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轮回选择和穿梭育种对绿豆籽粒产量的响应

东北农业大学学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:1996~2008年,选用五个中国绿豆品种,五个泰国绿豆品种,构建九个轮回选择群体。2009~2010年,在中国南京,比较上述群体籽粒产量和农艺性状的差异显著性。结果表明,轮回选择对提高绿豆籽粒产量具有显著效果,遗传增益最大的群体增产9.59%。对于以籽粒产量为主要选择目标的轮回选择来说,只需选择两个轮次,第三轮开始遗传增益会逐步下降。穿梭育种获得的轮回选择群体(K群体)平均产量比未穿梭群体(N群体)高7.26%,说明穿梭育种对提高绿豆籽粒产量具有显著效果。将同一轮次的K群体和N群体进行比较,在轮回选择第一轮次(C1)、第二轮次(C2)、第三轮次(C3)和第四轮次(C4)四个轮次中,前者分别比后者增益4.07%、8.76%、8.53%和7.98%,说明穿梭育种产量遗传增益的稳定性。N群体内变异系数明显大于K群体,表明在N群体中继续选择,获得优良家系的几率高于K群体。

关键词: 绿豆 轮回选择 穿梭育种 遗传改良

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江浙油菜主产区冬油菜的区域适宜施氮量研究

土壤学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:2008-2009年和2009-2010年,在江苏、浙江两省油菜主产区布置10组冬油菜的氮肥用量田间试验,研究施氮对产量、干重、氮素吸收累积及氮肥利用效率的影响,通过肥效模型确定该区域油菜的适宜施氮量,为农民合理施氮提供依据。结果表明,冬油菜施氮的增产效果显著,施氮270 kg hm-2时油菜产量达到最高的2 581 kg hm-2,较无氮区对照平均增产1 265 kg hm-2,增幅为121%。施氮明显增加了油菜的地上部干重,促进其对氮素的吸收和累积,但过量施氮导致收获指数和氮素收获指数出现降低,并导致氮肥利用效率的显著下降。各试验点油菜的适宜施氮量平均为199 kg hm-2,此施氮量条件下不仅大幅减少氮肥投入,还同时获得较高的区域产量水平和氮肥利用效率。分析认为,当前江浙油菜主产区冬油菜推荐施氮200kg hm-2,不同地区和田块可根据实际情况进行微调。

关键词: 油菜 氮肥 施肥效果 适宜施氮量 区域推荐施肥

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猪链球菌2型体外刺激3D4/21猪肺泡巨噬细胞的炎症相关细胞因子mRNA转录分析

江苏农业学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:为探明猪链球菌2型(SS2)感染的致病机制,利用荧光定量PCR方法,分析不同SS2菌株对3D4/21猪肺泡巨噬细胞各炎症相关细胞因子mRNA体外转录水平的影响。结果显示强毒菌株ZY05719刺激细胞因子转录水平高于其impdh缺失株ZY05719(Δimpdh)和无毒菌株HA0609及低毒菌株CS100322-1。ZY05719诱导多个细胞因子mRNA过度转录,包括IL-18、IL-8和IL-12等。除IL-10外,HA0609诱导其他细胞因子mRNA上调转录;而CS100322-1刺激后,绝大部分细胞因子mRNA处于稳定状态。不同毒力SS2菌株影响细胞因子mRNA转录,且这种影响具有时间上的依赖性。SS2具有调节炎性细胞因子转录的能力,其结果介导炎症反应及白细胞趋集于感染部位,这可能是SS2引起脑膜炎炎症特征的机制之一。

关键词: 猪链球菌2型 猪肺泡巨噬细胞 炎症相关细胞因子 荧光定量PCR

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抑制PCR富集法分离三化螟基因组微卫星分子标记

江苏农业学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:采用抑制PCR的方法构建三化螟的微卫星文库,并分离微卫星分子标记。挑取的201个阳性克隆测序结果表明,187个克隆含有微卫星序列,抑制PCR筛选微卫星序列的准确率达到93.03%。对该187个微卫星序列进行比对,得到18个不同的微卫星序列,并成功提交至GenBank。对这18个序列设计了30对特异性引物,检测德阳种群48个体,共得到5个三化螟微卫星分子标记。

关键词: 三化螟 微卫星 抑制PCR 富集文库

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大肠杆菌YSY1产腐胺特性及相关基因分析

食品科学 2013 北大核心 CSCD

摘要:利用高效液相色谱(HPLC)法对大肠杆菌YSY1菌体发酵过程中产生的腐胺和精胺进行分析,并进一步利用聚合酶链式反应(PCR)技术确定菌体基因组中存在的相关氨基酸脱羧酶基因,探讨基因表达产物对两种生物胺数量变化的影响。结果表明:精胺含量随着发酵时间的延长而减少,在1~6h内由初始的198.04μg/mL变为156.33μg/mL;腐胺含量随着发酵时间的延长而增加,在1~6h的变化范围为14.61~18.83μg/mL。菌株基因组携带有鸟氨酸脱羧酶基因,精氨酸脱羧酶基因等参与精胺和腐胺相互转化的相关酶基因并未检测出。

关键词: 生物胺 腐胺 精胺 聚合酶链式反应 高效液相色谱

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猪鼻支原体vlp重复区融合蛋白的构建表达及反应原性分析

中国人兽共患病学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:目的猪鼻支原体(Mhr)是临床猪场常见病原菌之一,同时研究证实其与多种人类肿瘤有关。目前对Mhr的血清学检测尚无有效的方法。本研究以Mhr可变脂蛋白(vlp)家族为对象,设计vlp家族蛋白重复区片段融合蛋白,以作为检测用包被抗原使用。方法根据大肠杆菌的密码子偏嗜性,设计并构建串联表达7种Mhr可变脂蛋白vlpA、B、C、D、E、F、G重复区片段的重组蛋白vlpA-G基因。将该基因片段装入pET-32a(+)载体中转化大肠杆菌,筛选鉴定获得阳性工程菌。IPTG诱导表达,镍柱亲和层析获得纯化的重组蛋白vlpA-G。Western Blot鉴定该重组蛋白与Mhr阳性血清的反应能力,并利用该重组蛋白为包被抗原初步建立间接ELISA方法用于检测猪血清中的Mhr抗体。结果构建表达vlpA-G重组蛋白的基因工程菌,经PCR及DNA测序正确。IPTG诱导后出现明显蛋白条带,经镍柱亲和层析纯化获得vlpA-G重组蛋白。Western Blot试验证明重组蛋白vlpA-G能够和Mhr阳性兔血清产生明显的阳性杂交带;利用重组vlpA-G为包被抗原初步建立间接ELISA检测方法可成功检测Mhr阳性猪血清,证明该重组vlpA-G蛋白具有良好的反应原性。结论本研究构建了重组蛋白vlpA-G并证实该蛋白具有良好的反应原性,可作为Mhr血清学诊断方法研究的候选抗原,同时也为Mhr重组蛋白疫苗提供可选抗原。

关键词: 猪鼻支原体 可变脂蛋白 原核表达 反应原性

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小麦根际土壤脱氢酶活性测定方法的改进

江苏农业学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:为准确检测土壤脱氢酶活性,在传统TTC(氯化三苯基四氮唑)法基础上对萃取剂、测定波长、对照、培养时间、TTC浓度等条件进行了优化,并进行了标准曲线制作方法的创新。改进后的土壤脱氢酶活性测定方法为:用甲苯溶解TF(三苯基甲臜)制作标准曲线,以无土+无基质为试验对照,1.0%TTC溶液为基质,土壤中加入pH为7.4的Tris-HCl缓冲液和0.1 mol/L的葡萄糖溶液,在37℃下培养24 h,以甲苯为萃取剂萃取30 min,于492 nm波长下检测吸光值。利用优化后的方法测定转基因抗旱小麦各生育期根际土壤脱氢酶活性,结果表明:转基因抗旱小麦与对照(受体小麦)根际土壤脱氢酶活性没有显著性差异,均表现为先升高后降低趋势,于返青期达到最大值。试验结果进一步证实上述方法稳定可行。

关键词: 转基因小麦 根际土壤 脱氢酶活性

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香橼精油的组成及香气活性成分的GC-MS-O分析

食品与发酵工业 2013 北大核心 CSCD

摘要:采用水蒸气蒸馏法提取香橼皮精油,运用气相色谱-质谱-嗅辨仪联机技术(GC-MS-O)对其成分组成及香气活性成分进行了研究.结果显示:香橼精油中柠檬烯的含量最高,为精油的50.53%,其次为对伞花烃(16.40%),其他含量较高的成分还有γ-萜品烯(8.70%)、罗勒烯(5.03%)、β-蒎烯(3.35%),α-蒎烯(2.66%)和β-月桂烯(2.30%).另外,检测出11种香气活性成分,其中已鉴定的9种为α-蒎烯、β-蒎烯、对伞花烃、柠檬烯氧化物、里那醇、4-萜品醇、反-对-薄荷-2,8-二烯醇、丙酸松油酯、乙酸橙花酯、巴伦西亚橘烯.嗅闻结果显示,伞花烃和丙酸松油酯可能对香橼的特征香气起重要作用.

关键词: 香橼 精油 化学成分 香气特征

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支原体对细胞培养污染的研究概况

动物医学进展 2013 北大核心 CSCD

摘要:支原体是自然界中存在的最小、最简单的原核生物,大小介于细菌和病毒之间,可通过滤菌器,对许多抗生素有抗性,是细胞培养污染中一种常见的微生物。被支原体污染后的细胞培养物,引起细胞形态学和功能的改变,导致用细胞基质制备的生物制品报废,且很难清除。一旦发生污染,就意味着试验的失败,造成巨大的人力、物力、财力的浪费。从支原体对细胞培养物污染后造成的危害及对支原体污染的预防、检测、清除等的研究进展进行论述,为细胞支原体污染的防控提供依据和手段。

关键词: 细胞培养 支原体污染 检测技术 清除

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稻曲病菌突变体B-726生物学性状分析及其T-DNA插入位点侧翼序列的克隆

中国农业科学 2013 北大核心 CSCD

摘要:【目的】分析稻曲病菌T-DNA插入突变体库中致病力减弱突变菌株B-726的生物学性状,分析其T-DNA插入位点的侧翼序列,克隆因外源基因插入被破坏正常表达的基因,为明确该基因在稻曲病菌致病过程中的作用奠定基础,并为稻曲病防治新途径的制定提供理论依据。【方法】通过测定突变菌株B-726生长速率、产孢能力及致病力检测,分析其生物学性状;Southern杂交分析B-726外源基因插入的拷贝数;利用HiTail-PCR获得T-DNA插入位点的侧翼序列;运用RACE-PCR技术,克隆与插入位点毗邻的基因全长;用半定量RT-PCR分析该基因表达情况。【结果】突变菌株B-726与野生菌株P1相比致病力极显著下降,产孢能力、生长速率显著下降。Southern杂交结果显示T-DNA在菌株B-726中以单拷贝形式插入。经过序列分析发现,T-DNA插入在1个命名为Uvt-726上游344 bp处,半定量PCR结果表明,Uvt-726在B-726表达量较P1显著下降。【结论】克隆了1个可能与稻曲病菌致病力相关的基因,推断该基因在稻曲病菌致病过程中起着重要的作用。

关键词: 稻曲病菌 T-DNA插入突变 致病力 基因克隆

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