科研产出
菲律宾蛤仔幼虫DNA的高效提取及在遗传分析中的应用
《渔业科学进展 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：本研究以菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)的D形幼虫和壳顶幼虫为研究对象，建立快速、高效的单个幼虫基因组DNA提取方法，并成功应用于菲律宾蛤仔的遗传学鉴定和单倍型分析。此方法的原理在于通过物理和化学手段破坏细胞结构，释放DNA，并通过热变性和快速冷却步骤实现DNA的收集。进行实验时，先将分离的单个幼虫转移到PCR管中，加入10μL PCR缓冲液，100℃加热5 min，迅速转移到冰盒中，并加入0.5μL蛋白酶K，并振荡混匀，在PCR仪55℃条件消化60 min,100℃加热10 min后，4℃离心并保存DNA。经超微量紫外可见光分光光度仪检测、琼脂糖凝胶电泳分离和DNA序列比对，评价幼虫DNA的质量。结果显示，以幼虫DNA为模板，设计用于扩增16Sr RNA和COX1基因的引物，扩增获得PCR产物的电泳条带清晰，测序验证准确，表明16Sr RNA和COX1均能对菲律宾蛤仔幼虫进行遗传鉴定和单倍型分析，COX1共获得单倍型14个，单倍型多样性为0.937;16Sr RNA共得到单倍型13个，单倍型多样性为0.705。研究结果证实，该方法可从几百微米大小的贝类幼虫中提取高质量的基因组DNA，为贝类幼虫的物种鉴定和遗传学分析提供了一种准确、高效和可靠的方法，在贝类幼虫生态学和遗传育种领域具有广阔的应用前景。
关键词： 基因组DNA D形幼虫 遗传分析 COX1 16SrRNA 菲律宾蛤仔
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虾青素对赤点石斑鱼肝细胞和肠上皮细胞结构和自噬的影响
《水产学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：[目的]初步探讨虾青素对赤点石斑鱼肝脏肝体指数(HSI)、肝细胞和肠上皮细胞结构和自噬的影响. [方法]开展了饲料中添加不同浓度(0、100、200、400和800 mg/kg)的虾青素饲喂赤点石斑鱼3个月的实验,通过测定和分析赤点石斑鱼HSI变化、采用透射电镜技术(TEM)观察肝脏和肠道的超微结构和自噬水平. [结果]回归分析模型表明,随着虾青素添加量的增加,赤点石斑鱼的肝脏HSI呈现下降趋势,AST800组的HSI相比对照组显著降低.赤点石斑鱼肝脏超微结构显示,与对照组相比,AST800组肝细胞面积显著减小,细胞内自噬小体、自噬溶酶体和线粒体数量显著增加,脂滴数量显著减少,脂滴面积显著减小.在自噬小体内容物中存在小块状脂滴和线粒体,提示发生了脂滴自噬和线粒体自噬.肠道超微结构显示,AST800组肠道黏膜层上皮细胞中相比于对照组自噬小体、自噬溶酶体和线粒体数量显著增加,微绒毛排列更加密集,细胞之间紧密连接结构变长. [结论]饲料中添加虾青素可以诱导赤点石斑鱼细胞自噬,调节细胞脂质代谢,降低HSI,还可以吞噬结构异常的线粒体,抑制氧化应激,以及通过调节细胞紧密连接促进肠道屏障功能,对赤点石斑鱼的生理代谢是有益的.自噬在虾青素调节赤点石斑鱼肝脏脂质、内质网应激和肠道屏障功能过程中具有重要作用,本研究为虾青素诱导自噬调节鱼体脂质代谢和屏障功能提供新的实验依据.
关键词： 赤点石斑鱼 虾青素 肝体指数 肝细胞 肠上皮细胞 自噬 脂质代谢
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风浪作用下并排锚泊渔船垂荡运动分析
《渔业现代化 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为研究港内渔船多船并排艏艉锚泊时各船的垂荡运动情况以及下沉量与波高的关系，采用物理模型试验的方法，对单船艏艉锚泊、双船、三船、四船并排艏艉锚泊时各船的垂荡运动进行了研究，重点分析了纯浪和风浪作用下，波浪周期、波浪入射方向、并排锚泊船数、渔船所处位置等对各船垂荡的影响。结果显示：90°和45°纯浪作用时，单船的最大下沉量约为波高的0.5～0.8倍；0°纯浪时，单船的最大下沉量约为波高的0.25～0.65倍；90°纯浪作用下双船并排艏艉锚泊时，其最大下沉量约为波高的0.3～1.1倍；当三船或四船并排锚泊时，其最大下沉量约为波高的0.5～1.2倍。当90°风浪作用时单船最大下沉量约为波高的0.4～0.6倍，双船时约为0.6～0.8倍，三船或四船时约为0.8～1.2倍。研究结果可为港内渔船安全泊稳研究提供参考依据。
关键词： 多船并排艏艉锚泊 垂荡运动 并排锚泊船数 风浪作用 最大下沉量
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紫外线照射培养用水对海萝孢子萌发生长的影响
《生态科学 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：研究紫外线照射和黑暗沉淀培养用水对水中营养盐和海萝孢子萌发的影响,为海萝苗种生产的水处理提供依据.首先,海水分别经紫外线不同时间(0 h、6 h、12 h、18 h、24 h)照射后用于培养海萝孢子 40 d.然后,海水分别经不同处理(紫外线照射 12 h、黑暗沉淀 5 d、黑暗沉淀 60 d以及未经处理的对照组)后用于培养海萝孢子 40 d.结果显示,黑暗沉淀5 d的培养用水,水中无机氮含量明显最高,黑暗沉淀60 d的明显最低,经不同时间紫外照射的水中无机氮含量随紫外照射时间的增加而呈上升趋势;黑暗沉淀 5 d和 60 d的培养用水,水中无机磷含量明显最低,对照组和不同时间紫外照射组之间,水中的无机磷含量差异不明显.培养用水经紫外线照射 12 h—24 h的,海萝盘状体的生长明显比对照组的快;其中,紫外线照射 12 h的处理组,海萝盘状体萌发出直立体的百分率最高.海萝孢子在未经紫外照射或黑暗沉淀的水中附着,其附着率明显最低,盘状体的生长也较慢;培养用水经紫外线照射 12 h的,直立体的萌发率明显最高,培养用水黑暗沉淀 60 d的,直立体的萌发率明显最低.不同水处理组之间,海萝盘状体的存活率差异不明显.结果表明,海萝苗种生产中,可用紫外线代替黑暗沉淀处理培养用水.
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急性高温胁迫对中华绒螯蟹冬季成蟹热耐受、组织结构和抗氧化系统的影响
《海洋渔业 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：水温是影响中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）的关键生境因子之一，为探究急性高温胁迫下中华绒螯蟹冬季成蟹的生理调控过程和组织结构变化，采用临界温度法和致死温度法研究了中华绒螯蟹的热耐受性能，并分析了不同温度（10℃、15℃、20℃、25℃、30℃、32℃）下中华绒螯蟹鳃和肝胰腺组织结构以及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、还原型谷胱甘肽（GSH）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和谷胱甘肽巯基转移酶（GST）等抗氧化酶活性及丙二醛（MDA）含量的变化情况。临界温度法研究结果表明，升温速率对中华绒螯蟹的热耐受性具有显著影响，最高临界水温（CTM）随升温速率降低而升高，中华绒螯蟹的热耐受性能在低升温速率(1～2℃·h-1)时较强。致死温度法研究结果表明，在基础水温10℃条件下，中华绒螯蟹的24 h高起始半致死温度为31.26℃。此外，急性高温胁迫下组织结构和抗氧化系统研究结果表明，随胁迫温度升高，中华绒螯蟹组织结构的损伤程度逐渐增加；15℃～25℃急性高温胁迫下，中华绒螯蟹鳃小片和部分肝胰腺出现组织异常现象，抗氧化酶活性显著增加；30℃～32℃胁迫组中，组织出现病理性变化，抗氧化酶活性显著降低（P<0.05）,MDA含量骤增。研究结果可为中华绒螯蟹冬季成蟹养殖中的环境适宜性分析提供参考。
关键词： 中华绒螯蟹 急性高温胁迫 鳃 肝胰腺 抗氧化酶活性
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野生和养殖棘头梅童鱼幼鱼营养成分比较分析
《海洋渔业 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为探究野生和养殖棘头梅童鱼(Collichthys lucidus)幼鱼营养成分特征及其差异，采用生化分析方法分别对闽东海域采捕的30尾野生棘头梅童鱼幼鱼(野生组)及人工培育的30尾养殖棘头梅童鱼幼鱼(养殖组)营养成分进行了比较。结果显示，养殖组粗脂肪含量显著低于野生组(P<0.05),粗灰分含量显著高于野生组(P<0.05)。野生组和养殖组中均测得18种氨基酸，两者均以谷氨酸含量最高，其次为天冬氨酸和甘氨酸，而色氨酸含量均最低；养殖组脯氨酸含量显著高于野生组(P<0.05),甲硫氨酸和赖氨酸含量显著低于野生组(P<0.05),其他氨基酸含量两者无显著性差异(P>0.05)。养殖组共测得33种脂肪酸，野生组共测得32种脂肪酸[肉蔻油酸(C14∶1)未检出];养殖组单不饱和脂肪酸含量显著高于野生组(P<0.05),多不饱和脂肪酸含量显著低于野生组(P<0.05)。养殖组矿物质元素总量高于野生组，其中，钾、钙、磷、铜、锌、锰6种矿物质元素含量养殖组均显著高于野生组(P<0.05)。研究结果可为棘头梅童鱼人工配合饲料的研发提供参考。
关键词： 棘头梅童鱼 幼鱼 营养成分 氨基酸 脂肪酸 矿物质
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曝气扰动下浮萍生物量对附着硅藻生长的影响
《水产学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：【目的】利用腐烂状态的浮萍培养附着态生长的硅藻，验证“腐烂状态的浮萍不但可以作为硅藻附着生长的基质，而且曝气扰动条件下浮萍的生物量会影响硅藻的附着生长”科学假说。【方法】使用不同生物量的腐烂状态浮萍在曝气扰动下进行培养实验。按腐烂浮萍的湿重梯度设置5个处理组：0、4、8、12、14 g/L，处理编号依次为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ，每个处理组3个重复。【结果】各处理组均未出现缺氧情况；处理组Ⅰ的氨氮（NH4+-N）(0.584±0.649 mg/L)和活性磷（SRP）(0.336±0.274 mg/L)浓度均显著高于其他处理组。各处理组可溶性总氮（DTN）和可溶性总磷（DTP）均呈下降趋势并保持相对稳定，处理Ⅴ的DTN、DTP平均浓度最高，分别为（1.665±1.678）和（0.603±0.672） mg/L，但各处理之间的DTN、DTP浓度均无显著差异。实验中后期，腐烂状态的浮萍叶表面出现大量舟形藻属和卵形藻属硅藻附着生长，其中处理组Ⅳ的附着硅藻湿重最高，在第35天达到最大值249.13 mg/L。且浮萍叶表面的附着硅藻的最大生物量显著高于玻璃片上的。【结论】在曝气扰动下，腐烂状态的浮萍湿重在12 g/L时更有利于附着硅藻生长，浮萍较玻璃片更有利于硅藻附着生长。腐烂状态的浮萍释放了氮、磷等营养盐，为硅藻生长提供物质基础，同时浮萍也是硅藻附着生长的介质。本实验提供了一种在曝气扰动下利用腐烂状态的浮萍培养附着硅藻的方法，拓展了附着硅藻的培养方法。
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巢湖中存在洄游型刀鲚及其出生溯源的耳石微化学证据
《中国水产科学 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为了解巢湖中刀鲚(Coilia nasus)的生境履历并追溯其出生起源.利用电子探针微区分析技术(EMPA)分析了2022年7月25日采自巢湖的9尾刀鲚(Coilianasus)成鱼个体的矢耳石中锶和钙微化学特征.并进一步利用激光剥蚀连接多接收电感耦合等离子体质谱(LA-MC-ICP-MS)技术分析了其中5尾成鱼矢耳石的锶同位素(87Sr/86Sr)特征.研究发现,巢湖中采集的9尾刀鲚个体中7尾的耳石Sr/Ca值从核心到边缘均低于3,显示为淡水生活史个体.此外,22CH03个体Sr/Ca值短暂高于3,但个体的87Sr/86Sr值稳定地处于0.71053附近,显示其为淡水生活史个体.另有1尾个体22CH07的耳石具有Sr/Ca值的剧烈波动,在核心附近的低Sr/Ca值区之后升高,达到5.37±0.57;最后在边缘降至低于3,显示其出生于淡水,生长于河口及近海,后又上溯到淡水的洄游生活史.22CH07耳石87Sr/86Sr值最初处于0.71451的高值,其区域与低Sr/Ca值区域对应,87Sr/86Sr值高于巢湖及其支流,与鄱阳湖接近,据此推测其为鄱阳湖起源的个体;之后降低到0.70945附近,与高Sr/Ca值区域对应,表明其迁移到河口等半咸水生境生活;边缘降低到0.71079,与巢湖背景87Sr/86Sr值接近.以上结果表明巢湖中存在溯河洄游型刀鲚个体,且推测其来自鄱阳湖,提示巢湖仍具有一定的江湖连通性.另外,鉴于本研究较小的样本量,尚需进一步调查巢湖中是否存在巢湖出生并返回巢湖繁殖的溯河洄游型刀鲚种群.
关键词： 刀鲚 耳石 巢湖 溯河洄游 微化学 Sr/Ca 87Sr/86Sr
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基于细胞代谢组学的低分子量岩藻聚糖硫酸酯对铅诱导HepG2细胞氧化损伤的保护作用
《食品工业科技 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：目的:研究低分子量岩藻聚糖硫酸酯对铅诱导HepG2细胞氧化损伤的保护作用及代谢调控机制.方法:以低分子量岩藻聚糖硫酸酯F1(F1)为受试物,构建铅诱导及F1干预的体外HepG2细胞模型,采用CCK-8法检测细胞存活率,生物化学法检测细胞内活性氧(ROS)水平、谷胱甘肽(GSH)含量、丙二醛(MDA)含量及抗氧化酶活力,采用AnnexinV-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡情况.选取保护作用最优的高浓度组F1对铅诱导HepG2细胞进行干预,利用超高效液相色谱串联质谱法(UHPLC-MS/MS)检测细胞内源性代谢物水平,筛选潜在差异代谢物并分析相关代谢通路.结果:与铅模型组相比,F1干预处理能够显著缓解铅诱导的细胞存活率降低(P<0.05),显著抑制细胞内ROS和MDA含量升高(P<0.05),恢复GSH含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和过氧化氢酶(CAT)的酶活力(P<0.05),同时减少细胞凋亡(P<0.05).代谢组学结果显示,F1能显著回调谷氨酸、谷胱甘肽、硒代-L-蛋氨酸等17种潜在差异代谢物(P<0.01);对F1调控的关键代谢物进行富集分析表明,F1主要影响D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,硒化合物代谢和精氨酸生物合成等多个涉及氧化还原等功能的代谢通路.结论:低分子量岩藻聚糖硫酸酯F1对铅诱导的HepG2细胞氧化损伤具有保护作用,其机制可能与调节氨基酸代谢和谷胱甘肽合成等代谢途径有关.
关键词： 低分子量岩藻聚糖硫酸酯 铅 HepG2细胞 氧化应激 代谢调控
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基于多物种质量谱模型的综合渔业管理策略评估
《海洋与湖沼 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：混合渔业（mixed fisheries）是指在同一渔场中,通过使用单一渔具捕获多个物种,或使用多种渔具进行综合捕捞的作业方式,是我国最重要的渔业作业方式之一。然而,基于单物种的渔业资源评估方法及渔业管理方案在混合渔业管理中存在明显局限性。因此,基于2020～2021年大陈岛海洋牧场四季拖网调查数据,构建了多物种质量谱模型（multi-species-size-spectrum model, MSSM）,量化了单物种最大可持续产量（maximum sustainable yield , MSY）管理在混合渔业中的局限性,并设计了综合渔业管理策略,即结合多物种MSY管理和单物种管理,其中大型捕食者海鳗（Muraenesox cinereus）为单物种管理的目标种,其捕捞死亡系数（F）额外增加50%。结果显示,在以单物种FMSY（达到MSY的捕捞死亡系数）进行捕捞时,产生了衰退种群。综合管理策略使大多数物种的生物量和产量得到了提升,使群落总产量提升3%,群落总生物量提升31%,且未产生衰退种群（海鳗除外）。尽管海鳗的生物量减少了50%,达到了衰退的条件,但终止对海鳗的单独管理后,其生物量恢复仅需6 a。本研究揭示了高营养级物种的下行控制效应对群落结构的调节作用,通过控制大型捕食者的开发强度可实现渔业资源的整体优化,为应对混合渔业挑战提供了理论依据和科学方案。
关键词： 单物种管理 多物种管理 管理策略评估 最大可持续产量(MSY) 多物种质量谱模型
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