通过农杆菌介导将番茄铁转运蛋白基因导入八棱海棠(英文)

渠慎春; 黄晓得; 章镇; 姚泉洪; 陶建敏; 乔玉山; 张君毅; 《植物生理与分子生物学学报 》 2005 北大核心 CSCD

摘要：用农杆菌介导法,成功地将番茄铁转运蛋白基因导入了苹果砧木八棱海棠。获得了19个卡那霉素抗性株系,其中有11个株系经PCR鉴定为阳性。Southern杂交结果显示:有9个转基因株系基因组中整合了完整的目的基因。选择其中含有单拷贝和3个拷贝目的基因的各一个株系进行水培试验,结果表明整合了单拷贝目的基因的转基因株系表现出较强的抗缺铁胁迫能力,5周后其植株的鲜重比对照高21%￣34%。

关键词： 八棱海棠 农杆菌 番茄铁转运基因 遗传转化

 全文链接 请求原文

实时PCR技术在植物研究上的应用

童汉华; 邬亚文; 章善庆; 曹一平; 罗利军; 《中国生物工程杂志 》 2005 北大核心 CSCD

摘要：实时PCR是在常规PCR基础上运用荧光共振能量转移现象,加入荧光标记探针,巧妙地把核酸扩增、杂交、光谱分析和实时检测技术结合在一起的一项新技术,具有快速、灵敏、特异性强、定量准确等特点,广泛应用于医学、检验检疫、军事、农业、基础研究等领域。着重就实时PCR技术的特性及在植物上的应用进行了讨论,并与目前常用的相关技术进行了比较。

关键词： 实时PCR 定量 荧光探针

 在线阅读   全文下载 请求原文

六盘山区反季节栽培双孢蘑菇配方比较试验

蔺建斌; 祁登明; 王志强; 米占国; 凌霞芬; 李强; 《食用菌 》 2005 北大核心

 全文链接 请求原文

温室番茄叶面积与干物质生产的模拟

倪纪恒; 罗卫红; 李永秀; 戴剑锋; 金亮; 徐国彬; 陈永山; 陈春宏; 卜崇兴; 徐刚; 《中国农业科学 》 2005 北大核心 CSCD

摘要：根据光温对作物叶面积的影响,提出了辐热积(product of the rma leffectiveness and PAR,TEP)的概念。根据试验资料构建了利用辐热积模拟番茄(Lycopersicon esculentum Mill)叶面积动态的数学模型,并将其与已有的光合作用和干物质生产模拟模型相结合,构建了温室番茄干物质生产动态模型。利用不同品种、基质和地点的试验资料对模型进行了检验。结果表明,与传统的比叶面积法和有效积温法相比,辐热积法显著提高了温室番茄叶面积的预测精度,提高了光合作用和干物质生产的模拟精度。辐热积法对番茄叶面积的预测结果与1:1直线之间的决定系数R2和统计回归标准误差RMSE分别为0.9743和0.0515m2·株-1,对植株总干物质量的预测结果与1:1直线之间的R2和RMSE分别为0.9360和522.7104kg·ha-1;采用辐热积法对植株总干物质量的预测精度比有效积温法和比叶面积法分别提高56%和72%。

关键词： 番茄(Lycopersicon esculentum Mill) 光合作用 叶面积 干物质生产 模拟模型

 全文链接 请求原文

连续弱光处理对黄瓜生育及光合速率的影响

裴孝伯; 李世诚; 蔡润; 《安徽农业大学学报 》 2005 北大核心 CSCD

摘要：采用40、60、80和110μmol.m-2.s-14个不同弱光水平对黄瓜进行连续人工气候箱试验。结果表明,连续弱光处理下黄瓜的株高和叶面积增加,5周后达到相对稳定,弱光处理1周黄瓜叶片叶绿素含量增加,此后保持相对稳定,处理间差异不显著;连续弱光处理影响黄瓜的根系活力,随处理光强降低,黄瓜根系活力下降迅速,与110μmol.m-2.s-1弱光处理相比,60μmol.m-2.s-1弱光处理的根系活力下降62.2%,40μmol.m-2.s-1的根系活力仅为其1/8;连续弱光处理下,黄瓜功能叶片的净光合速率随生育期的变化而有所上升,而随着光照强度减弱,其净光合速率逐步降低,呈现同步变化。连续弱光处理导致黄瓜严重化瓜。

关键词： 黄瓜 弱光 生长发育 开花结瓜 光合速率

 全文链接 请求原文

猪α干扰素基因在毕赤酵母中的分泌表达

葛丽; 李震; 于瑞嵩; 刘惠莉; 张德福; 周智爱; 尹逊和; 《中国兽医学报 》 2005 北大核心 CSCD

摘要：将猪α干扰素(PoIFN-α)基因克隆入毕赤酵母分泌型表达载体pPICZαA中,电转化毕赤酵母KM71H菌株,抗生素ZeocinTM浓度梯度筛选高抗性转化子,以PCR鉴定阳性重组菌株。筛选出的高拷贝重组菌株分别通过BMGY/BMMY培养基和YPG培养基,用甲醇诱导表达。SDS-PAGE和Westernblot印迹杂交结果证实,表达产物为重组PoIFN-α融合蛋白,经细胞毒性试验检测(WISH/VSV系统),表达产物的抗病毒活性为4.1×104IU/mL。

关键词： 猪干扰素 毕赤酵母 表达

 全文链接 请求原文

一种快速简便的植物病原真菌基因组DNA提取方法

刘少华; 陆金萍; 朱瑞良; 戴富明; 《植物病理学报 》 2005 北大核心 CSCD

摘要：尿素提取法是最新报道的一种植物拟南芥基因组DNA的提取方法,但是还没有应用于植物病原真菌DNA的提取。本研究采用改进的4种不同的方法(尿素提取法、CTAB提取法、氯化苄提取法以及SDS-CTAB提取法),分别对5种分类地位不同的植物病原真菌(草莓疫霉病菌、西瓜蔓枯病菌、草莓炭疽病菌、西瓜枯萎病菌和水稻纹枯病菌)的基因组DNA进行提取和比较。结果表明,尿素提取法和SDS-CTAB法均能提取到所有5种真菌的基因组DNA,而尿素提取法提取DNA的效率更高、质量更好,操作步骤更为快速简单。

关键词： 植物病原真菌 基因组DNA 尿素提取法

 全文链接 请求原文

RT-PCR检测犬粪便中的冠状病毒

王权; 张建武; 李建; 潘饶霖; 刘佩红; 陈燕军; 顾惠明; 胡永强; 周锦萍; 《畜牧与兽医 》 2005 北大核心

摘要：根据犬冠状病毒(caninecoronavirus, CCV) 的S基因序列, 用计算机设计并合成了1对引物P1、P2, 以此引物及以从美国进口的CCV疫苗的反转录产物为模板, 初步建立了检测CCV的RT PCR。将纯化的PCR产物成功地克隆到pGEM T easy载体中, 鉴定、测序并进行同源性分析。结果表明, 与1 71和UCD 1株同源性分别为91 5%和94 3%。该RT PCR能对疫苗中CCV及CCV参考株USCV B1的S基因进行特异性地扩增,长度为575bp, 对犬的其他病毒及CRFK细胞未能扩增出任何片段, 该RT PCR能检测出0 5μLCCV培养液/2g粪便。用建立的RT PCR在上海对50条犬粪便进行检测, 结果表明CCV阳性6例。本研究建立了检测犬粪便中的CCV的RT PCR, 能用于犬冠状病毒流行病学调查。

关键词： 犬冠状病毒 RTPCR 粪便

 在线阅读   全文下载 请求原文

毛头鬼伞富铬深层发酵条件的优化

刘艳芳; 张劲松; 杨焱; 唐庆九; 《微生物学通报 》 2005 北大核心 CSCD

摘要：在筛选出最佳发酵培养基的基础上,对毛头鬼伞富铬深层发酵培养条件进行了优化。以有机铬产量为主要指标,筛选出的最佳发酵培养条件为:CrCl3·6H2O的添加量为200mg/L,培养基初始为自然pH,接种量为8%~10%,装液量为80mL/250mL三角瓶,转速100r/min,26℃恒温培养5d,有机铬的产量达1597·88μg/100mL发酵液,铬富集率达9·09%。

关键词： 毛头鬼伞 富铬 深层发酵

 全文链接 请求原文

多重RT-PCR检测猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病毒

陈芳; 刘惠莉; 孙红立; 曹祥荣; 李震; 赵立平; 《中国兽医学报 》 2005 北大核心 CSCD

摘要：为了检测、区分猪传染性胃肠炎 (TGE)和猪流行性腹泻 (PED) ,建立了同时检测这 2种疾病病原体的多重 PCR方法。参考 Gen Bank登录的 TGEV和 PEDV纤突蛋白 S基因序列 ,经 DNAsis 2 .0比较分析 ,分别筛选出 TGEV、PEDV S基因相对保守区。以 TGEV TH- 98株 (Gen Bank登陆号为 AF4 94 337)和 PEDV CV777株 (Gen Bank登陆号为 NC0 0 3436 )为参考模板 ,利用软件 Primer 3设计合成了 2对寡核苷酸引物 ,以 ST细胞培养的 TGEV和 PEDV毒株核酸为模板 ,利用所设计的 2对引物进行多重 RT- PCR扩增 ,结果同时得到与试验设计相符的 4 99bp(TGEV)和199bp(PEDV)的扩增条带 ,而对其他 3种猪病原的扩增结果均为阴性。敏感性试验结果表明 ,建立的多重 RT- PCR方法可检测出 10 pg TGEV RNA和 10 0 pg PEDV RNA。

关键词： TGEV PEDV 多重RT-PCR 检测

 全文链接 请求原文