科研产出
猪肺炎支原体P97R1抗原免疫刺激复合物的制备及对活疫苗免疫刺激能力的增强作用研究
《中国预防兽医学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：为增强肌肉注射免疫条件下猪肺炎支原体(Mhp)活疫苗的免疫刺激能力,并补充其缺乏的针对重要黏附因子P97R1的应答,本实验采用透析法制备含有P97R1的免疫刺激复合物(ISCOM-P97R1),并将ISCOMP97R1作为活疫苗的佐剂,通过小鼠模型进行免疫学评价。结果表明,电镜下观察所制备的ISCOM-P97R1具有ISCOM的典型蜂窝状结构,直径为30 nm~40 nm,P97R1蛋白的包封率可达85.6%。免疫后7 d即可在小鼠血清中检测到高水平的特异性P97R1抗体,并且其针对Mhp全菌蛋白的抗体也显著高于无佐剂的活疫苗对照组。结果表明,ISCOM-P97R1对Mhp活疫苗免疫刺激能力具有显著的增强作用,同时可以有效诱导产生针对P97R1的免疫应答,进一步增强了疫苗的保护能力。
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气调贮藏对‘红阳’猕猴桃果胶含量及相关酶活的影响
《食品与发酵工业 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：研究了气调对采后‘红阳’猕猴桃贮藏期间果实硬度、果胶(可溶性果胶、原果胶)含量及果胶代谢相关酶(果胶甲酯酶PE、多聚半乳糖醛酸酶PG和纤维素酶CX)活性的影响。在温度(1±0.5)℃、相对湿度80%~98%的条件下,以空气为对照(CK),采用了4种不同的气调组分CA1(2%O2+3%CO2)、CA2(2%O2+6%CO2)、CA3(5%O2+3%CO2)、CA4(5%O2+6%CO2)。试验表明:红阳猕猴桃后期贮藏过程中,果实软化与PG和CX有密切联系,而与PE可能无直接联系。气调贮藏可显著延长果实贮藏期,其中CA1和CA3处理的果实贮藏期长达120 d,而CA1可更有效地延缓果实硬度的下降,抑制细胞壁降解酶的活性,更好地保持‘红阳’猕猴桃的商品性。
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鸡传染性支气管炎病毒RT-LAMP检测方法的建立
《江苏农业学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：为了建立一种适用于鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)快速检测方法,本试验根据IBV衣壳蛋白M基因保守区域设计了一套特异性引物,并对反应条件进行优化。结果显示,建立了IBV的RT-LAMP检测方法,该方法既可通过将反应产物进行凝胶电流观察结果,也可直接通过向反应产物中加入荧光染料对结果进行可视化观察。该方法具特异性,对鸡新城疫病毒(NDV)、H9亚型禽流感病毒(AIV H9)、坦布苏病毒(TMUV)及正常鸡胚尿囊液均无扩增反应。该方法对IBV的最小检测量为12 fg。表明本研究建立的方法简便而快速,灵敏而特异,适合于兽医临床对IBV的快速检测及流行病学调查。
关键词： 鸡传染性支气管炎病毒 环介导等温扩增技术 检测方法
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不同波峰的LED红蓝光质组合对黄瓜苗生长和光合特性的影响
《江苏农业学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：采用波峰660 nm的红光(R)+波峰450 nm的蓝光(B)LEDA型和波峰630 nm红光(R)+波峰460nm蓝光(B)的LEDB型2种光源,并分别设置不同红蓝光配比(R/B)为5、7、9和20,用于黄瓜育苗。结果表明:不同R/B光质处理对黄瓜幼苗的生长发育有调节作用,其中对干质量、鲜质量、叶面积、叶绿素含量、光合速率、蒸腾速率以及气孔导度的调节变化趋势相同,即随着R/B值的增加呈现先增加后降低的趋势;LEDA型光源和LEDB型光源在黄瓜育苗的整体水平上无显著差异,但最适R/B值不同,LEDA型光源下R/B值为7的处理各项指标综合表现优于其他处理,LEDB型光源下R/B值为9的处理各项指标综合表现优于其他处理。此外,LEDB型光源红、蓝光的电能转化效率比LEDA型光源分别提高了317.9%和38.5%,而且LEDB光源的能效比LEDA光源和荧光灯分别提高了55%和13%。因此LEDB型光源较有利于在黄瓜育苗中应用。
关键词： 发光二极管(LED) 红蓝光配比 波峰 黄瓜
耕作措施与秸秆还田对稻麦两熟制农田土壤养分、微生物生物量及酶活性的影响
《水土保持学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：为寻求适宜当地生产和生态环境的最适耕作措施和秸秆还田方式组合,通过开展2年(2009-2011年)田间试验,研究不同耕作措施和秸秆还田对稻麦轮作农田土壤养分、微生物量碳氮及土壤酶活性的影响.结果表明:无论是翻耕还是旋耕,秸秆还田条件下的土壤养分含量均不同程度地高于秸秆不还田,除速效钾外,差异均达显著水平;两季秸秆均还田处理土壤微生物量碳含量均显著高于两季秸秆均不还田;除旋耕秸秆两季均还田外,旋耕麦季稻秸还田处理土壤微生物量氮含量显著高于其他各处理;与翻耕秸秆不还田相比,翻耕两季秸秆均还田和旋耕两季秸秆均还田均显著提高了土壤脲酶和蔗糖酶活性,其中脲酶提高了10.96%和9.72%,蔗糖酶提高了30.36%和17.87%.
关键词： 秸秆还田 耕作措施 土壤养分 微生物量碳和氮 土壤酶活性
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叶黄素在有机溶剂中的稳定性
《食品科学 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：采用C30-HPLC-DAD检测叶黄素分别在30、40、50℃无水乙醇、乙酸乙酯、四氢呋喃、甲苯中的保留率变化,并分析溶剂种类、氧分压、温度对有机溶剂中叶黄素稳定性的影响。结果表明:在同一温度、常规空气条件下,叶黄素在4种有机溶剂中的稳定性顺序依次为:无水乙醇>乙酸乙酯>四氢呋喃>甲苯,反式叶黄素的保留率随时间的延长而一直呈下降趋势,总顺式叶黄素的保留率则先略有上升后缓慢下降;充氮可有效提高叶黄素的稳定性,效果在四氢呋喃中尤为明显,而且随着时间的延长反式叶黄素的保留率一直呈缓慢下降趋势,总顺式叶黄素的最终保留率明显高于常规条件;温度越高,反式叶黄素的稳定性越低,越易发生异构化反应;反式叶黄素在4种溶剂中的降解遵循一级动力学模型。
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猪弓形虫重组MIC3蛋白单克隆抗体的制备及其初步应用
《畜牧兽医学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：为获得针对猪弓形虫MIC3蛋白的单克隆抗体,为进一步研制免疫金标试纸条提供材料,作者以纯化的重组MIC3蛋白免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备单克隆抗体(McAb)。经ELISA筛选阳性克隆和亚克隆建株,体内诱生腹水法制备McAb,测定其亚类、效价,进行Western blot分析,并利用胶体金颗粒标记的McAb制备免疫金标试纸条。成功制备了2株稳定分泌抗MIC3蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株B7和D3,2株McAb的免疫球蛋白亚类均为IgG2a,其ELISA腹水效价分别为1∶64万和1∶192万,Western blot结果表明,2株McAbs腹水均能分别与纯化的重组MIC3蛋白和猪弓形虫全虫蛋白中大小为56和38ku左右的蛋白发生特异性反应;用纯化后McAb标记的胶体金颗粒制备的免疫金标试纸条可以检测到最低浓度为4×104 CFU·mL-1的弓形虫速殖子。本研究为猪弓形虫病的现场诊断提供了有效的方法,显示出很好的临床应用前景。
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甘蓝型油菜角果的抗裂角特性及其相关分析
《中国油料作物学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：应用改良拉裂法,对286份甘蓝型油菜品种(系)进行裂角力测定。结果表明,抗裂角性状在现有甘蓝型油菜品种(系)中存在广泛变异。在146份甘蓝型杂交油菜品种(组合)中,裂角力变异范围0.82~2.87N(牛顿),平均裂角力1.83N,变异系数22.11%;裂角力小于1N的有3份(占2.05%),1~2N之间的96份(占65.75%),在2~3N之间的47份(占32.19%),没有检测到裂角力大于3N的品种或组合。在140份甘蓝型常规油菜品种(系)中,裂角力变异范围0.58~3.47N,平均裂角力1.94N,变异系数31.55%,均高于杂交油菜,其中裂角力小于1N的6份(占4.29%),在1~2N之间的76份(占54.29%),在2~3N之间的49份(占35%),大于3N的9份(占6.42%)。与角果和籽粒性状的相关分析表明,油菜角果的裂角力值与单角壳重、单位面积壳重、千粒重达极显著正相关,与每角粒数和角果宽度达到显著正相关。分析杂种与亲本恢复系之间的关系,发现杂种裂角力与恢复系的角果宽度、单角壳重、单位面积壳重、千粒重等性状呈极显著正相关,与粒壳比呈极显著负相关。说明角果大小显著影响油菜的抗裂角特性,角果大、果壳厚、千粒重高等可以作为筛选抗裂角油菜的形态指标。在杂交油菜育种中选用大角大粒恢复系亲本能有效提高杂交油菜的抗耐裂角性。
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单端孢酶烯3-O-乙酰转移酶编码基因Tri101的原核表达及多克隆抗体制备
《中国农业科学 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：【目的】克隆Tri101并通过原核表达获得纯化蛋白,通过免疫SPF大白兔获得高效价、高灵敏度的多克隆抗体,为Tri101蛋白及转Tri101作物的检测提供抗体基础【。方法】以禾谷镰刀菌(Fusarium graminearium)F3210为材料,PCR法获得Tri101并连接至表达载体pET29a(+),将重组表达载体转化大肠杆菌BL21(DE3)后利用IPTG进行诱导表达。利用纯化表达产物制备多克隆抗体。【结果】SDS-PAGE分析结果表明,Tri101在大肠杆菌BL21(DE3)中得到表达,重组蛋白大小为50 kD左右,以包涵体形式存在。利用HisTrap亲和柱纯化重组蛋白,最佳咪唑洗脱浓度为200 mmol.L-1。采用烟草蚀纹病毒蛋白酶切除重组蛋白中的His标签,酶切产物经HisTrap亲和柱再次纯化后免疫SPF大白兔,制备多克隆抗体。经ELISA法检测抗体效价为1﹕12 000,检测灵敏度为0.05×10-6μg.mL-1。Western blotting结果证明制备的多克隆抗体对Tri101具有较好的专一性。【结论】通过Tri101的克隆及原核表达,获得了纯化的融合蛋白,通过免疫动物制备了兔源多克隆抗体,可用于Tri101蛋白及转Tri101小麦的检测。
关键词： 单端孢酶烯3-O-乙酰转移酶 Tri101 原核表达 多克隆抗体 小麦赤霉病
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草莓属及其近缘属植物的花粉形态电镜观察
《东北农业大学学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：应用扫描电镜对包括9个种以及1份自然五倍体材料,共计19份草莓属种质和1份近缘属蛇莓植物的花粉形态进行观察分析。结果表明,草莓和蛇莓花粉均为长球形,具有3条萌发沟,沿极轴方向等间距分布,几乎延伸至两极。花粉大小和外壁纹饰有差异,蛇莓花粉粒大于草莓属植物;草莓属植物及蛇莓属植物花粉外壁纹饰均为近似平行于极轴的条纹,但蛇莓花粉外壁纹饰较为零乱。在草莓属不同材料之间,二倍体的森林草莓、东北草莓、蝦夷草莓、绿色草莓和四倍体的东方草莓和伞房草莓的花粉粒较小,外壁纹饰较浅,而八倍体的弗州草莓、智利草莓和栽培种凤梨草莓的花粉粒相对较大,外壁纹饰较深。自然五倍体材料的花粉形态与八倍体草莓相似。对一些典型的花粉形态性状进行聚类分析,在种的水平上聚类结果与传统分类有一定相似性,但对于栽培品种,聚类结果与品种的系谱不相关,表明花粉形态学可能不适用于草莓品种亲缘关系的分析。
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