科研产出
猪鼻支原体黏附宿主细胞间接免疫荧光检测方法的建立
《中国人兽共患病学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：目的猪鼻支原体是临床猪场的常见病菌,可引起猪多发性浆膜炎、肺炎、关节炎、中耳炎等慢性炎症,同时其与多种人类肿瘤有明显相关性,但其致病机理有待深入,其感染细胞机制的研究尚未明确,因此,本研究欲建立一种用间接免疫荧光技术检测猪鼻支原体黏附宿主细胞的方法。方法以猪鼻支原体和猪肾上皮细胞为研究对象,以兔抗猪鼻支原体纯化抗体为一抗,以FITC标记的羊抗兔IgG为二抗,通过反应条件的优化,建立猪鼻支原体黏附宿主细胞的间接免疫荧光检测方法(IFA)。结果最终确定最小黏附滴度为1∶107 CCU/mL,猪鼻支原体黏附PK15所需时间为6h以上,一抗的最佳工作浓度为1∶100,二抗的最佳工作浓度为1∶1 600。结论表明间接免疫荧光技术可以用来检测猪鼻支原体对宿主细胞的黏附作用。为猪鼻支原体的研究特别是感染细胞机制的体外研究提供基础方法,同时为疾病的诊断及疫苗的研发奠定基础。
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猪肺炎支原体对上皮细胞氧化损伤的分析
《畜牧兽医学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：分析猪肺炎支原体致病株168和弱毒株168L对上皮细胞的氧化损伤。用猪肺炎支原体168和168L株体外感染猪肺泡上皮细胞(SJPL),通过对感染细胞进行MTT和NO检测,筛选感染时间和感染剂量,利用间接免疫荧光(IFA)检测细胞上Mhp,通过H2O2和DAPI验证细胞损伤。结果:在5×106 CCU感染36h时,细胞活力相同,Mhp168株感染细胞的NO浓度显著高于Mhp168L株(P<0.05);H2O2检测显示Mhp168对细胞的氧化损伤显著高于Mhp168L株,同时都显著高于对照(P<0.01);IFA观察分析显示Mhp168株在细胞上的黏附量高于Mhp168L。DAPI染色显示Mhp168对细胞造成的损伤程度高于Mhp168L。通过优化感染时间和感染剂量,找到了猪肺炎支原体强弱毒株对上皮细胞损伤的显著差异点,分析了猪肺炎支原体强弱毒株对上皮细胞的氧化损伤,为深入研究猪肺炎支原体强弱毒株感染细胞的差异机制奠定了基础。
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Kiss-1基因多态性与苏淮山羊产羔数的关联分析
《畜牧兽医学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为了研究Kiss-1基因多态性与苏淮山羊产羔数之间的关系,本研究采用DNA池测序技术筛选苏淮山羊Kiss-1基因突变位点,采用AS-PCR和PCR-RFLP方法检测130只苏淮山羊Kiss-1基因突变位点的多态性,并分析其与产羔数的关联性。结果表明,在苏淮山羊内含子1中发现2个突变位点g.2270C>T和g.2510A>G,其中g.2510A>G位点有3种基因型AA、AG和GG,基因型频率分别为0.209、0.496和0.295;g.2270C>T位点在苏淮山羊中共检测3种基因型(CC、CT和TT),基因型频率分别为0.143、0.750和0.107。关联分析发现,g.2510A>G位点3种基因型在苏淮山羊各胎产羔数和平均产羔数间差异不显著,g.2270C>T位点中CC型的二胎产羔数显著高于CT和TT型(P<0.05)。单倍型分析发现,g.2510A>G和g.2270C>T位点在苏淮山羊群体中共构建8种单倍型,其中AGCT是主要的单倍型;各单倍型与苏淮山羊产羔数的关联分析发现仅AGCT单倍型的头胎产羔数与AACT单倍型的头胎产羔数间差异显著,其他单倍型在苏淮山羊的各胎产羔数间差异均不显著。综合以上研究表明,Kiss-1基因的g.2270C>T位点可能对苏淮山羊繁殖性状的选育具有一定的指导作用。
关键词： 苏淮山羊 Kiss-1基因 PCR-RFLP AS-PCR 单倍型 产羔数
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海滨雀稗液泡膜H~+-PPase(PvVP1)5′端的克隆和序列分析
《草业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：根据已公布液泡膜H+-PPase基因家族同源序列保守区设计简并引物,克隆出海滨雀稗中PvVP1基因的中间序列,然后用快速扩增cDNA末端(rapid amplification of cDNA end,RACE)方法,从海滨雀稗中克隆到PvVP15′cDNA序列。该序列ORF长1605bp,编码535个氨基酸,其编码序列、氨基酸序列与玉米相应基因的同源性分别为93%和99%。
关键词： 海滨雀稗 液泡膜H+-PPase RACE 耐盐
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枯草芽胞杆菌PTS-394的GFP标记及其定殖能力
《植物保护学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为探明枯草芽胞杆菌PTS-394在番茄根围的定殖能力,采用电转化法获得绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记菌株PTS-GFP,构建其生长曲线,采用对峙生长法评价其室内抑菌活性,并应用抗生素平板回收结合激光扫描共聚焦显微镜观察标记菌株在番茄根围的定殖数量。结果显示:与原始菌株PTS-394相比,标记菌株PTS-GFP的生长、对青枯病菌和4种病原真菌的室内抑菌能力无明显差异。标记菌株PTS-GFP和青枯病菌菌液单独或混合处理番茄苗,灌根当天标记菌株初始菌量接近108CFU/g,处理3 d后种群数量迅速下降,约106CFU/g,随后缓慢下降,处理10d后种群数量约104CFU/g,处理30 d后,标记菌株仍然能被检测到,约20 CFU/g。表明枯草芽胞杆菌PTS-394在番茄根际土壤中具有一定的定殖能力。
关键词： 枯草芽胞杆菌PTS-394 绿色荧光蛋白 定殖
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三个紫薯品种花青素和干物质积累动态及相关分析
《江西农业大学学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：利用3个紫薯品种为研究材料,分别测定栽插后60,75,90,105,120,135 d的块根花青素含量、干物率等16个经济性状指标,研究紫薯块根花青素和干物质积累的动态变化以及其与主要经济性状的相关性。研究表明:3个紫薯品种的块根花青素含量和干物率的动态变化因品种不同而表现较大差异,块根花青素含量表现为"前降后升"和"前升后降"两种类型;块根干物率则表现为"曲折上升"和"先升后降"两种类型。而3个品种的花青素总量和块根干物质总量在整个块根膨大期都表现为持续增加。块根花青素含量与15个经济性状指标的相关分析表明,3个品种的花青素含量主要与地上部分鲜质量指标呈显著负相关;与块根干物质含量指标呈显著正相关。
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城镇化加速发展背景下江苏农业现代化的动力机制
《江苏农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：以江苏城镇化加速发展为背景,以江苏率先实现农业现代化为目标,运用数据分析和文献调研的方法,从城镇化加速发展对江苏农业现代化的正、负效应两个方面探讨城镇化对农业现代化的影响,从稳定增加财政投入,引导鼓励社会资本的"投入推动型"和引导居民消费优质安全农产品,加大对农业加工业提升力度,发展休闲观光农业的"需求拉动型"两种类型阐述城镇化加速发展背景下江苏农业现代化动力机制。
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基于Web of Science近10年油菜研究态势分析
《中国农业科技导报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：基于2004-2013年间Web of Science的SCI-EXPANDED数据库收录的油菜相关论文(以油菜为主题词),分析了这一领域发文量年度变化趋势,以及影响力较高的国家/地区、科研机构、期刊、高被引论文等;根据Essential Science Indicators数据库,总结油菜研究前沿;并根据模糊综合评判方法,采用3种不同的权重,对文献计量学指标进行综合排序。结果表明:全世界对油菜研究的重视度在不断提高。总体看,美国、加拿大及德国、英国、法国等欧洲国家在油菜研究方面处于世界领先水平。加拿大、美国和中国科研机构发文量较大,但欧洲科研机构发文普遍质量较高,影响力较大;刊载油菜研究相关论文的优秀期刊和高被引论文均多来自欧洲国家和美国;油菜相关研究多集中在甘蓝型油菜、菜籽油、生物柴油和基因表达等方面。
关键词： 油菜 Web of Science 引用分析 文献计量 模糊综合评判 态势
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人工海水胁迫下小麦芽期和苗期的耐盐性鉴定方法
《植物生理学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：本文采用不同浓度人工海水分别在小麦芽期和苗期进行胁迫处理,筛选不同时期、不同耐盐指标的适合处理浓度,并利用模糊数学隶属函数法计算各指标的隶属值,通过比较芽期、苗期各指标隶属值总平均值的大小来确定小麦品种耐盐性的强弱。建立了65%人工海水相对发芽率与40%人工海水相对芽长两指标相结合的小麦芽期耐盐性鉴定方法;以及在40%人工海水处理下综合株高增长量、根长增长量、地上部干重与地下部干重4个指标相对值的小麦苗期耐盐性鉴定方法。运用这两个鉴定方法可以有效地区分16个小麦品种在人工海水胁迫下的耐盐性差异。
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