科研产出
水稻窄卷叶突变体nrl_(t)的遗传分析与基因定位
《华北农学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为发掘、定位和克隆水稻窄卷叶相关突变基因,揭示叶片发育机理。对武运粳7号条纹叶枯病抗性改良品系中发现的窄卷叶突变体进行了表型观察、遗传分析及基因定位。结果表明,与野生型相比,突变体在叶片形态发生改变的同时,其株高、分蘖性、穗长、枝梗数、每穗实粒数、穗粒数、结实率、千粒质量等农艺性状也存在显著差异。遗传分析表明,该突变性状受一对隐性基因控制。以500株辐恢838/nrl(t)的F2隐性单株为定位群体,利用SSR标记将NRL(t)基因定位于水稻第11染色体短臂末端RM11-01、RM11-11之间,物理距离约为160 kb的范围内。通过水稻基因组注释数据库分析发现,在该区域存在26个预测的基因,测序分析表明已报道的homeobox3A基因可能是潜在的候选基因,这为进一步研究该基因奠定了基础。
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gga-miR-9*对传染性法氏囊病病毒复制的影响
《中国兽医科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为研究gga-miR-9*对传染性法氏囊病病毒(IBDV)复制的影响,采用化学合成的方法合成ggamiR-9*模拟物,然后用其转染DF-1细胞,接种IBDV,分别收集上清液和细胞,测定IBDV的效价和干扰素(IFN)含量;进一步用生物信息学方法预测gga-miR-9*的靶基因,并分别用双荧光素酶报告系统、Western-blot、qRT-PCR和RNA干扰对其靶基因进行验证。结果显示,gga-miR-9*模拟物能够促进IBDV的复制,抑制IFN的产生;gga-miR-9*可靶向降解IRF2mRNA和抑制IRF2蛋白的翻译;IRF2被敲除的DF-1细胞感染IBDV后的复制效价(106.25 TCID50/0.1mL)高于miRNA阴性对照组的效价(105.25 TCID50/0.1mL)。结果表明,细胞gga-miR-9*促进IBDV复制的分子作用机理是在IRF2基因转录后水平上抑制细胞天然免疫功能而发生的。
关键词： 传染性法氏囊病病毒 miRNA gga-miR-9* siRNA
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CYP6CM1转基因烟草对Q型烟粉虱抗药性的影响
《分子植物育种 》 2014 CSCD
摘要：细胞色素P450酶系对杀虫剂的代谢作用是大多数昆虫产生抗药性的主要机制,沉默P450基因能否对烟粉虱抗药性产生影响需要进一步研究。本论文将含Q型烟粉虱细胞色素P450基因CYP6CM1 RNAi表达框架的转基因烟草饲喂烟粉虱,荧光定量PCR检测发现烟粉虱取食转基因烟草后体内CYP6CM1基因表达量显著下降,仅为取食非转基因烟草烟粉虱的19%~38%;通过琼脂保湿浸叶法和单株活体法研究取食转基因烟草烟粉虱对阿维·吡虫啉抗药性的影响,结果发现在接触1 g/L阿维·吡虫啉24~72 h后,取食转基因烟草的烟粉虱死亡率分别比取食非转基因烟草的烟粉虱死亡率显著升高20%~30%和15%~20%。本研究结果表明,饲喂烟粉虱转CYP6CM1 RNAi基因烟草可以显著降低烟粉虱细胞色素P450 CYP6CM1基因的表达,并降低烟粉虱对烟碱类杀虫剂阿维·吡虫啉的抗药性,显著提高了杀虫剂防治效果。
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甘蓝型油菜苗期耐淹性状主基因+多基因遗传分析
《作物学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：长江中下游是中国油菜主产区,该地区油菜播栽期间雨水多,易产生湿害,造成产量下降。研究甘蓝型油菜苗期耐淹性的遗传规律,对选育耐淹性强油菜新品种,提高油菜产量意义重大。应用甘蓝型油菜品种WR-4(耐淹)和WR-5(不耐淹)杂交后代衍生的6个世代(P1、F1、P2、B1:2、B2:2、F2:3)群体为材料,全淹6 d后去水恢复生长,去水后第7天调查死苗率,以此为耐淹性指标,于2012和2013年对6个世代群体家系进行耐淹性鉴定。应用植物数量性状主基因+多基因混合遗传模型多世代联合分析方法对耐淹性进行遗传分析。结果表明,2个年度该家系群体苗期耐淹性的最适遗传模型分别是E-0和B-3,即2对加性-显性-上位性主基因+加性-显性-上位性多基因和2对加性主基因模型。由此可见,该家系群体甘蓝型油菜苗期耐淹性主要受2对主基因控制,主基因存在加性、显性和上位性效应。当有显性效应存在时(2012年),主基因显性效应值|h a|=0.3475,|h b|=0.0069,大于主基因加性效应值|d a|=|d b|=0.0036。B1:2、B2:2和F2:3群体的主基因遗传率(h2mg),2012年分别为36.25%、61.40%和61.84%,平均为53.16%;2013年分别为8.30%、30.48%和43.13%,平均为27.30%。2年平均环境变异占表型变异的59.77%。上述结果表明,甘蓝型油菜苗期耐淹性受2对主基因型控制,但环境对耐淹性状的表型影响较大。F2:3家系群体苗期耐淹性遗传率较高,因此育种上可在早期世代对耐淹性状进行选择。
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甘薯花青苷生物合成调控研究进展
《分子植物育种 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：紫肉甘薯中的花青苷有较强的抗氧化能力,在医疗保健和工业生产上发挥着重要作用,受到越来越多消费者的青睐。本文综述了近几年紫肉甘薯块根花青苷合成调控的研究进展,并对影响甘薯花青苷生物合成与积累的众多因素进行探讨,主要包括花青苷生物合成的相关酶基因苯丙氨酸解氨酶(PAL)、查尔酮合成酶(CHS)、查尔酮异构酶(CHI)、黄烷酮3-羟化酶(F3H)、二羟基黄酮醇还原酶(DFR)、花青苷合成酶(ANS)以及类黄酮3-O-糖基转移酶(UFGT)、转录调控因子(MYB,bHLH和WD40)、MicroRNA和可溶性糖,以及光照、温度、钾元素等重要环境因子。归纳分析发现,甘薯花青苷的合成和积累与相关酶基因和转录因子的表达有直接的关系,MicroRNA活性、可溶性糖、光、温度、钾元素等通过不同调控机制以促进花青苷的合成。通过对这些影响甘薯花青苷合成途径内外因子的分析和汇总,可以明确甘薯花青苷代谢机制,为紫甘薯品质育种提供思路和方向。
关键词： 甘薯 花青苷 结构基因 转录因子 MicroRNA 环境因子
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免疫抑制素/卵泡抑素对家畜胚胎体外生产效率的提高
《江苏农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：在家畜卵母细胞体外成熟培养过程中添加不同浓度的抗抑制素抗体或抗卵泡抑素抗体,通过观察卵母细胞的成熟率、激活后的卵裂率及囊胚发育率,研究免疫抑制素与卵泡抑素对家畜卵母细胞体外发育能力的影响。结果显示:就水牛、奶牛及猪而言,在卵母细胞成熟过程中分别单独添加抗抑制素抗体与抗卵泡抑素抗体均能显著提高卵母细胞的体外成熟与卵裂率,添加的适宜浓度为50~100μg/ml。而添加抗卵泡抑素抗体还能显著提高水牛和猪的囊胚发育率。卵母细胞体外成熟期添加抗抑制素抗体与抗卵泡抑素抗体能显著提高卵母细胞的发育能力,提高早期胚胎的发育数量和质量,为改善家畜胚胎体外发育和生产提供了新方法。
关键词： 家畜 抗抑制素抗体 抗卵泡抑素抗体 囊胚率 卵母细胞发育能力
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固相萃取-高效液相色谱法检测肉鸭表皮组织中的松香酸
《食品科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：采用高效液相色谱法对肉鸭表皮组织中的松香酸含量进行检测。肉鸭表皮组织中的松香酸用乙腈提取,经C1 8固相萃取柱净化,采用高效液相色谱-紫外法进行检测。色谱柱:反相C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:0.003 m ol/L磷酸溶液-甲醇(8∶92,V/V);流速:1 mL/min;检测波长:240 nm。结果表明:方法线性范围为0.1~10 mg/L,检出限为0.10μg/g,定量限为0.33μg/g。在0.5~50μg/g的添加范围内回收率为82.2%~88.0%。实际样品分析结果显示,松香脱毛处理的肉鸭表皮中松香酸含量高达14.52μg/g。本实验建立的分析方法简便快捷、具有较好的灵敏度和可靠性,可用于肉鸭表皮组织中松香酸的定量分析。
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南方水稻黑条矮缩病毒检测方法的比较
《植物保护学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为明确南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)检测方法的最佳适用范围,对其现有检测方法 Real time RT-PCR、RT-LAMP、RT-PCR的灵敏性及特异性进行了比较,并分析了依据SRBSDV单克隆抗体3F1建立的斑点免疫结合印迹(dot immunobinding assay,DIBA)方法对检测植物寄主和白背飞虱Sogatella furcifera Horvth的特异性。结果表明,灵敏性以Real time RT-PCR方法最高,其次为RT-LAMP方法,而普通RT-PCR方法相对较低。这3种方法均可特异性检测SRBSDV植物寄主和白背飞虱;DIBA方法可以满足SRBSDV和水稻黑条矮缩病毒(Rice black-streaked dwarf virus,RBSDV)植物寄主和白背飞虱大量样品的检测,但不能区分SRBSDV和RBSDV。Real time RT-PCR方法实现了短时间内对SRBSDV RNA拷贝数的相对定量;RT-LAMP方法全程恒温反应,无需热循环仪。
关键词： 南方水稻黑条矮缩病毒 检测方法 比较
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鹅源坦布苏病毒RT-LAMP快速检测方法的建立
《浙江农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：坦布苏病毒是新发现的一种可引起家禽产蛋和采食量下降及死亡的黄病毒属病毒。根据GenBank中登录的鹅源坦布苏病毒NS5基因序列,利用Primer Explorer V4软件在序列保守区域设计1套特异识别NS5基因序列中6个不同区段的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)引物,并以此套引物建立一种基于LAMP技术的鹅源坦布苏病毒检测方法。结果表明,该方法灵敏度极高,是普通PCR方法的100倍,只能特异性扩增坦布苏病毒的RNA,对于其他常见禽RNA病毒均无特异性扩增。在反应体系中加入SYBR GreenⅠ染料后,通过肉眼观察有无绿色荧光可直接判定结果。该方法特异性强,灵敏度高,无需特殊仪器,简便,快速,适用于鹅源坦布苏病毒的临床快速检测。
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陆地棉棉籽油分和蛋白质含量QTL的定位
《江苏农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：以陆地棉杂交组合DPLSP3×盐城115(群体A)和Humcopedixi14wtr5×盐城90-110(群体B)构建的2个陆地棉种内F2群体为材料,发掘稳定的棉籽油分含量及蛋白质含量QTL,为标记辅助选择提供依据。利用覆盖棉花基因组的SSR标记对陆地棉油分和蛋白质含量数量性状位点进行筛选。基于该群体,以2009和2010年油分和蛋白质含量为指标,复合区间作图分析结果表明,2年2个群体共检测到4个QTL。其中,在群体A中,定位到1个较稳定的控制油分含量的QTL,该QTL位于染色体13上DC20120-NAU2893标记区间,在F2及F2:3群体中分别可以解释9.21%和12.01%的遗传变异;另外,在F3世代检测到1个蛋白质含量QTL。在群体B的F3世代,检测到1个位于NAU2932-NAU2503标记区间的油分含量QTL和1个蛋白质含量QTL,分别可以解释24.67%和10.1%的遗传变异。这些稳定遗传的QTL可以用于辅助陆地棉品质改良。
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