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杂交油菜宁杂11号种子纯度SSR标记快速检测方法

分子植物育种 2013 CSCD

摘要:本研究以杂交油菜新品种宁杂11号为研究对象,利用SSR分子标记技术,筛选出共显性标记引物Na10-E02,建立了一套油菜杂交种纯度的快速分子检测方法:种子利用夜间萌发,碱裂解法快速提取DNA,PCR反应2h,电泳1.5h,简化的银染法染色10min,从获取样品种子到出检测结果只需要不到一天的时间,一个熟练科技人员每个工作日至少可以完成6×96=576粒种子的检测量。利用这套技术对生产中大面积制种的9个样品纯度检测结果与田间种植鉴定的实际纯度结果极显著正相关,相关系数达到0.984(P<0.01),表明这套技术可以用于宁杂11号杂种纯度的快速准确鉴定。

关键词: 甘蓝型油菜 杂交种 宁杂11号 SSR标记 纯度鉴定

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粪肠球菌R-612-Z1在不同贮藏条件盐水鸭中的生长变化规律

江苏农业学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:摘要:为研究不同贮藏条件下盐水鸭肉中粪肠球菌R-612-Z1的生长情况,在无菌条件下对巴氏消毒后盐水鸭肉进行以下处理:将粪肠球菌R-612-Z1菌悬液喷洒至鸭肉上,真空包装0℃贮藏(M1)、托盘包装0℃贮藏(M2)、真空包装4℃贮藏(M3)、托盘包装4℃贮藏(M4)、真空包装10℃贮藏(M5)、托盘包装10℃贮藏(M6),分别设置空白对照.在10d的贮藏过程中,各样品的pH值均显著降低(P〈0.05),其中10℃贮藏的样品pH值比0℃、4℃样品pH值显著降低(P〈0.05).在贮藏1d后,各处理组的pH值均小于对照组.6组处理样品中粪肠球菌和菌落总数均在第4d显著增加,在第10d显著降低.M6处理组样品中粪肠球菌和菌落总数最高.各对照组粪肠球菌和菌落总数在储藏期间均呈上升趋势.通过PCR-DGGE可知,粪肠球菌在试验贮藏过程中生长良好,并且对其他菌种有一定的抑制作用.PCR-DGGE图谱显示,处理组样品中菌落多样性比对照组低.贮藏温度对菌相的影响较大,而包装方式对菌相没有显著影响.结果表明,10cC贮藏最适宜粪肠球菌生长,能显著降低鸭肉pH值,抑制样品中某些微生物的生长.

关键词: 粪肠球菌 盐水鸭 贮藏 多样性 PCR-DGGE

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小麦赤霉病菌拮抗菌AF0907的分离鉴定及其拮抗特性

江苏农业学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:为了分离筛选对小麦赤霉病菌有拮抗作用的细菌,并研究其拮抗特性。采用系列稀释法和平板对峙法从土壤中分离筛选小麦赤霉病菌拮抗菌;采用16 SrDNA序列分析和生理生化特性进行拮抗菌的鉴定;采用平板对峙法研究拮抗菌的拮抗谱;通过田间喷施试验研究拮抗菌对小麦赤霉病的防治效果。结果显示:从土壤中分离筛选到小麦赤霉病菌拮抗菌AF0907,根据其形态、生理生化特性以及16 SrDNA序列分析,菌株AF0907被鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。AF0907对10种常见的植物病原菌都具有拮抗效果;菌株AF0907可以抑制禾谷镰刀菌菌丝的生长,也能抑制病原菌孢子的萌发。田间试验结果显示:拮抗菌AF0907可以有效地降低小麦赤霉病的发病率,先喷施拮抗菌液再喷施赤霉孢子液处理下防治效率可以达到40.37%。

关键词: 赤霉病菌 枯草芽孢杆菌 拮抗菌 拮抗物质

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猪PRRS抗性筛选单核细胞来源巨噬细胞模型的建立

南京农业大学学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:采用密度梯度离心法分离猪外周血单核细胞(PBMCs),通过添加GM-CSF刺激使PBMCs转化为外周血单核细胞来源巨噬细胞(MDMs);比较了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染MDMs和肺泡巨噬细胞(PAMs)不同时间的病毒载量及病毒TCID50,研究了PRRSV体外感染猪MDMs后复制和滴度的变化规律。结果表明:PBMCs转化的MDMs具有很好的墨汁吞噬能力,MAC387标记阳性;GM-CSF刺激PBMCs转化为MDMs的最适质量浓度为20 ng.mL-1,刺激时间为72 h时MDMs转化率最高;PRRSV体外感染12 h时MDMs中病毒载量达到最高值,随后迅速下降;细胞上清液的病毒滴度在12~24 h进入平台期,然后转入衰亡期,与PRRSV在PAMs中增殖趋势相似。本试验建立的PRRS抗性筛选MDM模型,具有受检猪只损伤小、简便易行的特点,可代替PAM细胞模型用于评价猪对PRRS的抗性。

关键词: 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS) 单核细胞来源巨噬细胞(MDM) 肺泡巨噬细胞(PAMs) 抗性

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西瓜防御素(ClPDF)基因挖掘及序列分析

华北农学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:为明确西瓜防御素基因(ClPDF)的结构和功能,采用生物信息学方法对西瓜防御素基因进行了详细的全基因组挖掘和序列分析。结果表明,从西瓜基因组中共获得7个防御素基因,ClPDFs基因编码的氨基酸序列都含有高度保守的8个半胱氨酸、1个甘氨酸、1个丝氨酸和1个芳香族氨基酸残基。分析发现,ClPDFs基因在理化性质上有一定的差异。系统进化分析说明,ClPDFs与拟南芥PDF2基因家族聚为一类。二级结构预测结果说明,所有ClPDFs序列均以不规则卷曲为主要组成元件,在延伸链和α-螺旋组成上存在差异。信号肽和跨膜结构预测结果相似,仅有1条序列无信号肽,1条序列有跨膜区,而其他序列都含有信号肽、无跨膜区。证明了西瓜防御素基因为多基因家族,都含有高度保守的结构域,但在结构上西瓜防御素基因差异较大,为进一步探讨西瓜防御素ClPDFs的生物功能奠定了基础。

关键词: 西瓜 防御素 基因进化 生物信息学

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江苏省水稻纹枯病菌遗传多样性分析与致病力研究

江苏农业学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:通过ISSR(简单序列重复区间)标记技术,针对87 株水稻纹枯病菌菌株的遗传多样性进行了聚类分析.从9 个随机引物中筛选出3 个重复性好、特异性高的ISSR 引物,PCR 扩增共产生76 个ISSR 分子标记,其中96. 05%的片段具有多态性,表明水稻纹枯病菌菌株个体间存在较大的遗传变异,具有丰富的遗传多样性.聚类分析结果显示测试菌株被分成了7 个遗传聚类群,ISSR 遗传聚类组群的划分与菌株的地理来源有一定的相关性.菌株生长速率和致病力的测定结果表明,菌株的致病力差异与菌株来源、DNA 条带的多态性及遗传聚类群的划分并无明显相关,而与菌丝的生长速率存在中等程度的正相关性.研究结果对今后利用代表性菌株进行水稻抗纹枯病的种质资源筛选以及抗病品种的合理布局提供了参考.

关键词: 水稻 立枯丝核菌 聚类分析 致病力 ISSR

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支原体脂蛋白及其变异与宿主互作研究进展

生物技术通报 2013 北大核心 CSCD

摘要:脂蛋白是支原体的重要结构,在支原体与宿主间的互作中有重要作用,近些年越来越多的报道指出脂蛋白在支原体毒力及致病性中占有重要地位。介绍支原体脂蛋白的特性和功能,黏附作用,致炎性反应和诱导细胞凋亡的作用。进一步阐述脂蛋白在基因家族的调控下通过ON/OFF开关、大小变异、结构重组、基因水平转移及抗原调节等发生抗原相位变异的机制,以及脂蛋白变异在支原体致病力方面的影响和重要生物学意义。

关键词: 支原体 脂蛋白 抗原变异 表面多样化

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米糠毛油对肉鸡肌肉品质、脂肪酸组成及抗氧化功能的影响

动物营养学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:本文旨在研究米糠毛油与其他不同油脂对肉鸡肌肉品质、脂肪酸组成及抗氧化功能的影响。试验选取2 400只1日龄肉鸡,随机分为4组,每组6个重复,每个重复100只,在基础饲粮中添加相同比例的米糠毛油(CRBO)、大豆毛油(CSO)、猪油(LO)及棕榈油(PO)。试验期42d。结果表明:1)试验前期(1~21 d)CRBO组平均日采食量显著低于CSO、PO组(P<0.05),各组全期平均日增重及料重比无显著差异(P>0.05)。2)CRBO组腿肌烹饪损失显著低于LO组(P<0.05),粗蛋白质含量显著低于CSO组(P<0.05),胸肌粗蛋白质含量显著低于CSO、LO组(P<0.05),粗脂肪含量显著低于LO组(P<0.05)。关于胸肌脂肪酸组成,PO、LO组饱和脂肪酸含量显著高于CRBO、CSO组(P<0.05),不饱和脂肪酸含量显著低于CRBO、CSO组(P<0.05),CRBO组多不饱和脂肪酸(PUFA)含量最高,但与其他组差异不显著(P>0.05)。3)试验第21天,CSO、PO组肝脏总抗氧化能力(T-AOC)显著高于LO组(P<0.05),CRBO组血清丙二醛含量显著低于PO组(P<0.05);试验第42天,CSO组肝脏T-AOC显著低于PO组(P<0.05)。LO、PO组的血清T-AOC均在一定程度上高于CRBO、CSO组,其中PO组显著高于CSO组(P<0.05)。结果提示,相比其他油脂,CRBO能降低肌肉粗蛋白质含量、胸肌饱和脂肪酸含量及提高胸肌不饱和脂肪酸含量和不同程度地提高胸肌PUFA含量,但对肌肉pH、滴水损失和肌肉及肝脏抗氧化能力无显著性影响。

关键词: 油脂 肉鸡 肌肉品质 脂肪酸 抗氧化

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重金属在肉鹅组织中的分布特点

东北农业大学学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:研究肉鹅生长过程中重金属在机体组织的分布特点。试验在广东肉鹅主产区选择一家鹅场,饲养健康雏鹅500只,在1、70和90日龄随机选取8只采集胸肌、腿肌、肝脏和骨骼组织样,并采集养殖地洗浴池水样和池底淤泥样品。组织样、水样和淤泥样中铅(Pb)、镉(Cd)、铬(Cr)和砷(As)的测定方法均参照国家标准方法。结果表明,在肉鹅生长期,四种组织的各重金属含量均在安全范围内。Pb在骨骼含量最高,富集程度较高,在另三种组织中累积程度不高,含量低;Cd在肝脏中含量高,富集程度较高,在另三种组织中含量低且累积程度不高;Cr在胸肌和骨骼中高,在腿肌和肝脏中含量较低,除在骨骼中有一定累积外,在另三种组织无明显富集;As在各组织均无检出。

关键词: 重金属 组织 分布

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鸡源坦布苏病毒(SN01株)的分离与鉴定

浙江农业学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:采用SPF鸡胚与vero细胞传代接种法,从江苏某蛋鸡场临床表现为产蛋下降、卵泡萎缩、全身多器官出血为主要特征的发病鸡肝脏、卵巢病料组织中分离一株病毒。该分离毒不能凝集鸡和鹅红细胞,并对乙醚、氯仿敏感;病毒核酸为RNA;PCR结果排除了分离毒为禽流感病毒、新城疫病毒、产蛋下降综合征病毒、传染性支气管炎病毒、传染性喉气管炎病毒;用坦布苏病毒特异引物扩增为阳性,序列测定与分析结果显示分离毒与GenBank上登录和实验室保存的坦布苏病毒E基因序列同源性在99%以上。上述结果表明分离毒(SN01)可能是一种新的坦布苏病毒,属于黄病毒科坦布苏病毒属,暂称为鸡源坦布苏病毒。

关键词: 坦布苏病毒 SN01株 鉴定

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