科研产出
猪圆环病毒4型Rep蛋白原核表达及多克隆抗体制备
《中国畜牧兽医 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【目的】应用原核表达系统表达猪圆环病毒4型（Porcine circovirus type 4,PCV4）复制酶蛋白（Rep）,纯化后免疫小鼠制备Rep蛋白多克隆抗体。【方法】以PCV4福建株（FJ2020001）为模板，采用PCR法扩增获得Rep基因片段，构建原核表达质粒pET-30a-Rep;将pET-30a-Rep转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞，用0.5 mmol/L IPTG诱导表达重组Rep蛋白，利用SDS-PAGE和Western blotting鉴定重组蛋白。表达产物经镍柱纯化后免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体，利用Western blotting和间接ELISA鉴定鼠源多克隆抗体的免疫原性和抗体效价。【结果】成功克隆PCV4 Rep基因，构建了可表达重组Rep蛋白的原核表达质粒；SDS-PAGE结果显示，表达的重组蛋白分子质量约为35 ku,主要以包涵体形式存在；Western blotting结果表明，该蛋白能被PCV4阳性血清和鼠源多克隆抗体特异性识别，制备的鼠源多克隆抗体效价可达1∶16 000。【结论】本研究成功表达并纯化了具备抗原性的PCV4重组Rep蛋白，为开发PCV4血清学诊断试剂盒和开展猪场PCV4流行病学调查奠定基础。
关键词： 猪圆环病毒4型（PCV4） Rep蛋白 原核表达 多克隆抗体
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福建省多叶重楼资源调查与分析
《中国野生植物资源 》 2023 CSCD
摘要：目的:探清福建省多叶重楼野生资源及栽培现状,研究其形态遗传多样性,为重楼优良种质筛选提供基础数据.方法:通过文献查阅、访查和野外实地调查等方法,考察福建省多叶重楼资源分布、生态环境及栽培现状.对9个多叶重楼资源的13个形态性状进行变异系数分析、主成分分析及聚类分析.结论:调查发现福建省多叶重楼野生资源稀少,多分布于湿润且隐蔽度较大、通风性好的地带;多叶重楼原始生境伴生喜阴植物.形态多样性分析表明不同资源间变异系数从10.14%~48.05%,综合结果显示花瓣宽等性状是造成表型差异的主要因素.福建省野生重楼资源蕴藏量下降严重,相关部门应加强重楼野生资源保护和大力推广人工种植.
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紫云英还田对黄泥田土壤理化和微生物特性及水稻产量的影响
《生态学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为探明紫云英连年还田化肥减施单季稻田土壤性质及水稻产量的变化规律，依托位于福建省东部12年黄泥田紫云英-单季稻轮作定位试验，研究了不施肥（C0）、单施化肥(C100)、紫云英还田（M）、紫云英还田+全量化肥(MC100)及紫云英还田+减量20%化肥(MC80)处理的土壤理化性状、微生物群落结构和功能及稻谷产量的变化。结果表明：C100、M、MC100、MC80处理土壤有机碳含量比C0分别提高6.97%、15.05%、10.38%、11.15%,全氮分别提高9.52%、18.25%、15.87%、15.87%,硝态氮分别提高6.51%、69.52%、66.87%、78.19%（P＜0.05）。冗余分析表明，土壤有机碳、全氮、硝态氮含量对细菌和古菌群落结构和功能有显著的影响。与C0相比，C100、M、MC100和MC80处理土壤慢生根瘤菌属（Bradyrhizobium）丰度分别增加0.52%、24.30%、7.59%、11.93%,其中M处理增加达显著水平（P＜0.05）;分枝杆菌属（Mycobacterium）分别增加5.51%、21.58%、10.00%、14.74%,其中M处理增加显著（P＜0.05）;亚硝化杆菌属（Candidatus＿Nitrosotalea）分别增加22.93%、17.21%、65.39%、89.89%,其中MC100和MC80处理增加均达显著水平（P＜0.05）。相比C0,M、MC100和MC80处理土壤链霉菌属（Streptomyces）分别增加6.76%、16.89%、12.16%,其中MC100处理增加显著（P＜0.05）,而C100却减少2.50%。物种贡献度分析发现，土壤碳代谢和氨基酸合成的主要功能微生物为细菌慢生根瘤菌属（Bradyrhizobium）、分枝杆菌属（Mycobacterium）、链霉菌属（Streptomyces）和古菌亚硝化杆菌属（Candidatus＿Nitrosotalea）。M、MC100、MC80处理稻谷产量比C0分别增加9.68%、19.16%、18.72%。阐明紫云英培肥处理能提升单季稻黄泥田土壤肥力水平，调节土壤微生物群落结构，促进土壤碳水化合物和氨基酸代谢。
关键词： 黄泥田 紫云英 理化性质 微生物群落结构和功能
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广叶绣球菌不同生长阶段栽培基质中代谢物差异分析
《微生物学通报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【背景】栽培基质的利用是广叶绣球菌（Sparassis latifolia）栽培中重要的生理过程，但栽培过程中基质代谢物的变化尚不清楚。【目的】通过不同生长阶段栽培基质中差异代谢物分析挖掘关键代谢物，为广叶绣球菌基质利用机理研究提供理论参考。【方法】利用UHPLC-MS/MS技术分析广叶绣球菌菌丝（Myc）、原基（Pri）和子实体（FB）生长阶段栽培基质中代谢产物的变化，通过不同数据库进行代谢物注释并进行KEGG通路富集分析。利用LC-MS/MS技术检测不同发育阶段绣球菌中植物类激素含量。【结果】三个不同栽培阶段基质中共鉴定出代谢产物1 360个。不同比较组（Pri vs. Myc、FB vs. Myc和FB vs. Pri）间共有的差异代谢产物179个，含量最高的50个代谢物主要包括氨基酸、脂质、吡喃酸、吡喃酮和植物类激素等物质。其中氨基酸含量在Myc、Pri和FB阶段基质中逐渐降低，而吡喃酸和吡喃酮类化合物含量逐渐升高。植物类激素中的赤霉素在Pri和FB阶段基质中含量较高，茉莉酸在Myc阶段基质中含量较高。对不同发育阶段绣球菌植物类激素进行检测，发现赤霉素GA7仅在原基中检测到，12-氧代植物二烯酸在子实体中含量显著升高。不同比较组所有的差异代谢物KEGG分析显示嘌呤代谢、鞘脂信号通路和甘油磷脂代谢等通路显著富集。【结论】氨基酸是Myc阶段基质中重要的代谢物，吡喃酸、吡喃酮和植物类激素可能与Pri和FB阶段基质利用过程中的生理生化调控有关。
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秀珍菇多肽的制备及其抗氧化活性
《福建农林大学学报(自然科学版) 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：以多肽得率为指标，酶解秀珍菇蛋白质制备多肽，通过正交试验优化制备工艺.正交试验结果表明，酶解各因素对秀珍菇多肽得率影响程度的大小为：pH＞时间＞温度＞酶浓度；确定的最佳酶解工艺参数为：pH 11、时间1.5 h、温度55℃、碱性蛋白酶浓度6 000 U·g-1,制备的多肽得率为70.96%;体外抗氧化能力测定结果表明：2.5 mg·mL-1秀珍菇多肽对DPPH、ABTS+和羟基自由基的清除率分别为81.57%、99.81%、98.84%;SDS-PAGE检测结果表明，秀珍菇多肽的分子质量约为5.8 ku;氨基酸分析结果表明，秀珍菇多肽含有8种必需氨基酸，占氨基酸总量的43.2%.综上，在最佳酶解工艺下制备的秀珍菇多肽具有分子质量低且抗氧化能力强的特点.
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福建太子参黑斑病病原菌鉴定及生物学特性研究
《中国中药杂志 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：福建省柘荣县太子参黑斑病常于每年4—6月份的多雨季节暴发，为太子参的主要叶部病害之一，对该药材的产量和质量造成严重影响。为明确太子参黑斑病的病原菌种类及其生物学特性，该研究依据柯赫法则对病原菌分离纯化，采用形态学特征观察及多基因序列分析进行鉴定，鉴定为链格孢属致病真菌并进行致病性测定及生物学特性测定。鉴定结果表明：引起该黑斑病的病原菌为梨黑斑链格孢Alternaria gaisen。其菌落形态、孢子特征以及产孢表型特征与梨黑斑链格孢A.gaisen类似，且由ITS、tef1、gapdh、endoPG、Alta1、OPA10-2和KOG1077这7个组成的串联序列在20个链格孢属真菌的系统发育树上与梨黑斑链格孢A.gaisen聚为一支，最大似然支持率为100%,贝叶斯后验概率1.00。生物学特性表明：梨黑斑链格孢A.gaisen的菌丝生长的最适温度为25℃,最适pH为5～8,最适培养方式为24 h暗培养，菌丝和孢子致死温度均为50℃处理10 min。由A.gaisen引起的太子参黑斑病为国内外首次报道，该研究结果可为太子参叶斑类病害的诊断及防控提供理论依据。
关键词： 太子参 黑斑病 梨黑斑链格孢 多基因序列分析 生物学特性
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橄榄果实转录组SSR和SNP/InDel位点特征
《热带作物学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：简单重复序列标记（simple sequence repeats, SSR）和单核苷酸多态性标记（single nucleotide polymorphism, SNP）具有高灵敏度和高特异性特征，挖掘不同类型橄榄果实性状相关分子标记可为其分子辅助育种提供参考。本研究以充分成熟的长营和惠圆橄榄果实为材料，经总RNA提取和cDNA文库构建后采用Illumina Novaseq平台进行转录组测序，并采用MISA 1.0和GATK3软件分析转录组的SSR、SNP和插入缺失标记（Indel）位点特征。结果在橄榄果实转录组的10 124条unigenes上鉴定到13 935个SSR位点，发生频率为22.98%，平均每1 kb序列出现0.25个SSR位点，平均长度为14.34 bp；其中，单碱基重复基元类型的SSR位点数量最多（占比66.80%），长度为10～64 bp，平均长度为12.85 bp，重复基元的重复次数集中在9～12次，频率最高的基元为A/T（占比66.67%）；六碱基重复基元类型的SSR位点数量最少（占比0.47%），长度为30～54 bp，平均长度31.76 bp，基元重复次数集中在5～8次，频率最高的基元为AGATGG/ATCTCC（占0.04%）。在橄榄果实转录组中共检测到284 992个SNP位点，平均每1 kb序列含有5.21个；其中，转换类型的SNP位点数量为166 162，包括C/T和A/G两种；颠换类型的SNP位点数量为118 830，包括A/T、A/C、T/G和C/G四种。此外，橄榄果实转录组中共挖掘到18 548个InDel位点，平均每1 kb序列存在2.95个，其中含有1个InDel位点的unigenes数量最多（7853条）；通过比对预测发现，含有最多InDel位点的unigene可能是胼胝质合成酶基因。研究结果表明，通过转录组测序可有效开发橄榄SSR和SNP/InDel标记，不同性状橄榄果实中存在丰富多样的SSR位点且广泛分布SNP/InDel位点。该研究结果为橄榄果实性状鉴定标记的开发提供数据基础。
关键词： 橄榄 转录组 简单重复序列 单核苷酸多态性 插入缺失标记
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长期轮作施肥对菜田土壤pH值的影响及灰色预测模型研究
《核农学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为探讨长期轮作施肥对菜田土壤pH值变化特征的影响，在闽东南蔬菜主产区连续进行7年四季豆-芥菜-早稻/豇豆轮作结合推荐施肥/习惯施肥模式的一年三熟制定位试验。根据试验年限内土壤pH实测值，构建土壤pH值变化灰色预测模型，分析不同轮作施肥模式对土壤pH值的影响及其变化趋势。结果表明，在7年定位试验期间，菜-菜-稻轮作结合推荐施肥处理（VR+RF）的土壤pH均值为5.24，显著高于菜-菜-菜连作结合推荐施肥（VV+RF）或习惯施肥（VV+FP），但与菜-菜-稻轮作结合习惯施肥处理（VR+FP）无显著差异。TPGM（1,1）灰色模型分析显示，VR+RF处理的土壤酸化速率均值为0.065个pH/年，但VV+RF、VR+FP和VV+FP三个处理的土壤酸化速率均值分别是VR+RF处理的2.077、1.215和2.231倍。灰色预测还表明，未来5年菜-菜-稻轮作结合推荐施肥和习惯施肥土壤pH均值将比基础土壤分别下降0.56和0.67个pH单位；菜-菜-菜轮作结合推荐施肥和习惯施肥土壤pH均值则将比基础土壤pH值分别下降1.05和1.13个pH单位。综上，菜-菜-稻轮作结合推荐施肥的生产模式是减缓当地菜田土壤酸化的有效耕作管理措施，对菜田土壤培肥具有重要生产价值。本研究结果为耕地土壤酸化改良提供了科学依据。
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抗感玉米自交系对小斑病菌早期侵染反应的转录组分析
《农业生物技术学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：玉米小斑病是世界玉米(Zea mays)产区重要的一种叶部真菌性病害,不同遗传背景的玉米品种对小斑病的抗性存在明显差异.为探明玉米对小斑病菌(Cochliobolus heterostrophus)早期侵染反应的分子机制,本研究采用比较转录组测序技术对小斑病菌接种12和24 h后的抗病自交系'Mo17-R'和感病自交系'罗31-S'的测序数据进行了分析.结果表明,接种病原菌后,'Mo17-R'和'罗31-S'分别共有11416和11027个差异表达基因.通过GO功能富集和KEGG代谢途径分析,发现两个玉米自交系在GO分类的细胞、细胞部分、细胞器、膜、结合、催化活性、代谢过程、细胞过程和单有机物过程中被富集的差异表达基因较多;而在苯丙烷类生物合成、信号传导、植物-病原菌互作、淀粉和蔗糖代谢途径中也富集较多的差异表达基因.其中,与抗病相关的富集途径中,苯丙烷类生物合成、植物激素信号传导、植物-病原菌互作为'Mo17-R'和'罗31-S'两个自交系中差异基因共同显著富集的途径,而参与萜类合成途径的基因仅在感病自交系'罗31-S'中获得显著富集.此外,发现过氧化物酶、肉桂醇脱氢酶、乙烯应答转录因子、环核苷酸门控离子通道、细胞色素P450等相关基因在抗病自交系'Mo17-R'中被显著诱导上调表达,而在感病自交系'罗31-S'中基因诱导表达倍数低于抗病自交系或下调表达,提示这些基因在抗病玉米抵抗小斑病菌的早期侵染中发挥重要作用.本研究结果为深入探讨玉米和小斑病菌互作及玉米抗病分子机制提供重要的理论基础.
关键词： 玉米 小斑病菌 转录组 基因表达 互作机制 抗病性
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替代饲料饲养对红肩瓢虫捕食作用的影响
《中国生物防治学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为了研究替代饲料饲养对红肩瓢虫Harmonia dimidiata Fabricius捕食作用的影响,本文以地中海粉螟卵Ephestia kuehniella Zeller加水或蜂蜜水饲喂红肩瓢虫至成虫,测定其对豆蚜Aphis craccivora Koch的捕食功能反应和寻找效应.研究表明:各处理红肩瓢虫对豆蚜的捕食功能反应类型均属于 Holling-Ⅱ型.同一猎物密度下,理论日最大捕食量、控害效能(a/Th值)、搜寻效应由高到低均为对照组(豆蚜)处理,地中海粉螟卵加蜂蜜处理,地中海粉螟卵加水处理,但红肩瓢虫同性别间的实际日捕食量均无显著性差异.经分析,地中海粉螟卵的饲喂不影响红肩瓢虫的捕食功能反应类型,也基本不影响对豆蚜的捕食能力,而适当添加蜂蜜可提高红肩瓢虫对豆蚜的捕食能力,生产中可使用地中海粉螟卵加适量蜂蜜来扩繁红肩瓢虫.在无竞争状态下,饲喂地中海粉螟卵加蜂蜜的红肩瓢虫雌、雄成虫对豆蚜的最佳寻找密度为 101.78、90.2,在此蚜虫密度下,红肩瓢虫可发挥最大捕食效能,可作为田间应用的益害比例参考.
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