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陆地棉再生植株光合特性及叶绿素荧光参数分析

分子植物育种 2018 北大核心 CSCD

摘要:为了研究陆地棉的体细胞再生植株的遗传稳定性,以新疆主载品种‘新陆早33号’和对照品种‘Coker312’的下胚轴R1代再生株系为试验材料,于盛花期,对功能叶片的气体交换参数、叶绿素荧光参数、气孔密度及气孔面积等进行了测定,分析其表型和生理特性是否与野生型植株存在显著差异。结果显示,两个品种下胚轴再生R1代各株系的净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、胞间CO2浓度(Ci)、及蒸腾速率(Tr)和叶绿素荧光参数初始荧光(Fo)、最大荧光(Fm)、PSⅡ最大光化学效率(Fv/Fm)、光量子产量(ΦPSⅡ)、光化学猝灭(qP)及非化学猝灭(NPQ)与野生型之间有差异,但均未达到显著水平(p<0.05)。叶片气孔密度和面积测定结果发现,‘新陆早33号’再生R1代株系上、下表皮的气孔密度均大于野生型,而上、下表皮的气孔面积均低于野生型,但差异均不显著(p<0.05)。综上可知:‘新陆早33号’下胚轴再生后代植株的光合荧光参数、叶片气孔及面积与野生型之间的差异均不显著,遗传稳定性较好。因此,可将‘新陆早33号’作为外源基因遗传转化的受体材料用于新疆陆地棉的种质创新与遗传改良,对于加快功能基因转化研究和新疆棉花转基因新品种培育进程具有重要的意义。

关键词: 陆地棉 再生植株 光合参数 叶绿素荧光参数

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细粒棘球绦虫原头蚴microRNA表达谱分析

畜牧兽医学报 2018 北大核心 CSCD

摘要:旨在解析miRNA在细粒棘球绦虫原头蚴中的表达谱特性,为进一步揭示miRNA在细粒棘球绦虫原头蚴发育中的作用及调控机制提供理论依据。从患病绵羊肝无菌采集细粒棘球绦虫原头蚴,提取总RNA,构建原头蚴miRNA文库,利用RNA sequencing技术进行测序分析。结果表明,本研究从细粒棘球绦虫原头蚴中分离得到109个已知的miRNA分子,同时得到189个新的miRNA发夹前体分子。靶基因的预测结果显示,已知miRNA共有132个靶基因,而新发现的miRNA共有3 152个靶基因。进一步的研究发现这些miRNA分子广泛参与虫体生长发育相关的关键信号通路,诸如wnt、cAMP、Hedgehog、NF-κB、Notch以及胆酸盐等信号通路,研究又进一步采用实时荧光定量PCR以及原位杂交技术对虫体经典wnt信号通路相关的miRNA分子以及其靶标基因进行了差异表达以及组织定位研究。结果提示,HG328413.1_36258和β-catenin、HG328414.1_36364*和dis以及HG328399.1_25846和axin可能存在潜在的调控关系。综上所述,本研究在细粒棘球绦虫原头蚴中发现了大量的新的miRNA分子,丰富了原头蚴miRNA的数据,为进一步解析miRNA在细粒棘球绦虫原头蚴发育中的作用奠定了基础。

关键词: 细粒棘球绦虫 microRNA 原头蚴 表达谱

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不同贮藏温度下不同充气包装处理对鲜食枸杞贮藏品质的影响

食品工业科技 2018 北大核心 CSCD

摘要:为了研究鲜食枸杞最佳冷藏温度及充气包装条件,以新鲜、无腐烂的红枸杞为试材,采用CO2∶O2∶N2分压比例分别为3∶15∶82、7∶25∶68、11∶35∶54的充气包装,在冷库中置于0、1、2℃贮藏24 d,分别对贮藏期间枸杞果实可滴定酸、还原糖、可溶性固形物、色差、腐烂率进行测定.结果表明,贮藏过程中0、1℃条件下7%CO2+25%O2+68%N2气体浓度可有效维持枸杞果实中较高的还原糖、可滴定酸、可溶性固形物的含量,有效抑制果实腐烂率的下降,不同贮藏温度和不同充气包装对果实色泽没有显著影响(p>0.05).由此表明,0、1℃条件下7%CO2+25%O2+68%N2包装可有效延长鲜食枸杞贮藏期,保持果实品质.

关键词: 贮藏 温度 充气包装 鲜食枸杞 品质

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新疆赛里木湖凹目白鲑中6种重金属元素含量分析及食用安全性评价

食品科学 2018 EI 北大核心 CSCD

摘要:为评价新疆冷水鱼重金属元素蓄积水平和食用安全性,采用微波消解法,并用原子吸收法和原子荧光法对新疆赛里木湖凹目白鲑不同组织进行Pb、Cd、Cr、Hg、As、Ni 6种重金属元素的含量测定,分析其含量分布特征及其与体长、体质量的相关性,并用单因子污染指数法和目标危险系数法评价其污染程度与食用安全性。结果表明,重金属元素在鱼体内的蓄积量存在组织特异性,同一器官组织对不同重金属的蓄积量不相同。Cd、As含量在凹目白鲑的肠胰脏中含量最高,肌肉中含量最少,Pb含量在凹目白鲑的皮含量最高,均小于国标规定食用性安全含量(Pb<0.5 mg/kg,Cd<0.1 mg/kg,As<0.1 mg/kg)。相关性分析显示,除Ni和Cr含量在凹目白鲑部分组织中相关性不显著,其余均表现出较强的相关性(P<0.05),重金属含量与体长、体质量的相关性较显著。污染程度分析及健康风险评价表明,除肌肉组织外其他组织器官均存在不同程度的污染水平,食用赛里木湖区域的凹目白鲑无明显的健康风险,食用安全性较高。

关键词: 重金属元素 新疆赛里木湖 凹目白鲑 蓄积量 食用安全

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陆地棉叶片特异性表达启动子的克隆与表达分析

西南农业学报 2018 北大核心 CSCD

摘要:【目的】本研究旨在获得叶片特异表达启动子的全长并进行表达分析,为抗逆转基因育种提供重要顺式作用元件。【方法】通过基因芯片及RT-PCR筛选鉴定出1个高活性的棉花叶片特异性表达基因,通过电子克隆及PCR获得了该基因全长,并通过染色体步移法(Genome walking)经过3次步移成功获得翻译起始位点上游2kb左右的DNA片段,将其命名为叶片特异性表达启动子LSP(leaf specific promoter)。【结果】生物信息学分析表明,该序列含有启动子的基本元件TATA-box、CAAT-box及多个顺势作用元件。通过构建该启动子驱动GUS的植物表达载体p Ghlsp∷GUS,并经农杆菌花絮侵染法转化拟南芥,对转基因拟南芥进行GUS组织化学染色观察,结果显示该基因主要在叶片中特异性表达,而根部以及茎部几乎不表达。【结论】LSP是一个全新的叶片特异性表达启动子,为研究外源基因在棉花叶片中的定位表达奠定基础。基因工程中利用此类启动子可以在改良棉花性状的同时减少对棉花生理方面的副作用,在棉花抗逆转基因育种方面有广泛的应用前景。

关键词: 棉花 组织特异性 启动子 表达特性

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基于Micro-CT的黄瓜苗坨夹取破损检测及取苗参数优化

农业工程学报 2018 EI 北大核心 CSCD

摘要:为了减小自动移栽时取苗爪夹取苗坨的破损,利用X射线Micro-CT对处于夹取状态的黄瓜苗坨进行检测,用阈值分割方法将根系和孔隙从断层图片中分割提取并三维重构。在垂直和水平方向将苗坨划分成6等份,对根系和孔隙的体积和分布密度进行统计,得出夹取过程中根系未发生显著位移,根系的作用是将基质缠绕包裹住,防止苗坨散坨;孔隙的体积和分布密度变化非常显著,新生孔隙的聚集和裂缝的形成是导致苗坨破损的主要原因。苗坨中夹针收缩移动的区域、夹针的顶端部位和苗坨的顶部是破损的主要部位,用这3个区域孔隙体积的增加量作为评价苗坨破损量的指标,对圆形和扁形2种夹针,在夹针直径为2、2.5和3 mm,夹取初始角为7°、9°和11°时进行扫描试验,得出在夹针收缩量为5 mm时,减小夹针直径和增大夹持初始角可以减小苗坨破损量,相同夹取条件下圆针夹取苗坨的破损量小于扁针;在夹取力等于苗坨屈服点的抗压力7.31 N时,圆针和扁针的收缩量分别为4.75和4.26 mm,此时孔隙体积的增加量分别为843.7和786.1 mm~3,扁针夹取苗坨的破损量小于圆针。以苗坨质量损失25%作为考核指标,在自动取苗机构上进行试验,结果表明,在夹针直径为2 mm,夹取力和夹取初始角分别为7.31 N和11°时,苗坨的破损率为6.3%,小于其他参数的试验结果,与Micro-CT扫描分析的结论一致。

关键词: 检测 优化 移栽 黄瓜穴盘苗 苗坨 Micro-CT 破损 根系

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乌拉尔图小麦NBS-LRR家族生物信息学分析

分子植物育种 2018 北大核心 CSCD

摘要:乌拉尔图小麦(Triticum urartu)为二倍体小麦,是普通小麦(Triticum aestivum,由A, B, D三个亚基因组成的异源六倍体) A基因组供体。普通小麦基因组庞大,异源六倍体性质导致其基因组研究存在困难。伴随普通小麦供体A基因组和D基因组的测序完成,为小麦A基因组供体NBS-LRR基因家族的研究提供了重要生物信息学数据。目前获得的抗病(R)基因大部分具有NBS (nucleotide-binding site)和LRR (leucine-rich-repeat)结构域,属于NBS-LRR基因家族。本研究采用HMMER对乌拉尔图小麦蛋白序列信息进行了NBS-LRR家族基因筛选,通过Paircoi2网站进行coil-coil结构域分析,采用Uniprot和NCBI Blast进行了验证和排除,经Bioedit、MEGA 5.1、Clustal W、Jalview等软件进行了NBS-LRR基因序列分析,确定了乌拉尔图小麦的NBS-LRR基因数量、类型、结构特点和系统发育学关系。最终从乌拉尔图小麦中获得485个NBS-LRR基因,占基因组1.503%,其中331个N型,163个CNL型(其中34个CN型),60个NL型,无Tir型。随后经MEME网站筛选获得CNL亚家族中的15个相对保守的motif,N末端结构均保守性较高。此外,PLN00113出现在LRR的位置,在系统进化树的各分支中随机性分布。乌拉尔图小麦NBS-LRR基因的分类、蛋白序列的motif分析和系统进化树的研究为小麦NBS-LRR家族基因的功能研究提供重要依据。

关键词: 乌拉尔图小麦 NBS-LRR R基因 基因家族 生物信息学分析

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不同施氮处理下滴灌甜菜冠层的高光谱响应

干旱地区农业研究 2018 北大核心 CSCD

摘要:为明确甜菜冠层高光谱特性,对不同氮素处理下滴灌甜菜冠层反射光谱以及叶面积指数(LAI)、叶绿素含量与叶片全氮含量进行分析。结果表明:甜菜冠层光谱反射率随着施氮量的增加而升高,与氮素运筹模式10∶0相比,氮素运筹模式7∶3的冠层光谱反射率和冠层光谱"红边"在叶丛快速生长期较低,在糖分积累期较高。甜菜冠层光谱红边具有"双峰"现象,且"双峰"随生育时期的推进逐渐减弱,随施氮量的增加,愈加凸显。光谱变量与叶片全氮含量显著相关,红边幅值Dλred、红边峰值面积Sred、红边位置λred与LAI、叶绿素含量显著相关,表明通过高光谱反演滴灌甜菜农学参数进行氮素营养状态诊断是可行的。

关键词: 施氮水平 甜菜 滴灌 冠层高光谱响应 红边参数

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棉花蕾期至初花期抗旱性评价及指标筛选

西南农业学报 2018 北大核心 CSCD

摘要:【目的】筛选棉花抗旱性综合评价指标,为棉花抗旱品种选育提供理论依据。【方法】以68个棉花品种(系)为材料,在蕾期至初花期进行干旱处理,测定株高、茎粗、叶面积、荧光参数、产量等17个指标,评价棉花抗旱性并筛选抗旱性评价指标。【结果】(1)品种(系)间变异系数较大的指标为Y(NO)和电导率,说明Y(NO)和电导率对干旱胁迫的敏感性存在较大的品种差异。(2)采用隶属函数值评价棉花品种(系)的抗旱性,在68份材料中,高抗材料7份,中抗材料20份,弱抗材料41份。(3)主成分分析将17个指标归类为3大因子,第一类因子中F_v/F_m、Y(NPQ)和Φ_(PSⅡ),第二类因子中茎粗、电导率和第三类因子中叶背面气孔数量、叶正面气孔面积为负荷量较大的指标,可作为棉花蕾期至初花期抗旱性鉴定指标。【结论】可采用F_v/F_m、Y(NPQ)、Φ_(PSⅡ)、茎粗、电导率、叶背面气孔数量和叶正面气孔面积综合评价棉花蕾期至初花期的抗旱性。

关键词: 棉花 干旱胁迫 评价指标

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猪PEDV与PDC_OV二重RT-PCR检测方法的建立

生物技术通报 2018 北大核心 CSCD

摘要:旨在建立能同时检测出猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)和猪丁型冠状病毒(Porcine delta corona virus,PDCOV)的二重RT-PCR检测方法.根据GenBank已收录发表的PEDV和PDCOV基因序列设计2对特异性引物,首先运用RT-PCR反应技术,通过PEDV和PDCOV病毒的目的基因的单项扩增,对反应条件进行优化.然后通过特异性试验、敏感性试验以及临床样品的检测验证确定二重RT-PCR方法的建立.结果显示,目的基因PEDV-M扩增的片段大小是750 bp,PDCOV-N扩增的片段大小是372 bp;能够同时检测出PEDV和PDCOV目的基因,却检测不到PRV、CSFV、PPV三种病毒;体系优化扩增PEDV-PDCOV混合核酸浓度下限为100 pg/μL;能够初步诊断出临床疑似病毒感染的病例.结果表明,成功的建立PEDVPDCOV二重RT-PCR检测方法,此方法敏感性高、特异性强,是一种能够快速有效的检测出猪PEDV-PDCOV单病毒感染或多病毒混合感染的临床诊断方法.

关键词: PEDV PDCOV RT-PCR 临床诊断

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