斑石鲷肝脏细胞系的建立与鉴定

张宏祥; 李坤明; 王娜; 翟介明; 陈松林; 《农业生物技术学报 》 2020 北大核心 CSCD

摘要：鱼类细胞培养技术是一种被广泛应用于病毒学、环境毒理学、细胞生物学、基因组学以及遗传学等方面研究的重要研究手段。斑石鲷(Oplegnathus punctatus)是优良的海水养殖鱼类,在水产养殖产业中备受青睐。本研究通过组织块法,以斑石鲷肝脏组织为材料,建立了斑石鲷肝脏细胞系(O. punctatus liver cell line, OPL)。培养细胞系所用的培养基是在L-15基本培养基中添加了青链霉素混合液、胎牛血清(fetal bovine serum, FBS)、碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)和β-巯基乙醇(2-mercaptoethanol, 2-ME)所配成的完全培养基。培养出的OPL细胞主要由成纤维样细胞构成,生长分裂旺盛,成功传至30多代。比较不同培养基:L-15 (Leibovitz-15)、DMEM/F12 (Dulbecco's modified Eagle medium/Ham's F-12)、DMEM和MEM对OPL细胞生长的影响,结果表明,L-15培养基最适用OPL的培养。此外,检测了温度、FBS浓度、bFGF浓度对OPL细胞生长的影响。结果表明,OPL细胞在18～30℃能正常生长,24℃是最适生长温度;OPL细胞在0%～20%FBS浓度范围内,其生长速度随血清浓度的升高而增快;在培养基中添加bFGF可以提高细胞生长速度。核型分析显示,第20代OPL细胞显示为正常二倍体核型(2n=2sm+46t),但其比例仅为68%。通过脂质体转染法将pEGFP-N3质粒转入OPL细胞中,可表达增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein, EGFP)。用斑石鲷的线粒体细胞色素C氧化酶Ⅰ(cytochrome oxidase subunitⅠ, COⅠ)基因进行检测,确定该OPL细胞系来源于斑石鲷。OPL细胞系的建立将为斑石鲷致病性病毒的感染机制、细胞及基因的功能分析等研究提供实验材料。

关键词： 斑石鲷 肝脏细胞系 原代培养 核型

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我国主要淡水经济贝类养殖研究进展(上)

闻海波; 金武; 徐跑; 华丹; 《科学养鱼 》 2020 北大核心

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洞庭湖通江水道鱼类资源周年动态及其洄游特征研究

刘艳佳; 高雷; 郑永华; 段辛斌; 陈大庆; 刘绍平; 《长江流域资源与环境 》 2020 北大核心 CSCD CSSCI

摘要：为了解洞庭湖通江水道鱼类资源的周年动态及其洄游特征,2017年5月~2018年6月,对洞庭湖通江水道的仔鱼和幼鱼、成鱼进行了逐月调查.(1)共采集仔鱼19种,数量以■(Hemiculter leucisculus)最多(占总数的76. 6%),其次为子陵吻虾虎鱼(Rhinogobius giurinus)(占8. 8%)和似鳊(Pseudobrama simoni)(占4. 3%);仔鱼主要出现在4~9月,密度以6月最高(848. 8 Ind./1 000 m~3).(2)采集幼鱼、成鱼42种,数量以短颌鲚(Coilia brachygnathus)(占总数的30. 3%)最多,其次为贝氏■(Hemiculter bleekeri)(占15. 3%)和■(占12. 2%);幼鱼、成鱼丰度以8月最高(为729尾/船/日).(3) 4~7月,江湖洄游型鱼类的运动指数在0. 1~0. 7之间,呈现入湖趋势; 9~次年3月,江湖洄游型鱼类的运动指数在-0. 4~-0. 1之间,呈现出湖趋势;径流量是幼鱼、成鱼出、入湖的主要驱动因子.

关键词： 鱼类资源 周年动态 洄游 环境因子

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南海中尺度涡的形转、内转及平移运动研究

杨雪晴; 韩贵艳; 田丰林; 马纯永; 王帅; 陈戈; 《海洋通报 》 2020 北大核心 CSCD

摘要：中尺度涡旋的运动整体可分为两部分:平移及转动.平移指涡旋在整个生命周期内的水平移动,而转动除了包括内转(海表地转流引起的涡旋自身水体转动)外,还包括形转(涡旋实际边界最佳拟合椭圆的转动).本文基于1993-2018年共计26年间的卫星高度计涡旋识别与追踪数据,首次对南海中尺度涡旋的完整运动形式,即形转、内转、平移展开了系统的研究.其中,对内转及平移的分析,可通过涡旋的识别追踪数据集直接进行;为研究涡旋形转,提出了一种基于涡旋识别追踪数据自动提取涡旋形转信息的算法,以此得到涡旋形转方向、每天形转的角度以及形转圈数等信息,获得涡旋形转数据集.通过对涡旋识别追踪数据以及形转数据集的统计分析发现:南海涡旋的平移方向多为西向,且其速率呈偏态分布,主要以南海南部偏高.同样,涡旋的内转速率也呈偏态分布,高速率内转的涡旋主要分布在吕宋海峡附近.涡旋的形转主要以南海南部速率偏高,且与涡旋的寿命及长轴有一定的关系,倾向于随着涡旋寿命的增长、涡旋长轴的增大而变慢.同时南海涡旋的这三种不同运动形式之间也存在一定的相关性.

关键词： 南海 中尺度涡旋 形转 内转 平移

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长江口及邻近海域4个不同地理群体凤鲚矢耳石形态差异

宋超; 杨琴; 赵峰; 张涛; 胡丽娟; 庄平; 《中国水产科学 》 2020 北大核心 CSCD

摘要：为探明相邻海域凤鲚(Coilia mystus)群体间的差异性,分别采集江苏吕四(吕四群体)、上海崇明(崇明群体)、浙江舟山(舟山群体)和浙江温州(温州群体)邻近海域的凤鲚共240尾.以凤鲚矢耳石为研究对象,利用耳石测量法和耳石框架法获得21个测量参数,通过公式转化为20个形态指标数据,并进行多元统计分析.非参数检验显示4个群体间14个形态指标具有显著性差异(P<0.05);应用主成分分析构建了7个反映耳石形态特征的主成分,累计贡献率为81.79%,结果显示不同群体耳石的整体形态相似,各群体间的耳石形态差异主要体现在局部的框架形态指标;利用贡献率最大的9个形态指标构建了4个群体的判别方程,温州群体的判别准确率最高,为96.7%,其次是崇明群体(66.7%)、吕四群体(60.0%)和舟山群体(58.3%);聚类分析表明崇明和舟山群体距离最近,其次为吕四群体,与温州群体距离最远.结果表明,崇明、舟山和吕四群体间矢耳石形态差异较小,而温州群体与这3个群体的差异最大,可单独确立为一个生态群体.可见,短距离洄游性凤鲚不同群体间耳石形态差异大小与群体地理阻隔程度相关.

关键词： 凤鲚 矢耳石 耳石形态 耳石框架 多元统计分析 长江口

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雅砻江河口区产漂流性卵鱼类早期资源现状

王导群; 田辉伍; 唐锡良; 徐火清; 段辛斌; 刘绍平; 向朋; 陈大庆; 《生态学杂志 》 2020 北大核心 CSCD

摘要：为了解雅砻江河口区产漂流性卵鱼类的早期资源现状,2016—2018年6—7月在攀枝花市盐边县雅砻江河口开展了鱼类早期资源调查工作。共采集产漂流性卵鱼类5种,分属1目2科,其中长江上游特有鱼类3种,分别为长薄鳅(Leptobotia elongata)、中华金沙鳅(Jinshaia sinensis)和短身金沙鳅(Jinshaia abbreviata); 2016—2018年流经雅砻江河口断面的鱼卵径流量分别为3.5×106、13.78×106和3.87×106ind;调查期间累计出现8次产卵高峰(2016和2018年各2次,2017年4次),鱼类的繁殖盛期在6月中下旬;通过推算,攀枝花盐边县和攀枝花米易县得石镇是河口区产漂流性卵鱼类的主要产卵场。

关键词： 雅砻江河口 产卵量 繁殖时间 产卵场

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厚朴酚对斑马鱼（Danio rerio）的急性毒性病理损伤评估

熊关庆; 冯杨; 杨玉涔; 段惠民; 黄彦博; 李泉汐; 李志洪; 石存斌; 汪开毓; 黄小丽; 《四川农业大学学报 》 2020 北大核心 CSCD

摘要：【目的】针对和厚朴酚(Honokiol)对斑马鱼(Danio rerio)的毒性损伤,采用半静态急性毒性实验将斑马鱼浸泡于和厚朴酚溶液中,研究和厚朴酚对斑马鱼的毒性作用及组织病理学影响。【方法】将105尾健康斑马鱼随机浸泡于7个试验组中(n=15):对照组(曝气自来水)、助溶剂乙醇组(1%体积比)和5个和厚朴酚浓度组(0.1、0.2、0.4、0.6、和0.8 mg/L),对斑马鱼的临床症状、大体病变、死亡率以及组织病理学进行判定,并结合组织病理评分系统评价各组斑马鱼的损伤情况,评估和厚朴酚的毒性。【结果】不同浓度和厚朴酚组浸泡的斑马鱼在96 h内出现不同程度死亡,其96 h半数致死浓度(LC_(50))为(0.530±0.014)mg/L,72 h-LC_(50)为(0.679±0.013)mg/L,48 h-LC_(50)为(0.758±0.012)mg/L,24 h-LC_(50)为(0.816±0.01)mg/L,而安全浓度(SC)为(0.264±0.003)mg/L。此外,在设定的浓度范围内,和厚朴酚未造成斑马鱼出现明显的临床及大体病理变化。组织病理学显示,和厚朴酚浸泡后主要导致鳃和脑充血,此外还可见鳃呼吸上皮坏死等,其余组织与对照组相比无明显病变。【结论】和厚朴酚对于斑马鱼存在一定毒性,鳃和脑可能是和厚朴酚对鱼类的主要毒性靶器官。

关键词： 和厚朴酚 斑马鱼 急性毒性损伤 毒性病理学研究

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胰α-淀粉酶基因5'端调控序列与鱼类食性的关系

朱书礼; 张迎秋; 陈蔚涛; 杨计平; 李捷; 武智; 李新辉; 《中国水产科学 》 2020 北大核心 CSCD

摘要：为了研究不同鱼类胰α-淀粉酶基因5'端调控序列转录因子差异与鱼类食性分化之间的关系。通过PCR克隆测序和查询NCBI数据库,获得32种鱼类胰α淀粉酶基因5'端824 bp序列,并对鱼类胰α淀粉酶基因5'端序列进行转录因子和系统发育分析。按不同的营养类型将鱼类分为杂食性、植食性和肉食性,通过百分比相似性分析不同食性鱼类的胰α淀粉酶基因转录因子的组成差异以及转录因子与鱼类食性的关系。结果显示:不同食性鱼类的胰α-淀粉酶基因5'端序列存在转录因子种类差异,植食性-肉食性鱼类差异主要体现在E47、C/EBPalpha、NF-Y和Pax-2,植食性-杂食性差异主要体现在deltaEF1、MyoD、NF-Y、AREB6和Pax-2,杂食性-肉食性差异主要体现在GATA-1、SRY、MyoD、HFH-8、AREB6、Pax-2、STAT5A和AP-1。系统发育结果与传统形态分类学大体相符,相同食性的鱼类并没有聚为一类。鱼类胰α-淀粉酶基因5'端调控序列中与食性分化相关的转录因子有E47、C/EBPalpha、NF-Y、Pax-2、deltaEF1、MyoD、AREB6、GATA-1、SRY、HFH-8、STAT5A和AP-1;胰α-淀粉酶基因5'端序列的转录因子与鱼类食性分化具有一定的关系。

关键词： 食性 鱼类 淀粉酶基因 5'端序列

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鱼菜共生发展历史、典型模式与发展趋势

徐琰斐; 张宇雷; 顾川川; 刘晃; 倪琦; 《渔业现代化 》 2020 北大核心 CSCD

摘要：鱼菜共生(Aquaponics)是利用水产养殖排放水为植物提供营养,由一种氮源(鱼饲料)生产两种农产品(鱼和蔬菜),具有水和氮源利用效率高、不使用化肥和抗生素、对环境友好等特点,是一种可持续的农业发展方式.将鱼菜共生的发展历史进程分为理念起源阶段(1970年之前)、萌芽阶段(1970—1990年)、全球拓展阶段(1990—2010年)以及快速发展阶段(2010年至今)4个阶段.分析了鱼菜共生3种典型模式;提出了鱼菜共生系统构建向解耦类型发展,系统布局向城镇化、立体化发展,硬件设施向生态型、智能化发展的3个主要发展趋势;提出了加强氮磷转化机制研究、建立系统理论模型、加强人工智能技术应用和加强商业规模系统研究4条发展建议.

关键词： 鱼菜共生 循环水养殖 水耕栽培 历史进程 发展趋势

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一株鲈塘源植物乳杆菌的分离鉴定及其对养殖水体影响研究

巩华; 张洪业; 赖迎迢; 孙承文; 刘春花; 陶家发; 焦彩虹; 《广东饲料 》 2020

摘要：利用MRS培养基和LB培养基对广东顺德大口黑鲈养殖池塘水体样品进行了乳酸菌的分离和筛选,共获得27株乳酸菌。以引起大口黑鲈"烂身病"的嗜水气单胞菌为指示菌进行拮抗作用试验,筛选获得一株具有显著抑菌活性的乳酸菌XTL3,并对该菌株进行了生理生化试验、16Sr DNA序列分析及其对大口黑鲈池塘养殖的安全性和效果进行了研究。结果表明,菌株XTL3对嗜水气单胞菌的生长具有较好抑制作用。生理生化试验、16S r DNA序列分析表明,XTL3与植物乳杆菌的相似性为100%,初步鉴定该菌株为植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)。室外养殖池塘安全性和效力检验结果表明,在使用过程中的一个月内,无异常死亡,无病害发生,池塘的溶氧变化差异不显著(P>0.05),氨氮的变化差异显著(P<0.05),实验塘的水环境保持更稳定。筛选的植物乳杆菌具有良好的抑菌和调水能力,且其生长特性适应大口黑鲈的池塘养殖环境,这为大口黑鲈疾病的生态防控及乳酸菌资源的开发利用奠定了基础。

关键词： 植物乳杆菌 大口黑鲈 池塘 水质

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