科研产出
花生AhDRRP基因启动子的克隆
《广东农业科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要:采用基于PCR的基因组DNA步移法,首次从抗黄曲霉品种粤油20花生中克隆AhDRRP基因起始密码子ATG上游403 bp启动子序列,并对其进行植物顺式作用元件数据库PLACE预测分析。研究结果表明,该启动子序列含有大量的TATA box,CAAT box,GATA box;CURECORECR、DOFCOREZM、TAAAGSTKST1等多种抗逆应答元件以及植物激素调节元件2SSEEDPROTBANAPA、ARR1AT、SEF1MOTIF、SEF4MOTIFGM7S等,预示了该基因可能在植物的逆境应答中发挥重要作用。
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花生蛋白超声微波协同提取工艺研究
《广东农业科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要:采用Box-Behnken中心组合试验设计对花生蛋白的超声微波辅助提取工艺进行优化,分析了微波功率、pH值、料液比、提取时间和酸沉pH值5个单因素对蛋白质提取率的影响,建立了微波功率、pH值和料液比的三因素回归模型。结果表明:微波功率、pH值、料液比、提取时间、酸沉pH值对蛋白质提取率有显著影响(P<0.05),提取的最佳工艺参数为:在微波功率72 W、pH值9.73及料液比1∶28的条件下提取500 s,并调节pH值至4.5致酸沉。在此条件下提取两次,蛋白质提取率为88.37%,产品蛋白含量为88.95%。
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一株抗花生青枯病菌海洋放线菌的分类鉴定及其活性产物研究
《广东农业科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要:从2 200多个海洋放线菌株中筛选得到菌株H41-26对花生青枯病菌(Pseudomonas solanacearum)有较强的拮抗作用。通过菌株形态特征、培养特性、生理生化特性、细胞壁化学组分及16S rDNA序列分析,初步确定菌株H41-26为链霉菌属金色(Aureus)类群中的新种-闸坡链霉菌(Streptomyces zhapoensis)。采用硅胶柱层析和高效液相半制备的分离纯化技术,主要活性成分鉴定为放线菌素V。首次报道了放线菌素V对花生青枯病菌的最小抑制浓度为3.91 mg/mL,8%放线菌素V乳油稀释1 000倍施药7 d和10 d后对花生青枯病的盆栽试验防治效果均在70%以上,具有较好的防治效果,为放线菌素V在植物病害防治方面的研究应用奠定了基础。
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猪链球菌2型西藏小型猪感染模型的初步建立
《动物医学进展 》 2011 北大核心 CSCD
摘要:选取3个流行病学背景不同的猪链球菌2型菌株人工感染西藏小型猪,探讨西藏小型猪作为猪链球菌2型毒力评价模型动物的可行性。12头西藏小型猪分成4个组,A组为阴性对照组接种肉汤培养基;B、C、D三组分别接种猪链球菌2型分离株GZ06-122B、SH06-21D和HA9801。GZ06-122B株和SH06-21D株分离自华南地区健康猪的扁桃体,毒力基因表型分别为sly-/mrp-/ef-和sly+/mrp+/ef+。HA9801株分离自江苏患败血症死亡的猪体内,毒力基因表型为sly+/mrp+/ef+。接种GZ06-122B株的试验猪无明显的临床症状,体温不升高,血液循环中也无细菌出现;试验猪感染SH06-21D株和HA9801株后临床症状相当严重,尤其是感染HA9801株后,出现体温升高、跛行和神经症状,甚至死亡。攻毒后1周内,C组试验猪病死1头,D组病死2头。从而表明HA9801株有很强的毒力,SH06-21D株次之,GZ06-122B株的毒力较弱,证实了西藏小型猪对猪链球菌2型易感,且可用于区分不同猪链球菌2型分离株的毒力强弱。
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甘薯AGPase大小亚基基因的克隆与序列分析
《广东农业科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要:利用RT-PCR方法从甘薯品种广紫薯1号中克隆出淀粉合成关键酶-腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(ADP-Glucose Pyrophosphorylase,AGPase)大小亚基基因的cDNA序列,大亚基命名为ibAGPL1,小亚基分别命名为ibAGPSI和ibAGPsII。序列分析表明,该cDNA序列均包含了完整的开放阅读框。系统进化树分析表明,所克隆基因编码的氨基酸序列与其他植物来源的AGPase大小亚基氨基酸序列有较高的同源性,尤其是与双子叶植物来源的大小亚基基因亲缘关系较近。这3个基因的克隆期望为下一步甘薯转基因育种研究提供候选基因。
关键词: 甘薯 腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶 淀粉合成
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吉林省2006-2010年羊传染性脓疱病的流行病学调查及分析
《中国兽医学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要:为了解近年来羊传染性脓疱病在吉林省的流行情况,本试验采用PCR方法对2006-2010年间采自吉林省9个不同市县85个养羊户疑似羊传染性脓疱病毒(ORFV)感染的628份痂皮样本(背部、乳房、四肢以及尾根等部位皮肤)进行羊传染性脓疱病毒核酸的检测,在各市县不同年龄不同品种羊的皮肤痂皮样本中均检测到一定程度的ORFV,平均阳性率为24.36%(153/628),其中以1~6月龄羔羊的阳性检出率最高。应用间接ELISA方法对同期采集自上述地区羊群中的2 160份血清样本进行ORFV抗体检测,其中有852份呈现ORFV抗体阳性反应,平均阳性率为39.44%(852/2 160)。以上结果表明,ORFV在吉林省大部分地区羊群中的感染已经非常普遍。
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筛选寄生荔枝蛀蒂虫卵的赤眼蜂种类研究初报
《广东农业科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要:针对荔枝蛀蒂虫的生物防治应用技术问题,在室温27(±3)℃条件下,用10种供试的赤眼蜂种类(或种群)对荔枝蛀蒂虫卵寄生能力进行筛选试验。结果发现,仅小灰蝶分索赤眼蜂Trichogrammatoidea hypsipylae Nagaraja和拟澳洲赤眼蜂Trichogramma confusum Viggiani 2种可寄生荔枝蛀蒂虫卵。前者为中国新纪录种,其寄生率较高,达到49.89%。这一突破为利用该蜂种进行荔枝蛀蒂虫的生物防治提供了可能性,但2种赤眼蜂均不能在荔枝蛀蒂虫的卵内羽化出蜂。进一步的研究将探索小灰蝶分索赤眼蜂不能羽化出蜂的原因并对其进行驯化改良,期望培育能持续自然控制荔枝蛀蒂虫的小灰蝶分索赤眼蜂新种群。
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利用氨基酸指标评价鱼粉质量及掺假鉴别
《饲料工业 》 2011 北大核心
摘要:鱼粉是一种重要的优质动物蛋白质原料,富含各种必需氨基酸,通过对鱼粉样品氨基酸数据的分析,总结出合格、低质、掺假鱼粉的氨基酸含量变化规律,提供了运用氨基酸指标评价鱼粉质量及掺假鉴别的方法。
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广东番茄黄化曲叶病毒AC2基因的原核表达及抗血清制备
《华南农业大学学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要:利用PCR方法从广东番茄黄化曲叶病毒分离物G3(Tomato yellow leaf curl Guang dong virus-[G3],TYLCGuV-[G3])全长序列的重组质粒上扩增该病毒的AC2基因,将其构建至原核表达载体pET-28b(+)上,经IPTG诱导,在大肠埃希菌Rosetta(DE3)Ⅲ中高效表达.SDS-PAGE电泳结果显示,目的融合蛋白与预期大小一致,相对分子质量约为19 500.以诱导的融合蛋白为抗原,免疫注射新西兰大耳白兔制备抗血清,间接ELISA测定抗血清效价为1∶16 384.Western-blotting检测结果表明,制备的抗血清有较好的抗原-抗体识别反应,为专化性抗血清.
关键词: 广东番茄黄化曲叶病毒 AC2基因 原核表达 抗血清制备
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