科研产出
影响小鼠转基因原核胚体外发育的若干因素
《中国兽医学报 》 2001 北大核心 CSCD
摘要:探讨了显微注射不同浓度的外源 DNA以及温度、培养基等对小鼠原核胚体外培养发育能力的影响。显微注射 1 .5、1 5、3 0 mg/L的衰变加速因子 ( CD55)、膜反应溶解因子 ( CD59)基因后 ,小鼠原核胚发育到囊胚的比率随 DNA质量浓度的升高而依次降低为 57.7%、3 6.6%、1 0 .4 % ,差异极显著 ( P <0 .0 1 )。注射 1 .5mg/L外源 DNA,原核胚的囊胚率 ( 57.7% )比对照组 ( 54.5% )稍有提高 ,但差异不显著 ( P >0 .0 5)。 1 .5mg/L为本试验最佳外源 DNA注射质量浓度。 3 7℃、CZB培养液或改进的 Whitten氏培养液 ,可取得较好的体外培养效果。


产肠毒素性大肠杆菌K99菌毛蛋白抗原基因的克隆与表达
《中国兽医学报 》 2001 北大核心 CSCD
摘要:应用 PCR从产肠毒素性大肠杆菌 ( ETEC)中扩增出不含信号肽序列的 K99菌毛蛋白基因片段 ,克隆测序后 ,将该片段连接到 E.coli表达载体 p ET2 8a( + )中 ,转化 E.coli表达菌株 BL2 1 ( DE3) ,筛选得到可诱导表达 K99抗原的工程菌株。经 IPTG诱导 ,分离纯化 K99重组蛋白 ,以其免疫新西兰大白兔 ,获得重组蛋白的兔抗血清 ;免疫印迹分析表明 ,此重组蛋白制备的抗血清能与标准的 K99强毒株发生明显的抗原抗体反应
关键词: 产肠毒素性大肠杆菌 K99 基因克隆 K99菌毛蛋白抗血清


云芝子实体多糖(CVP)化学结构的研究III.
《菌物系统 》 2001 北大核心 CSCD
摘要:通过化学、IR和UV光谱等方法发现云芝子实体的热水提取物 CVP 是由多糖、核酸和蛋白质等组成的混合物。通过柱层析方法从 CVP 中纯化出一个多糖组份 B-2-3,经完全水解证实组成它的单糖残基主要为Glc。用 HPLC 方法测得其分子量为 5.01×105。通过对甲基化及 1H 和 13C NMR 数据的分析发现 B-2-3 为一个以β-D-1, 4-Glc、β-D-1, 3-Glc 和β-D-1, 6-Glc 残基构成主链,同时在β-D-1, 3, 6-Glc 及β-D-1, 4, 6-Glc 处产生分枝的多糖。


红壤丘陵区不同土地利用方式下有机碳储量的比较研究
《资源科学 》 2001 北大核心 CSCD
摘要:以中国科学院千烟洲试验站为例 ,通过实测对比分析了红壤丘陵在开发 1 4a后 ,不同土地利用方式下有机碳储量的变化。结果表明 ,在湿地松和杉木林地系统中有机碳储量较高 ,主要储存于植物活体和凋落物 ;受人为活动干扰强烈的农田及人工草地系统有机碳储量较低 ,主要储存于土壤。土地利用方式对陆地生态系统碳循环有重要影响 ,调整土地利用方式成为人类调节大气含碳温室气体的一条重要途径


苏云金芽孢杆菌cryIA(c)Bt基因的合成及其在大肠杆菌中稳定表达
《生物化学与生物物理学报 》 2001 SCI 北大核心 CSCD
摘要:选用荧光假单胞菌偏爱密码 ,设计长 90bp左右的寡核苷酸引物 ,采用连续延伸PCR方法 ,合成了全长1.8kb的苏云金芽孢杆菌cryIA(c)Bt基因。合成基因消除了潜在的 polyA加尾序列、mRNA不稳定序列以及发夹结构。和Perlak[1] 发表的序列相比 ,合成的cryIA(c)Bt基因改动了 6 14个核苷酸 ,G +C的含量从 37.2 %上升到6 4%。将合成基因由tac启动子调控 ,构建成Bt表达载体 pYPBts,转化大肠杆菌后 ,在菌体内大量合成 6 6kD大小的蛋白质分子 ,其含量占菌体总蛋白质的 30 %。生物测定结果表明 ,表达的蛋白质对菜青虫三龄幼虫有很高的杀灭活性 ,LD50 为 0 .0 2 4μg/cm2 。
关键词: 化学合成 cryIA(c)Bt 基因表达 杀虫活性

