科研产出
低蛋白饲粮添加Glu和Arg对断奶仔猪肠道代谢产物与菌群的影响
《福建农业学报 》 2023 CSCD
摘要:【目的】探讨较大程度降低饲粮粗蛋白质(Crude protein,CP)水平后添加必需氨基酸、谷氨酸和精氨酸对断奶仔猪肠道代谢产物和微生物菌群的影响。【方法】试验选用192头、日龄(26±2) d的健康“杜长大”三元杂交断奶仔猪,平均初始体重为(6.96±0.29) kg,随机分成4个处理组,每组6个重复,每个重复8头猪,试验期16 d。组I为对照组,饲粮CP水平为21.16%;组II为低CP饲粮组,饲粮CP水平为15.97%,补充必需氨基酸(L-赖氨酸、 DL-蛋氨酸、 L-苏氨酸、 L-色氨酸、 L-缬氨酸、 L-异亮氨酸);组III在组II基础上添加1.50%谷氨酸(Glu);组IV在组II基础上添加1.50%Glu和1.00%精氨酸(Arg)。于正式试验期第11~13 d测定各处理断奶仔猪肠道代谢产物成分及微生物群落组成。【结果】组II、组III和组IV断奶仔猪粪样腐胺和亚精胺含量均显著低于组I(P<0.05),组II、组III和组IV间差异不显著(P>0.05),尸胺含量组II和组III显著低于组I和组IV(P<0.05),组I显著低于组IV(P<0.05),组II和组III间差异不显著(P>0.05)。粪样乙酸和丙酸含量各组间差异不显著(P> 0.05),丁酸含量组II、组III和组IV显著高于组I(P<0.05),组II、组III和组IV间差异不显著(P>0.05)。仔猪肠道菌群丰富度和多样性组II、组III和组IV显著高于组I(P<0.05)。仔猪粪样菌群组成在门分类水平上,组II、组III和组IV厚壁菌门(Firmicutes)相对丰度显著高于组I(P<0.05),拟杆菌门(Bacteroidetes)和变形菌门(Proteobacteria)相对丰度显著低于组I(P<0.05)。在科属分类水平上,各组菌群组成亦有较大差异,组II、组III和组IV梭菌目下未明确的科和梭菌目下未明确的属相对丰度显著高于组I(P<0.05),普雷沃氏菌科(Prevotellaceae)、肠杆菌科(Enterobacteriaceae)和丁酸球菌属(Lachnospiraceae)相对丰度显著低于组I(P<0.05),组IV毛螺菌科(Lachnospiraceae)、乳杆菌科(Lactobacillaceae)和布劳特氏菌属(Blautia)、乳杆菌属(Lactobacillus)相对丰度显著高于组I(P<0.05),组IV消化链球菌科(Peptostreptococcaceae)和土孢杆菌属(Terrisporobacter)相对丰度显著低于组I(P<0.05)。【结论】将饲粮CP水平从21.16%降低至15.97%,平衡重要必需氨基酸并补充Glu+Arg,能降低断奶仔猪肠道生物胺含量,提高丁酸含量,增加肠道菌群多样性和丰富度,影响肠道菌群组成。
关键词: 低蛋白质饲粮 谷氨酸 精氨酸 肠道代谢产物 菌群 断奶仔猪
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新型番鸭细小病毒Rep蛋白羧基端亚片段的原核表达及多克隆抗体制备
《福建农业学报 》 2023 CSCD
摘要:【目的】获得特异性识别新型番鸭细小病毒(New-genotype muscovy duck Parvovirus,N-MDPV)Rep蛋白羧基端亚片段的多克隆抗体。【方法】通过蛋白序列分析,选取N-MDPV Rep羧基端亚片段区域487~627 aa,后全基因合成序列,并在其C末端添加His-tag标签,利用无缝克隆的方法,将该段基因克隆至pET-28a(+)载体,随后转化Rosetta(DE3)大肠杆菌,诱导表达得到重组蛋白。利用镍柱亲和层析技术纯化表达重组蛋白,将纯化的重组蛋白免疫新西兰白兔,制备针对Rep蛋白羧基端亚片段的多克隆抗体。【结果】构建了pET-28a-Rep-487-627原核表达质粒,纯化表达了该重组蛋白。SDS-PAGE结果表明该重组蛋白分子大小约24 kDa,主要以可溶性形式表达。间接免疫荧光和免疫印迹试验表明制备的多克隆抗体能与细胞内过表达的N-MDPV Rep蛋白特异性反应。【结论】制备的Rep多克隆抗体具有良好反应特异性,可识别Rep蛋白的构象表位和线性表位,满足进一步研究的需要。
关键词: 新型番鸭细小病毒 Rep蛋白 间接免疫荧光试验 免疫印迹试验
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酚酸介导下连作茶树根际病原菌Alternaria sp.及其拮抗菌Pseudomonas sp.变化
《茶叶科学 》 2023 北大核心 CSCD
摘要:茶树是我国重要的经济作物,然而长期宿根连作铁观音茶园存在土壤微生物群落结构失衡、病害加重等连作障碍问题,探究铁观音茶树连作障碍形成的分子机制对寻求有效的防控技术具有重要意义.采用微生物分离纯化、平板对峙等方法对铁观音茶树根际病原菌及其拮抗菌进行分离、鉴定,并对不同宿根连作年限(0、1、10、20 a)铁观音茶树根际土壤中的病原菌和拮抗菌数量进行定量分析;同时运用高效液相色谱(HPLC)技术分析不同连作年限根际土壤中酚酸含量变化,并模拟土壤中各酚酸配比,研究酚酸类物质对茶树根际病原菌及其拮抗菌的影响.结果显示,从连作20 a患病铁观音茶树根系分离鉴定到1株病原真菌链格孢菌(Alternaria sp.),并从根际土壤中筛选到1株拮抗菌假单胞菌(Pseudomonas sp.).荧光定量PCR分析发现,与1 a茶园相比,20 a茶园土壤中的链格孢菌绝对含量显著偏高,而假单胞菌含量却显著偏低.连作茶园根际土壤中共检测到对羟基苯甲酸、香草酸、丁香酸、香兰素、阿魏酸5种酚酸类物质,其平均配比为38∶229∶11∶11∶3.连作条件下酚酸类物质并未在土壤中累积,而是随种植年限的延长呈现出先增加后降低的趋势.模拟试验发现,中低浓度(30~120μmol·L-1)的混合酚酸能够显著促进链格孢菌菌丝的生长,单一酚酸对羟基苯甲酸、香草酸和丁香酸在低浓度(30μmol·L-1和60μmol·L-1)时也能够显著促进链格孢菌菌丝的生长.对羟基苯甲酸对假单胞菌的生长有抑制作用,并且随着浓度的增加抑制作用增强,混合酚酸以及其他单一酚酸对假单胞菌的生长无明显作用.由此可见,铁观音根系分泌物酚酸类物质对根际土壤关键微生物菌群具有不同的生态效应,是引起微生物群落结构失衡、病害增加等连作障碍问题的重要因素.研究结果为进一步揭示铁观音茶树连作障碍机理提供一些理论依据.
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海岛型城市红火蚁发生程度空间格局及驱动因子-以福建海坛岛为例
《生物多样性 》 2023 北大核心 CSCD
摘要:红火蚁(Solenopsis invicta)是极具危险性的外来入侵物种,研究海岛在城市化发展中红火蚁发生程度的空间格局及驱动因子,对保护海岛生态安全具有重要意义。本研究以福建省东部的海坛岛为例,运用核密度、空间自相关模型分析红火蚁发生程度空间格局,进一步运用地理探测器揭示环境因子(8种)、社会经济因子(10种)以及两类因子交互作用对红火蚁发生程度的影响。结果显示:研究区红火蚁发生程度空间密度表现为不均匀聚集特征,农田发生程度最为严重(高-高聚集)、园林绿化用地次之(高-低聚集和低-低聚集)、居民区周边最轻,且发生区域呈现正向空间自相关关系。18种影响因子对红火蚁发生程度空间分异解释度的q值范围为0.014–0.278。从整体上看,两类因子对红火蚁发生程度的影响存在差异,且社会经济因子q值平均数高于环境因子。对红火蚁发生程度影响最大的经济因子是农村人口数量(q=0.278),其次为乡镇面积(q=0.268)。在环境因子中,土壤类型(q=0.172)和年均降水量(q=0.149)的影响力较强。环境因子与社会经济因子两两叠加作用都将正向增强红火蚁的发生程度,其中,乡镇面积与邻近景区距离、年均降水量与邻近景区距离两组因子交互作用对红火蚁发生程度的影响力最大(q=0.466)。本研究结果表明农业耕作、城镇化建设中绿化苗木引种、道路交通运输对海岛型城市红火蚁发生程度的空间格局起到关键性作用。因此,在防控中不仅要加强对调运苗木和往来货物的检疫,还应采取因地适宜的防控措施,有效抑制红火蚁种群数量和扩散速度。
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叶菜型甘薯叶绿体基因组及其特征分析
《西南大学学报(自然科学版) 》 2023 北大核心 CSCD
摘要:为探明叶菜型甘薯叶绿体基因组特征及其与番薯属植物的亲缘关系,以叶菜型甘薯‘福菜薯18号’为试验材料,利用BGISEQ-500平台和Oxford Nanopore Technologies单分子测序技术对全基因组进行建库测序,并组装其叶绿体基因组.结果显示:叶菜型甘薯叶绿体基因组全长161 387 bp,具有典型的环状四分体结构,其大单拷贝区(large single copy, LSC)、小单拷贝区(small single copy, SSC)和2个反向重复序列(inverted repeat, IR)的长度分别为87 597, 12 052和30 869 bp.注释共得到132个基因,包含87个蛋白编码基因,8个rRNA基因,37个tRNA基因.在叶菜型甘薯叶绿体基因组中共搜索到54个SSR位点,其中单核苷酸、二核苷酸、三核苷酸、四核苷酸、五核苷酸和六核苷酸重复基序个数分别为32, 4, 3, 11, 2和2个.系统进化分析表明,叶菜型甘薯与甘薯四倍体野生种Ipomoea tabascana和二倍体野生种Ipomoea trifida具有较近的亲缘关系.
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细胞自噬在细小病毒感染中的作用机制研究进展
《中国兽医学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要:自噬是真核细胞中常见的一种保守的溶酶体分解代谢途径,对宿主代谢至关重要。其主要功能包括饥饿时的能量守恒、细胞器的循环和长寿蛋白质的正常周转。自噬在清除细胞内病原体方面起着关键作用,很可能是一种原始的内在细胞防御机制。最近的研究表明,自噬在病毒感染过程中起着复杂的多向作用,它不仅保留了降解细胞内病原体的能力,还具有增强和微调抗病毒免疫反应的功能。然而,一些病毒也进化出各种机制以逃避自噬降解,促进其自身的复制和释放。本文综述了自噬与病毒感染相互作用的研究进展,强调了自噬与细小病毒之间的分子相互作用,为抗病毒药物及疫苗研发提供理论基础,从而为细小病毒的防控提供新思路。
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半番鸭及番鸭性腺微生物区系差异分析
《中国畜牧杂志 》 2023 北大核心 CSCD
摘要:本研究旨在揭示属间杂交品种半番鸭及父本番鸭性腺样本中微生物物种构成和群落结构的差异.分别采集 200 日龄雄性番鸭和半番鸭 3 个性腺组织进行 16S rRNA扩增子测序、物种注释以及丰度分析,并进行菌群代谢功能预测.结果表明:变形菌门(Proteobacteria)为鸭性腺中优势菌群,假单胞菌属(Pseudomonas)为优势菌属,假单胞菌科均为优势菌科,双歧杆菌(Bifidobacterium)和小杆菌属(Dialister)分布存在差异,主要差异为双歧杆菌科(Bifidobacteriaceae)和韦荣菌科(Veillonellaceae).假杆菌(Pseudarthrobacter)、芽生球菌属(Blastococcus)、粘球菌科(Myxococcaceae)、白头翁科(Trueperaceae)、地嗜皮菌科(Geoderm atophilaceae)等下调(P<0.05),即在半番鸭中低表达,毛螺菌属(Lachnospira)、假心菌科(Pseudonocardiaceae)上调(P<0.05),即在半番鸭中高表达,推测乳酸杆菌科(Lactobacillaceae)和奈瑟菌(Neisseria)可能影响鸭性腺发育.KEGG功能注释显示,差异微生物主要参与L-异亮氨酸生物合成I(L-isoleucine biosynthesis I)、L-缬氨酸生物合成(L-valine biosynthesis)和CDP-二酰基甘油生物合成I(CDP-diacylglycerol biosynthesis I)等功能,涉及到多种氨基酸的合成通路.综上所述,鸭性腺中存在微生物群落,其中变形菌门、假单胞菌属、假单胞菌科为优势菌群,半番鸭及其父本番鸭性腺微生物区系存在一定差异,假杆菌、粘球菌科和地嗜皮菌科等在半番鸭中显著低表达,毛螺菌属和假心菌科在半番鸭中显著高表达,乳酸杆菌科(Lactobacillaceae)和奈瑟菌(Neisseria)可能影响鸭性腺发育.
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茶树黄化种‘天山黄芽’的广泛靶向及靶向代谢组学分析
《应用与环境生物学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要:茶树黄化品种具有较高的营养价值和观赏性,是茶树特色新品种选育的重要目标.为探究两份新黄化茶树的特征代谢物,采用广泛靶向及靶向代谢组学测定‘天山黄芽1号’‘天山黄芽2号’以及‘福鼎大白茶’芽叶的主要生化成分和代谢物.结果显示,在‘天山黄芽1号’‘天山黄芽2号’和‘福鼎大白茶’中鉴定出791种代谢物,其中52.34%-54.23%的代谢物在不同茶树中存在显著差异.KEGG富集分析表明,差异代谢物主要被富集在与氨基酸和黄酮生物合成等相关途径上.‘福鼎大白茶’‘天山黄芽1号’和‘天山黄芽2号’的氨基酸总量分别为46.29±1.72、73.91±1.55和81.36±1.45 mg/g,儿茶素总量分别为101.99±8.50、94.06±9.94和74.43±4.84 mg/g.与对照种‘福鼎大白茶’相比,‘天山黄芽1号’和‘天山黄芽2号’黄酮含量较低,氨基酸含量高,尤其是茶氨酸含量高达52.34 mg/g和53.99 mg/g.综上,‘天山黄芽1号’和‘天山黄芽2号’属于高茶氨酸茶树资源;结果可为其选育利用提供数据支撑.(图5表1参30)
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草地贪夜蛾高致病力绿僵菌菌株的筛选与鉴定
《环境昆虫学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要:为获取对草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda具有高致病力的生防真菌,从福建省不同地区分离得到8株寄主为鳞翅目和半翅目幼虫僵虫的绿僵菌Metarhizium,采用浸渍法测定了其对草地贪夜蛾2龄幼虫和蛹的致病力,并根据形态学和分子生物学方法对高致病力菌株进行种类鉴定.结果表明,8株绿僵菌菌株对草地贪夜蛾2龄幼虫和蛹均表现出不同程度的致病力,其中菌株FJMR2和FJXY7表现出较强的致病力.在5 × 107个/mL孢子浓度下,FJMR2和FJXY7对草地贪夜蛾2龄幼虫的致死率分别为88.76%和82.13%,对蛹的致死率分别为86.57%和84.00%;对草地贪夜蛾2龄幼虫的LT50分别为4.81 d和4.93 d,对蛹的LT50分别为4.94 d和4.83 d.经鉴定菌株FJMR2和FJXY7均为莱氏绿僵菌Metarhizium rileyi.本研究获得2株对草地贪夜蛾2龄幼虫和蛹具有高致病力的莱氏绿僵菌菌株,在草地贪夜蛾的生物防治中具有较大应用潜力.
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基于形态标记与SRAP标记的莱豆种质资源遗传多样性分析
《福建农业学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要:【目的】探明莱豆种质资源遗传多样性和亲缘关系,为莱豆种质资源优良基因深度发掘和新品种选育提供科学依据。【方法】利用形态标记和SRAP分子标记两种方法对22份莱豆资源的26个数量性状和18个质量性状进行测定、分析。【结果】筛选出的28对SRAP引物扩增多态性条带158条,平均多态性比率为77.75%。两种标记方法聚类结果显示,根据莱豆荚果大小可以将22份莱豆资源分为三大类群体。其中,“上横山10-2-6”和“下横山10-3-3”亲缘关系较近,推测可能存在频繁的基因交流。【结论】22份莱豆资源遗传多样性丰富,形态标记和SRAP分子标记两种聚类方法基本支持根据荚果大小划分莱豆资源,为莱豆种质资源的创新利用奠定基础。
关键词: 莱豆 形态标记 SRAP分子标记 遗传多样性 亲缘关系
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