也已在鲤鱼生长阶段从糖源、糖水平、投喂方式、不同营养物质干预等方面挖掘了一些营养缓解策略.现有的研究缺乏基于细胞层面及表观遗传层面对鲤鱼高糖营养感知机制的认识.亟需进一步阐明鲤鱼糖代谢的生理特点及特殊调控机制,并挖掘出能够缓解鱼类胰岛素抵抗的功能性营养物质或养殖策略.鉴于此,本文从肝胰脏胰岛素抵抗产生机制、营养策略及其缓解肝胰脏胰岛素抵抗的潜在机制和未来研究展望3方面入手,总结该方向的研究进展,丰富对鲤鱼肝胰脏胰岛素抵抗发生调控机制的认识,为提升淀粉等糖类物质的应用,节约鱼粉、豆粕等饲料蛋白质原料奠定坚实理论基础.

关键词： 鲤鱼 胰岛素抵抗 产生机制 营养策略 缓解机制 细胞图谱 表观遗传学

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饲料中添加不同含量小球藻对罗非鱼生长的影响

孙毅; 聂志娟; 胡佳雯; 邵乃麟; 《科学养鱼 》 2025 北大核心

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罗氏沼虾不同养殖模式池塘水体理化因子及浮游植物群落特征

何鉴桥; 孔天赐; 娄浩宇; 许珊华; 张荣飞; 杨国梁; 唐琼英; 《淡水渔业 》 2025 北大核心 CSCD

摘要：为探索罗氏沼虾（Macrobrachium rosenbergii）的生态养殖模式，本研究选择7口罗氏沼虾养殖池塘，其中3口池塘为生态养殖组（S组，种草、混养鲢并加底增氧的低密度养殖）,2口池塘为传统养殖组（C组，无草无底增氧的高密度单养）,2口池塘为生态修复组（D组，实验前三年采用和C组相同的传统养殖模式，实验当年经干塘并生石灰彻底消毒后采用和S组相同的养殖模式）,在罗氏沼虾生长高峰期且易发蓝藻的8-10月期间每周一次采集水样，系统地比较了三种养殖模式对蓝藻群落结构的影响。结果显示：S组和D组的TN、TAN、NO^-₃-N、NO^-₂-N、AP、TP、COD_Mn、Chl-a和SS共9个理化指标均显著低于C组；三组池塘浮游植物共有8门59属，其中占比最多的均为蓝藻门，其相对丰度在C组、D组、S组分别为75.24%、63.94%、55.23%;S组的浮游植物Shannon-Wiener多样性指数和Margalef丰富度指数显著高于C组和D组。冗余分析表明，影响蓝藻丰度的主要理化因子S组是磷酸盐和叶绿素a, C组是水温和磷酸盐，D组是高锰酸盐指数。因此，罗氏沼虾生态养殖模式相较于传统养殖模式，蓝藻丰度和水体富营养化程度更低，浮游植物多样性水平更高，池塘生态系统更稳定；传统养殖模式的池塘经过生态养殖模式改良，水质会有一定改善。

关键词： 罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii) 蓝藻 水体理化因子 冗余分析

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精氨酸对松浦镜鲤幼鱼生长性能、血液指标和肝脏糖代谢的影响

李晋南; 吴迪; 范泽; 王连生; 王常安; 刘红柏; 韩世成; 《动物营养学报 》 2025 北大核心 CSCD

摘要：本试验旨在研究饲料中添加精氨酸(Arg)对松浦镜鲤幼鱼生长性能、血液指标和肝脏糖代谢的影响.选取360尾健康、初始体重为(6.84±0.02)g的松浦镜鲤幼鱼,随机分为5组,每组4个重复,每个重复18尾.5组试验鱼分别饲喂Arg添加水平为0(C0组)、0.6%(C0.6组)、1.2%(C1.2组)、1.8%(C1.8组)和2.4%(C2.4组)的等氮等能饲料.试验期8周.结果表明:1)与C0组相比,各Arg添加组增重率(WGR)均显著提高(P<0.05),饲料系数(FCR)均显著降低(P<0.05);C1.2、C1.8和C2.4组肥满度(CF)显著提高(P<0.05);C1.8和C2.4组蛋白质效率(PER)显著提高(P<0.05).基于WGR的折线回归分析表明,松浦镜鲤幼鱼的最适Arg需要量为饲料干物质的1.85%,饲料蛋白质的5.53%.2)与C0组相比,C1.2、C1.8和C2.4组血清甘油三酯(TG)含量显著降低(P<0.05);C2.4组血清总胆固醇(T-CHO)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量显著降低(P<0.05).3)C2.4组肝脏葡萄糖激酶(GK)和糖原合成酶激酶3β(GSK3β)活性显著高于其他各组(P<0.05),肝脏磷酸果糖激酶(PFK)活性显著低于其他各组(P<0.05).与C0组相比,C1.2和C1.8组肝脏己糖激酶(HK)活性显著提高(P<0.05);C1.8和C2.4组肝脏6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶2(PFKFB2)活性显著提高(P<0.05);C1.2、C1.8和C2.4组肝脏胰岛素受体(IR)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)和葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)含量显著提高(P<0.05);C1.2组肝脏磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)含量显著提高(P<0.05).4)在肝脏葡萄糖转运相关基因中,与C0组相比,C0.6和C1.2组AKT、各Arg添加组蛋白激酶B底物160(AS160)及C0.6、C1.2和C1.8组GLUT2的mRNA相对表达量均显著提高(P<0.05).在肝脏糖酵解相关基因中,与C0组相比,C1.2组PFKFB2、C1.2和C1.8组GK及C0.6、C1.2和C1.8组HK的mRNA相对表达量均显著提高(P<0.05).在肝脏糖异生相关基因中,C1.2、C1.8和C2.4组叉头盒蛋白O1(FOXO1)的mRNA相对表达量显著高于C0和C0.6组(P<0.05);与C0组相比,C2.4组葡萄糖6磷酸酶(G6Pase)及各Arg添加组磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)的mRNA相对表达量均显著降低(P<0.05).在肝脏糖原合成相关基因中,C0.6和C1.2组糖原合成酶(GSase)的mRNA相对表达量显著高于其他各组(P<0.05).综上所述,饲料中添加0.6%~2.4%Arg可提高松浦镜鲤幼鱼的生长性能及促进肝脏糖代谢.

关键词： 松浦镜鲤 精氨酸 生长性能 血液指标 糖代谢

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