尼罗罗非鱼p38MAPK多克隆抗体的制备及鉴定

胡平各; 邹芝英; 祝璟琳; 喻杰; 肖炜; 李大宇; 杨弘; 马银花; 陈炳霖; 《农业生物技术学报 》 2020 北大核心 CSCD

摘要：p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase, p38MAPK)在生物自身免疫调节过程中起着重要的作用。为探讨p38MAPK在尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)免疫应答中的作用机制,本研究全基因合成p38MAPK部分编码序列,构建了重组质粒pET-28a-p38MAPK,并成功在大肠杆菌(Escherichia coli)中诱导表达;诱导表达的蛋白经Ni-NTA树脂层析柱纯化后,免疫新西兰白兔(Oryctolagus cuniculus)制备了尼罗罗非鱼p38MAPK多克隆抗体,并用多克隆抗体检测尼罗罗非鱼不同组织中p38MAPK蛋白表达情况。研究结果显示,诱导表达的重组蛋白约为23 kD,主要以包涵体的形式存在,酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)和Western blot分析表明,所制备抗体效价达到1∶256 000,且能特异性识别p38MAPK蛋白。组织表达分析表明,p38MAPK在尼罗罗非鱼各组织中广泛分布,在卵巢,脑和肌肉中表达最强,头肾和血液次之,皮肤和鳃表达较弱,肝、脾、肠和心脏表达最弱。本研究为深入了解尼罗罗非鱼抗病免疫提供了基础资料。

关键词： 尼罗罗非鱼 p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK) 多克隆抗体 蛋白表达

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淡水池塘呼吸式养殖系统构建技术

顾兆俊; 刘兴国; 唐荣; 杨家朋; 《世界热带农业信息 》 2020

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基于16S rRNA高通量测序的鳢肠道微生物群落结构研究

徐晟云; 陈昆慈; 罗青; 刘海洋; 欧密; 上官清; 赵建; 《大连海洋大学学报 》 2020 北大核心 CSCD

摘要：为探究鳢肠道微生物与鳢健康养殖间的关系,采用Illumina HiSeq 2500高通量测序技术对不同养殖环境中成年健康乌斑杂交鳢Channa argus♀*Channa maculata♂(体质量100~150 g)及野生斑鳢(体质量50~100 g)肠道内容物进行微生物测序及信息分析.结果表明:不同环境(珠海斗门DM,佛山南海BRCT、BRSNC,佛山顺德杏坛XT,阳江YJ)鳢肠道内容物共31个样品间OTU数具有一定差别,总数达585,表明不同环境下鳢肠道内容物中优势菌群较为丰富;采集的样品中优势菌群主要为红球菌属Rhodococcus、梭菌属Clostridium、微杆菌Microbacterium、弧菌属Vibrio、气单胞菌属Aeromonas和邻单胞菌属Plesiomonas等,其中,梭菌属、红球菌属在所有样品中均存在,但不同环境所占的比例不同;热图分析显示,鳢肠道微生物群落中还包含变形杆菌属Proteus、肠球菌属Enterococcus、乳杆菌属Lactobacillus、拟杆菌属Bacteroides、棒杆菌属Corynebacterium等其他菌属,但占比不高,说明菌群数量不多;PCA分析显示,人工养殖杂交鳢(DM、BRCT、BRSIVC、XT)的肠道微生物群落结构比较接近,但与野生鳢(YJ)的群落结构具有一定差异.研究表明,相同环境下鳢肠道内容物中微生物群落菌属有所相似,不同环境条件下的鳢肠道微生物类群数量和优势菌群均存在显著差异.

关键词： 鳢 16S rRNA 肠道微生物 优势菌群 群落结构

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响应面法优化黄浆水发酵液制备工艺及其抗氧化活性研究

王珊珊; 孙晓琦; 马玉洁; 李娜; 周德庆; 《食品研究与开发 》 2020 北大核心

摘要：采用植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)和清酒乳杆菌(Lactobacillus sakei)3种乳酸菌对黄浆水进行组合发酵,以发酵液DPPH自由基清除率为评价指标,研究发酵温度、发酵时间、脱脂乳粉添加量、葡萄糖添加量和接种量对发酵液的影响。在单因素试验基础上,采用响应面法优化制备高抗氧化活性黄浆水发酵液的工艺条件。结果表明最佳发酵参数为:接种量1%、发酵温度37℃、发酵时间37.50 h、脱脂乳粉添加量8%、葡萄糖添加量5%。在此条件下制备的黄浆水发酵液DPPH自由基清除率为82.36%。抗氧化活性试验表明:黄浆水发酵液提取物抗氧化能力得到显著提升,其清除DPPH自由基、羟自由基和ABTS自由基的半抑制质量浓度(IC50)分别为2.03 mg/mL、1.12 mg/mL和0.30 mg/mL。

关键词： 植物乳杆菌 嗜酸乳杆菌 清酒乳杆菌 黄浆水 发酵工艺 响应面分析 抗氧化活性

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深远海养殖工船稳性设计准则及校核方法

韩冰; 谌志新; 崔铭超; 王庆伟; 王一帆; 《船舶工程 》 2020 北大核心 CSCD

摘要：深远海养殖工船作为一种典型的具有自航能力且长期系泊在固定海域作业的工程船舶,稳性安全至关重要。文章通过分析养殖工船的作业特点,结合相关规范要求,初步建立了养殖工船稳性设计准则。继而以某养殖工船实际设计项目为依托,对船体进行完整稳性和破损稳性计算分析,并根据设计准则进行了校核。针对自由液面过大的问题,对养殖水舱进行了优化设计。结果表明:该类型养殖工船能够较好地满足稳性设计准则的要求,完整稳性及破损稳性有较大的裕度。

关键词： 养殖工船 设计准则 完整稳性 破损稳性

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响应面法优化中性蛋白酶酶解海湾扇贝副产物制备抗氧化酶解物研究

胡昂; 段蕊; 刘志东; 林娜; 张俊杰; 李磊; 蒋玫; 《海洋渔业 》 2020 北大核心 CSCD

摘要：采用响应面法优化中性蛋白酶酶解海湾扇贝(Argopecten irradias)副产物蛋白制备抗氧化酶解物工艺。以DPPH自由基清除率和还原能力为响应值,在底物浓度、温度、时间、酶与底物比4个单因素实验基础上,优化确定3个显著性因素。获得实验条件下最佳制备工艺为:底物浓度25 mg·mL~(-1)、温度50℃、时间3.8 h、酶与底物比1.5%。在此条件下,实验验证酶解海湾扇贝副产物蛋白制备抗氧化酶解物的DPPH清除率为81.93%(预测值为83.19%),还原能力为58.12%(预测值为58.92%),DPPH自由基清除率和还原能力的IC_(50)值分别为0.264 mg·mL~(-1)和3.136 mg·mL~(-1),且表现出较强的抗氧化活性。研究表明,优化后的回归模型用于预测中性蛋白酶酶解海湾扇贝副产物蛋白制备抗氧化酶解物是可行的。

关键词： 海湾扇贝 副产物 抗氧化酶解物 响应面

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深海平台人员转运栈桥力学结构与补偿特性

徐志强; 李万莉; 王志勇; 谌志新; 《船舶工程 》 2020 北大核心 CSCD

摘要：人员转运栈桥是高海况环境下用于从船舶向大型船舶、海洋油气平台或风场电站平台输送作业人员与物资的重要通道。文章介绍了深海平台人员转运栈桥国内外研究现状,重点阐述转运栈桥伸缩结构、变幅结构和回转机构的力学结构与设计要点,分析了人员转运栈桥波浪补偿特性,形成整套解决方案,为促进人员转运栈桥国产化、成果及产品设备用于开拓我国海工设备市场具有促进意义。

关键词： 深海平台 人员转运 力学结构 蓄能器

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不同脂肪源日粮补充维生素E对罗氏沼虾生长、免疫及肉品质的影响

孙存鑫; 熊哲; 周群兰; 宋长友; 单凡; 刘波; 徐宏琴; 《中国水产科学 》 2020 北大核心 CSCD

摘要：本研究旨在完善罗氏沼虾(Macrobrachiumrosenbergii)饲料配方,降低罗氏沼虾饲料成本。研究采用3×2双因素设计,配制6组饲料,分别包含鱼油(fish oil, FO)、豆油(soybean oil, SO)、菜籽油(rapeseed oil, RO)三种脂肪源;200 mg/kg (200VE)和600 mg/kg (600VE)两个维生素E (VE)水平。养殖实验在温室水泥池中进行,每个处理3个重复,养殖期8周,每天定点定量投喂3次。结果显示,相对于FO组, SO和RO组增重率、特定生长率显著升高,饵料系数显著下降(P<0.05),而VE对生长性能和饲料利用无显著影响(P>0.05)。对于血淋巴抗氧化指标,在相同VE水平下,FO组血淋巴总抗氧化能力(T-AOC)和超氧化物歧化酶(SOD)活性均显著低于SO和RO组,谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性均显著高于SO和RO组(P<0.05), SO组丙二醛(MDA)水平均显著低于FO和RO组(P<0.05)。在相同脂肪源下, 600VE可显著提高FO组T-AOC活性, RO组GPX活性以及SO和RO组SOD活性(P<0.05),而VE水平对MDA含量无显著影响(P>0.05)。对于血淋巴生理生化指标,谷草转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)和甘油三酯(TC)受日粮影响显著(P<0.05);AST和ALB受氨氮应激影响显著(P<0.05)。此外,日粮脂肪源和VE水平对肉质也有显著影响。其中, SO组肌肉鲜度和滋味强度较高; RO组鱼腥味较低; FO组肌肉亮度较高,气味强度较低。在200 mg/kg VE水平下, FO组肌肉硬度、胶黏性、耐咀性、黏性和回复性显著高于植物油组(P<0.05); RO组的肌肉蒸煮损失显著高于其余组(P<0.05)。600VE水平可明显提高肌肉嫩度和多汁性(P<0.05),而对肌肉蒸煮损失和滴水损失无显著影响(P>0.05)。上述结果表明,相对于鱼油,豆油和菜籽油等植物油是罗氏沼虾更优质的脂肪源, VE在以鱼油为单一脂肪源的饲料中有一定的促生长和缓解应激的作用,且脂肪源和VE均显著影响肌肉品质。本研究结果将为降低鱼油在罗氏沼虾饲料中的使用提供数据支持。

关键词： 脂肪源 维生素E 生长 免疫 肉品质 罗氏沼虾

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推进南美白对虾联合育种助力水产种业质量提升

孔杰; 栾生; 《中国水产 》 2020

摘要：南美白对虾是我国水产养殖的重要品种.为解决当前南美白对虾苗种产业依赖进口的难题,笔者从解决国内南美白对虾种质资源问题出发,论述了南美白对虾联合育种的意义、优势及实践可行性,并就联合育种平台今后的发展、规划提出对策和建议,以期提升国内南美白对虾种质质量,避免受国外种质钳制.

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1株副溶血性弧菌裂解性噬菌体VpJYP2的生物学特性及应用

江艳华; 王联珠; 李风铃; 曲梦; 郭莹莹; 翟毓秀; 姚琳; 《食品科学 》 2020 北大核心 CSCD

摘要：对1株副溶血性弧菌裂解性噬菌体VpJYP2进行生物学特性分析,探讨VpJYP2对生三文鱼片中副溶血性弧菌的杀菌效果.结果显示,噬菌体VpJYP2的噬菌斑透明,直径为1~2 mm,外有晕圈;透射电镜观察显示,其头部呈二十面体立体结构,直径约64 nm,尾部长约70 nm,尾鞘带宽约20 nm,属于肌尾病毒科(Myoviridae);VpJYP2基因组全长25363 bp,含有45个开放阅读框,推定为已知功能的有13个;VpJYP2在40~50℃稳定,在pH 4~11稳定,最佳感染复数为0.01,感染宿主菌的潜伏期约为5 min,裂解期约为55 min,裂解量约为45.VpJYP2能显著降低生三文鱼片中副溶血性弧菌的含量.结果表明,VpJYP2具有作为副溶血性弧菌生物杀菌剂的应用潜力.

关键词： 副溶血性弧菌 裂解性噬菌体 生物学特性 杀菌作用 生三文鱼

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