科研产出
一种应用LORF11同源子鉴别诊断鸭瘟病毒的PCR方法
《江苏农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为建立一种鉴别诊断鸭瘟病毒的PCR方法,根据已发表的8株鸭瘟病毒株的长区开放阅读框(LORF11)等位基因序列,在其开放阅读框等位基因的上游5 bp和下游101 bp的位置设计1对特异性引物。应用这对引物对鸭瘟病毒LH2011株、v2085株、VAC株、Clone-03株DNA进行PCR扩增,分别获得了4 448 bp、3 277bp、934 bp和2 518 bp的特异性条带。此PCR方法特异性强,敏感性高,可检测到10TCID50或0.1LD50的鸭瘟病毒。在感染鸭瘟病毒的组织(肝脏)中均能检测到鸭瘟病毒DNA。对疑似鸭瘟的临床病料的检测结果也证明,建立的PCR方法不仅能够鉴别样品是否感染了鸭瘟病毒,而且能鉴别感染的鸭瘟病毒的来源。
关键词： 鸭瘟病毒 LORF11同源子 聚合酶链式反应 鉴别诊断
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苯并噻二唑(BTH)和β-氨基丁酸(BABA)对茶树新梢生长和品质成分的影响
《茶叶科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：通过设定不同浓度的BTH和BABA对2年生龙井43进行喷雾处理,探讨两种物质对茶树新梢部分生长指标、茶鲜叶主要品质化学成分的含量和相关代谢酶活性的影响。结果表明,与对照相比,处理后新梢芽长和芽重、含水量、干物质量差异不显著(P>0.05)。鲜叶中多酚类物质、总氨基酸、咖啡碱和可溶性蛋白的含量均有不同程度的提高,75 mg·L-1 BTH处理后含量分别增加了29.32%、49.10%、23.77%、96.34%;400 mg·L-1 BABA处理后含量分别增加了15.75%、45.50%、21.31%、87.18%。可溶性糖含量和酚氨比降低。PPO和GS两种酶的活性明显提高,而POD和PAL的活性相应降低。以上研究初步表明75 mg·L-1的BTH和400 mg·L-1的BABA可以通过调节茶叶的主要化学品质成分和相关酶的活性,在一定程度上改善茶叶的品质。
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不同毒力猪肺炎支原体侵入宿主细胞的观察
《畜牧兽医学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：旨在研究不同毒力猪肺炎支原体对宿主细胞的侵入以及侵入后在宿主细胞内的分布位置。首先用猪肺炎支原体野毒株XLW-1感染PK15细胞不同时间后,间接免疫荧光染色,激光扫描共聚焦显微镜对PK15细胞进行断层扫描,以观察XLW-1能否侵入细胞以及感染时间对XLW-1侵入细胞的影响。然后,在能侵入细胞的基础上,用不同毒力的猪肺炎支原体感染宿主细胞STEC、PK15、SJPL和3D4/21,观察它们对宿主细胞的侵入情况。结果表明,猪肺炎支原体野毒株XLW-1与PK15细胞作用8h时不能侵入PK15,作用10h以上时可以侵入PK15,并且随着作用时间的延长侵入的猪肺炎支原体也在增加。研究还表明猪肺炎支原体野毒株XLW-1、168致弱株和168疫苗株均能侵入STEC、PK15、SJPL和3D4/21。并且,STEC中3个菌株均随机分布在细胞质中;PK15中3个菌株均主要分布在靠近细胞膜和细胞两端狭长的细胞质中;SJPL中XLW-1和168疫苗株主要分布在贴近细胞膜内侧的细胞质中,168致弱株则散布在细胞质中;3D4/21中XLW-1和168致弱株主要分布在贴近细胞膜内侧的细胞质中,168疫苗株则在整个细胞质中分布较多。结果提示不同毒力的猪肺炎支原体均能侵入宿主细胞STEC、PK15、SJPL和3D4/21。
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植物细胞外信号分子eATP研究进展
《植物学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：细胞外ATP(extracellular ATP,eATP)是目前公认的细胞外信号分子,参与调控多种环境刺激下植物的生长、发育和防御反应。在植物细胞信号转导过程中,eATP具有双重功能,其作用主要取决于细胞外基质中eATP的浓度。eATP含量过高或者过低都会导致细胞死亡,适度水平的eATP则有助于植物的生长和发育。细胞外三磷酸腺苷双磷酸酶(Apyrase)严格控制细胞外基质中eATP的水平,因此有助于调控植物在逆境条件下的生长和防御反应。该文总结了植物中eATP的发现、产生和清除以及受体和信号转导等研究进展,重点论述eATP在逆境条件下的生理功能,并对植物eATP的研究方向作了展望。
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水葫芦生态净化工程对竺山湖底栖动物群落结构变化的影响
《生态环境学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：在解决了机械化采收、资源化利用的终端处理后,利用适应性广、生物量大、净化能力强的漂浮植物净化污染水体,成为当前受污水体、尤其是富营养化水体生态治理的有效治理手段之一。在常规控养水生植物净化水体的工程实践中,主要是在风浪扰动小的岸边或内河里进行,在湖泊等多风浪扰动的较大水体中进行控养水生植物、净化水体的工程实践尚不多见。因此,根据江苏省通过种养水葫芦(Eichharnia crassipes)净化太湖受污水体的治理要求,江苏省农科院在太湖竺山湖中央水域连续进行了放养1000亩水面水葫芦的生态净化工程。本研究主要针对这种工程措施下,通过2011年控养水葫芦后研究其对水体环境的影响及底栖生物群落结构和多样性的变化。结果表明,软体动物(主要是铜锈环棱螺)的平均密度从远离到种养区内分别为15.13、15.63、22.63 ind·m-2,生物量从远离到种养区内分别为17.00、17.60、25.50 g·m-2,密度和生物量表现为种养区内要高于种养区外围;种养区内寡毛类(主要是霍甫水丝蚓)和摇蚊幼虫类的密度和生物量的变化表现为远种养区>近种养区>种养区内,表明以水葫芦为代表的漂浮植物规模化种养后,对底栖环境有一定的改善效果;然而,短期内的控养水葫芦进行水体生态治理,不能立即显现出明显的改善效果,尤其是对于太湖这样一个浅水、多风浪扰动的大水体,更需要长期、持久的多措施并举才能起到效果。利用Shannon-Weaver和Simpson指数来评价底栖环境,水体仍处于重度污染状态。因此,短期内规模化控养水葫芦生态净化工程措施未表现出对底栖生境及底栖生物的不良影响。
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转盐地碱蓬SsDREB基因烟草的抗逆生理机制分析
《华北农学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为了研究盐地碱蓬Ss DREB基因在转基因烟草中的功能,探究转基因烟草的抗逆生理机制,我们构建了SsDREB基因的植物高效表达载体p CAMBIA2301-Ss DREB,并通过农杆菌介导法将其导入烟草NC89中,通过Kan抗性、PCR及RT-PCR筛选鉴定阳性苗;对转基因烟草苗进行高盐、干旱等抗逆性分析,同时测定在不同浓度Na Cl和PEG6000处理后转基因烟草叶片的净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、光能转化效率(Fv/Fm)、实际光量子效率(φPSⅡ)以及脯氨酸和可溶性糖的含量。结果表明:通过Kan抗性、PCR及RT-PCR筛选鉴定,最终获得12个株系转基因阳性苗。转基因植株的抗逆性与对照相比明显提高。在不同浓度Na Cl和PEG6000处理下,对照和转基因苗的Pn和Gs随着处理浓度的提高均呈现逐渐下降趋势,但在相同浓度处理下转基因苗的Pn和Gs均比对照高;随着Na Cl处理浓度的增大,对照和转基因植株的Fv/Fm和φPSⅡ均逐渐降低,但转基因苗的降低幅度比对照小;随着PEG处理浓度的提高,对照和转基因植株的Fv/Fm逐渐降低,但转基因苗的降低程度较对照小,而φPSⅡ下降趋势基本相同。在不同浓度Na Cl和PEG处理后,转基因植株和对照植株脯氨酸和可溶性糖含量均随着Na Cl处理浓度的增加而提高,但是转基因植株较对照植株增高更快。
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拮抗细菌枯草芽孢杆菌T429喷雾干燥工艺研究
《中国生物防治学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：本研究前期成功分离获得1株对水稻真菌病害具有较强抑制作用的枯草芽孢杆菌T429,为开发生防菌农药新剂型,利用喷雾干燥法对生防菌T429发酵液进行处理,以喷雾干燥后产物活菌量为主要指标,采用单因素和正交试验法,对影响喷雾干燥产物指标的主要因素进行优化。结果表明,最佳喷雾干燥条件为进风温度120℃、进样速度720 mL/h、雾化口径1 mm、雾化压力0.1 MPa、热风流量30 M3/h,可获得产物活菌量达8.61×109 cfu/g。该工艺稳定、可控,为以枯草芽孢杆菌为核心的微生物杀菌剂新剂型的研发提供了科学依据。
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结球甘蓝小孢子胚胎发生的细胞学研究
《南京农业大学学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：游离小孢子培养即小孢子在外界胁迫诱导的条件下,从其配子体发育途径转向孢子体发育途径,诱导小孢子胚胎发生的过程。本研究通过对结球甘蓝小孢子胚胎发生的细胞学观察,为甘蓝游离小孢子培养中的可调控性及相关胚胎发育研究提供理论依据。选用3个在游离小孢子培养中胚胎发生响应有差异的甘蓝杂交种,分别采用醋酸洋红、4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)及荧光素双醋酸酯(FDA)3种染色方法,对甘蓝小孢子体内配子体发育、游离小孢子培养中的胚胎发生过程及细胞死亡现象进行了观察。结果表明:小孢子正常发育方向是单核小孢子经历2次不对称核分裂后发育成三核花粉,而单核靠边期小孢子在体外经32.5℃热激胁迫1 d后,小孢子绝大部分死亡,培养3 d后小孢子死亡率达到90%左右。结球甘蓝游离小孢子培养胚胎发生途径以B途径为主:第1次分裂为对称分裂,其后2个核进行反复分裂形成多细胞团,依次经历球型胚、心型胚、鱼雷胚,直至子叶胚的形成。除了以上典型B途径外,培养过程中还同时存在多种发育途径:第1次不对称分裂后,生殖核继续分裂即为A-G途径;营养核和生殖核两者同时继续分裂的A-VG途径。结论:甘蓝小孢子在体外经32.5℃热激胁迫1 d后,B途径为其主要孢子体发育途径;热激胁迫迅速诱导了小孢子的死亡。
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通用引物检测志贺毒素和紧密素多个基因亚型
《中国人兽共患病学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：目的旨在建立同时检测stx2和intimin两个基因多个变型的双重PCR快速检测技术,更好满足实验室和临床检测的需求。方法以stx2主要的6个亚型和intimin主要的27个基因亚型为靶序列,设计引物,建立双重PCR方法,分析其敏感性、特异性,并检测模拟制备的阳性样品。结果 stx2-intimin双重PCR扩增片段分别为388bp和609bp,检测大肠杆菌纯培养物最低限介于10~100CFU/mL,增菌样品最低检测限介于1~10CFU/g,特异性检测intimin和stx2的多个亚型。结论 Stx2-Intimin二重PCR技术灵敏、特异、通用和高效。
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桃果实中酚类物质研究进展
《果树学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：酚类物质是桃果实的重要次生代谢产物,逐渐成为果实品质评价指标,选育富含酚类的桃品种也成为了育种目标之一。目前主要利用高效液相色谱法并结合质谱仪对桃果实酚类进行成分鉴定和含量分析,分离鉴定出33种,分属酚酸类、黄烷醇、黄酮醇和花色苷;果肉中酚类的种类和含量明显低于果皮;红肉桃果实中酚类含量极为丰富,是开展含有益酚类品种选育的重要材料;桃果实酚类组成和含量受到品种、成熟度、发育时期、贮藏和加工条件等因素影响;可通过套袋、铺设反光膜、不同留果量、水分管理和砧穗组合等栽培措施调控其含量;DFR、UFGT、ANR、LAR、FLS等结构基因和MYB10、bHLH3、WD40、MYBPA1等转录因子调控桃酚类物质的合成。
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