堆肥中微生物总DNA的高效提取

何丽鸿; 赵勇; 陈明杰; 潘迎捷; 《微生物学报 》 2006 北大核心 CSCD

摘要：采用化学裂解和酶解相结合的方法,选择加入PVPP的高盐缓冲液作为细胞裂解的反应体系,并以PEG-8000进行DNA沉淀,从高有机含量的堆肥样品中进行微生物总DNA的提取。结果表明,从4种性质不同的堆肥中均获得了高质量的微生物总DNA,所得的DNA分子片段在23kb左右;每克干重堆肥的总DNA提取量为63.54±12.08μg~106.50±28.36μg,A260/A280大于1.6,A260/A230大于1.8,不用经过纯化可以直接进行PCR扩增和限制性酶切;以该DNA为模板进行微生物区系的DGGE分析,显示了丰富的微生物多样性。该方法减少了通常环境样品DNA提取过程中的纯化步骤,减少了DNA的损失,为从事微生物分子生态学,尤其是那些针对高有机含量以及获取极为不易的环境样品的研究而言是十分有益的。

关键词： 堆肥 DNA的高效提取 高有机含量 DGGE

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梨ACC氧化酶基因(ACO)的片段克隆及其RNAi载体构建

胡钟东; 乔玉山; 王三红; 姚泉洪; 章镇; 《果树学报 》 2006 北大核心 CSCD

摘要：以若光梨成熟果实为材料,提取总RNA,在ACC氧化酶基因(ACO)cDNA序列同源性较高区域设计一对特异引物,利用RT-PCR克隆了ACC氧化酶(ACO)基因片段。将ACO反义基因、与副球菌中类胡罗卜素合成有关的间隔基因YYT和ACO正义基因3个片段串联在一起,经鉴定后,插入到植物表达载体中,构建成能够表达ACC氧化酶基因的双链RNA的植物载体pYF028,为耐贮砂梨的遗传转化创造条件。

关键词： 梨 ACC氧化酶(ACO) RT-PCR 克隆 RNAi载体构建

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体细胞的组织来源及培养代数对猪核移植重构胚发育的影响

张德福; 刘东; 汤琳琳; 王英; 陈茵; 王凯; Karl Schellander; 《分子细胞生物学报 》 2006 北大核心 CSCD

摘要：本研究系统探讨了体细胞的组织来源及培养代数对猪核移植重构胚发育的影响。体外成熟培养40-44h的猪卵母细胞去核后,将经血清饥饿(0．5%FBs)培养2-9d、0．1mg/L Aphidicolin (APD)培养+0．5%FBS培养2-9d或一般培养法(10%FBS)培养的卵丘细胞、颗粒细胞、输卵管上皮细胞和耳皮成纤维细胞,直接注射到去核的卵母细胞质中,或注射到卵周隙中。再经电融合(100V/mm,30μs,电脉冲1次)构建重构胚。重构胚以钙离子载体A23817或电脉冲结合6- DMAP激活处理,体外培养6天。耳皮成纤维细胞和颗粒细胞经0．1mg/L APD+0．5%FBS培养处理后的重组胚卵裂率,均高于血清饥饿和一般培养处理的同种供体细胞(P＜0．01)。卵丘细胞、颗粒细胞经0．1mg/L APD+0．5%FBS处理后进行核移植的分裂率和发育率均高于输卵管上皮细胞和耳皮成纤维细胞(P＜0．05)。以猪颗粒细胞为核供体时,电融合法的重构胚分裂率显著高于胞质内注入法(P＜0．05),但囊胚发育率无显著差异(P＞0．05)。培养3代和6代的猪颗粒细胞以及培养6代和10代的耳皮成纤维细胞,其具有正常二倍染色体的细胞比例均无显著差异(P＞0．05)；以这2种细胞不同培养代数做供体进行核移植时,各代之间核移胚的体外分裂率、囊胚发育率无显著差异(P＞0．05)。这些结果表明：(1)猪耳皮成纤维细胞和颗粒细胞经培养传代所建立起来的细胞系相对比较稳定；(2)0．1mg/L APD预培养处理供体细胞能提高猪体细胞核移植的效果,血清饥饿培养则无明显效果；(3)猪颗粒细胞和耳皮成纤维细胞等均可做供核细胞．核移植后都能得到体细胞克隆的囊胚,但前者的效果略优于后者,且其核移植效果不受供核细胞培养代数的影响；(4)电融合核移植胚胎的发育率高于胞质内直接注入法,但两者的总体效率相近。

关键词： 猪 体细胞核移植 细胞周期

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真姬菇高产优质栽培技术

王志强; 《食用菌 》 2006 北大核心

摘要：真姬菇(Hypsizygus marmoreus)是从日本引进的一种珍稀食用菌。又名:蟹味菇、海鲜菇、鸿喜菇、玉蕈、胶玉蘑。隶属于担子菌亚门、层菌纲、伞菌目、白蘑科、离褶菌族、玉蕈属。据杨祝良报道,云南省也有野生的真姬菇,但目前各地栽培的真姬菇都是从日本传入的(在日本长野,20世纪70年代开始栽培)。真姬菇味道鲜美,质地脆嫩,营养价值高,是一种低热量、低脂肪的保健食品。

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连栋大棚梨先促成后避雨栽培效果初报

钱培华; 金凤雷; 骆军; 金江华; 费立斌; 李正弟; 《中国南方果树 》 2006 北大核心

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基于辐射和温度热效应的温室水果黄瓜叶面积模型

李永秀; 罗卫红; 倪纪恒; 陈永山; 徐国彬; 金亮; 戴剑锋; 陈春宏; 卜崇兴; 《植物生态学报 》 2006 北大核心 CSCD

摘要：依据温室黄瓜(Cucumissativus)叶片生长与温度和辐射的关系,构建了适合我国种植技术的黄瓜叶面积模拟模型,并利用不同品种、播期的试验资料对模型进行了检验。结果表明,该模型比传统的积温法和比叶面积法更准确地模拟温室水果黄瓜的叶面积。该模型对黄瓜叶面积指数的模拟结果与1∶1直线之间的决定系数R2和回归估计标准误差RMSE分别为0.8792和0.3980,比用积温法和比叶面积法模拟叶面积指数的精度分别提高了37%和74%。

关键词： 温室 黄瓜 辐热积 叶面积指数 模型

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转基因抗草苷膦大豆对大鼠生理代谢的影响及外源基因水平转移研究

赵志辉; 杨立桃; 艾晓杰; 张大兵; 邹思湘; 《南京农业大学学报 》 2006 北大核心 CSCD

摘要：为了分析转抗草甘膦转基因大豆对大鼠生理代谢水平的影响及其内源和外源基因遗传转移的情况,选用32只SD大鼠,随机分成2组,分别饲喂含30%转基因抗草苷膦豆粕和含30%非转基因豆粕的大鼠配合饲料,连续饲喂30 d。试验结果表明,与对照组相比,试验组大鼠体重,血清中尿素氮(SUN)、葡萄糖、天冬氨酸转氨酶(GPT)和血清总胆固醇均无显著差异(P>0.05)。同时,利用定性PCR方法检测试验大鼠的血液、肌肉、肝脏、胰脏、肾脏、胃及肠道内容物中的转基因豆粕内源基因和外源基因。结果表明,在用含转基因豆粕的饲料饲喂的大鼠胃、肠道内容物中发现了转基因豆粕的内源基因和外源基因片段,而在其血液及各组织器官中则没有发现,说明短期内转基因豆粕的内源和外源基因在大鼠体内没有发生遗传转移。

关键词： 抗草苷膦转基因大豆 大鼠 代谢产物

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早熟杂交晚粳“申优8号”的选育和应用

曹黎明; 顾永平; 倪林娟; 程灿; 袁勤; 《种子 》 2006 北大核心 CSCD

摘要：申优8号是上海市农业科学院作物育种栽培研究所自主选育的三系早熟杂交晚粳稻组合,以不育系申4 A与恢复系R8号配组育成。2003~2005年参加上海市杂交粳稻区域试验和生产试验,表现熟期早、优质、粒重、大穗、高产,区试产量608.6 kg/667 m2,比对照寒优湘晴增产5.3%,增产极显著,生产试验产量489.2 kg/667 m2,比对照寒优湘晴增产11%,增产极显著。2006年1月通过上海市农作物品种审定委员会审定。

关键词： 晚粳型杂交稻 申优8号 选育 早熟 优质

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用ITS和ISSR分子标记技术鉴别香菇生产用种

秦莲花; 宋春艳; 谭琦; 陈明杰; 潘迎捷; 《菌物学报 》 2006 北大核心 CSCD

摘要：通过选用香菇生产中存在名称争议或者名称相近或者同一名称但长期在不同地区栽培的12株香菇生产菌株,以及用于种水平对比的豹皮香菇Lentinuslepideus和虎皮香菇Lentinustigrinus的4个菌株,共16个菌株作为供试材料,进行ITS和ISSR遗传分析,并用RAPD技术验证试验结果。结果证明,不同种的ITS长度存在差异,再次证明ITS可以有效区别种之间的菌株;在ISSR的菌株水平分析中,香菇种内材料拥有两个共同的条带,与其他两种菌株的带型图谱有着明显差异,其中5对材料的带型图谱极为相近。RAPD验证结果与上述结果相近。由此可见,结合ITS与ISSR技术是可以用作香菇生产菌株鉴别的,这为ITS和ISSR分子标记技术推广应用于香菇生产菌株的快速准确鉴别提供了技术依据。

关键词： 食用菌 快速鉴定 PCR技术

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水稻显性半矮秆基因对株高表达的影响及其对GA_3的敏感性

程灿; 吴跃进; 刘斌美; 童继平; 吴敬德; 张瑛; 吴瑾华; 袁勤; 《中国水稻科学 》 2006 北大核心 CSCD

摘要：对具有显性半矮秆基因的6对高矮秆近等基因系的株高表达特性进行了比较。水稻显性半矮秆基因抑制了茎秆节间的伸长,矮秆系倒4~5、3、2、1节及穗长分别为高秆系的97.2%、53.3%、65.1%、61.9%和94.7%。通过对Y98149(突变体)和Y98148(野生型)在苗期和成株期对GA3反应的研究,发现Y98149较Y98148对外源赤霉素更敏感;内源赤霉素测定结果显示显性半矮秆突变体内源赤霉素含量较低,是野生型的78%。

关键词： 半矮秆基因 近等基因系 敏感性 赤霉素 水稻

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