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微口膜壳绦虫DAZ基因的原核表达、转录水平及组织定位研究

中国预防兽医学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:为研究微口膜壳绦虫无精子症(DAZ)基因的生物学功能,本研究利用在线软件对WormBase中微口膜壳绦虫DAZ基因(HmN_000202400)及其编码蛋白进行生物信息学分析,并构建DAZ基因的遗传进化树.结果显示,微口膜壳绦虫DAZ基因cDNA全长1494 bp,编码497个氨基酸,存在保守结构域和完整的开放阅读框,无跨膜区和信号肽,且与缩小膜壳绦虫和微小膜壳绦虫亲缘关系较近.本研究经PCR扩增DAZ基因,构建重组质粒pET-22b-DAZ,经双酶切鉴定正确后经IPTG诱导表达,并采用His-Ni柱亲和层析法纯化,经SDS-PAGE检测结果显示,所表达的重组DAZ蛋白(rDAZ)以包涵体形式存在,分子量约为57 ku,且纯化效果较好.利用rDAZ免疫新西兰大白兔,制备兔rDAZ的多克隆抗体,经间接ELISA检测其效价,并利用western blot检测其反应原性.结果显示,该多克隆抗体效价可达1∶128000,且能够与微口膜壳绦虫的天然总蛋白反应,表明获得了反应原性较好的兔rDAZ的多克隆抗体.为研究DAZ的生物学特性,本研究采用荧光定量PCR(qPCR)分别检测DAZ基因在微口膜壳绦虫成虫、似囊尾蚴及虫卵中的相对转录水平;将微口膜壳绦虫制备石蜡切片观察虫体的各组织结构;利用制备的兔rDAZ多克隆抗体采用间接免疫荧光试验(IFA)检测DAZ蛋白在虫体各组织中的定位.qPCR结果显示,DAZ基因在微口膜壳绦虫成虫、似囊尾蚴及虫卵中均不同程度转录,与其虫卵相比,DAZ基因在似囊尾蚴中的转录水平极显著升高(P<0.01),但在成虫中显著降低(P<0.05);石蜡切片观察结果显示,微口膜壳绦虫生殖系统发达,发育成熟的睾丸、卵巢、卵黄腺、子宫、受精囊等主要分布在成节中,而孕节内的其他生殖器官则逐渐退化,唯有子宫扩大并充满虫卵;IFA结果显示,在微口膜壳绦虫的睾丸中可见特异性绿色荧光,而卵巢、卵黄腺、子宫、受精囊等中则无该绿色荧光.上述结果表明,DAZ基因可能在微口膜壳绦虫生殖细胞的初始发育阶段发挥重要调控作用,微口膜壳绦虫不同节片内生殖器官的发育程度不同,且DAZ主要在微口 膜壳绦虫的睾丸中表达.本研究首次发现微口膜壳绦虫DAZ基因可能与雄性生殖系统的发育调控有关,该结果为进一步探究其调控机制奠定了基础.

关键词: 微口膜壳绦虫 DAZ基因 原核表达 多克隆抗体 间接免疫荧光试验

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植物生长调节剂在苹果疏花疏果上的应用研究进展

现代农业科技 2023

摘要:苹果在我国果树生产中占有重要的地位,疏花疏果作为提升果园生产效益的花果管理技术尤显重要。本文从疏花剂、疏果剂的种类和作用机理两方面介绍了几种可应用于苹果的植物生长调节剂,其中疏花剂主要有萘乙酸、乙烯利、赤霉素、6-苄氨基嘌呤、硫代硫酸铵、2-甲基-4-氯丁酸乙酯和NSK-905,疏果剂主要有萘乙酸、6-苄氨基嘌呤、脱落酸、西维因、苯嗪草酮、吲熟酯、3,5,6-三氯-2-吡啶氧基乙酸和丙基双氢茉莉酮酸酯,以期为今后苹果生产上植物生长调节剂的推广和使用提供参考。

关键词: 苹果 植物生长调节剂 疏花剂 疏果剂

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犊牛肺炎大肠杆菌的分离鉴定、耐药性及致病力检测

中国预防兽医学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:为确定新疆石河子地区某规模化牛场表现为呼吸道症状病死犊牛的细菌性病原,本研究采用常规细菌分离、PCR及生化鉴定方法从采集的病牛组织中分离并鉴定病原菌,采用PCR方法对其系统进化分群、采用K-B纸片扩散法检测细菌的药物敏感性、采用PCR方法分别检测细菌的耐药基因和毒力基因,经腹腔注射菌液进行小鼠的致病性试验,对分离菌株进行生物学特性研究。分离及鉴定结果显示,从病死犊牛的肺脏分离鉴定出的2株大肠杆菌(E1和E2)分属于A群和B1群;药敏试验结果显示两株分离菌对青霉素、阿莫西林、头孢他啶、头孢唑啉、头孢拉定、头孢哌酮、美罗培南、链霉素、妥布霉素、多西环素、麦迪霉素、阿奇霉素、氟苯尼考、替考拉宁、克林霉素耐药;且2株分离菌均检测到β-内酰胺类的blaTEM、喹诺酮类的aac(6’)-Ib、gyr A共3种耐药基因以及crl、csgA、fimH、pap、motA、hlyE、iucD、omp A、espA、Lux S、fyu A、pta共12种毒力基因;分离菌株耐药基因与耐药表型的结果表明分离菌株表现较强的多重耐药现象;小鼠的致病性试验结果显示分离菌株均为致病性大肠杆菌,E1菌株感染小鼠在32 h内全部死亡,E2菌株感染后36 h内死亡3只小鼠。感染小鼠死亡后剖检发现肺脏大面积出血。结果表明新疆石河子地区某规模化牛场表现为呼吸道症状病死犊牛的病原是致病性大肠杆菌,且分离菌表现较强的多重耐药现象并携带大量的毒力基因,但E2菌株的耐药基因与耐药表型相关性不强。本研究为新疆地区大肠杆菌所致犊牛肺炎的防治提供参考依据。

关键词: 犊牛肺炎 致病性大肠杆菌 耐药表型 耐药基因 毒力基因

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粗毛纤孔菌的生物学特性和抗氧化活性研究

菌物学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:以野外分离的一种药用真菌粗毛纤孔菌Inonotus hispidus为研究对象,对其生物学特性与抗氧化活性进行了研究。通过改变培养温度、初始pH、碳源及氮源4个单因素对粗毛纤孔菌进行固体培养,结果表明,最适培养温度为30℃、初始pH为9.0、碳源为蔗糖、氮源为酵母浸粉;采用L9(3~3)三因子三水平正交试验对固体培养最适碳源含量、氮源含量及初始pH组合进一步研究,得出对粗毛纤孔菌丝长速的影响排序为:氮源含量>碳源含量>初始pH,最佳组合为蔗糖30g/L、酵母浸粉1 g/L、初始pH 10.0。同时测定了粗毛纤孔菌在液体培养时的抗氧化活性,结果发现,粗毛纤孔菌液体培养的14 d内,多酚黄酮含量始终维持在较高的水平,对羟自由基、DPPH自由基、ABTS自由基的清除能力和铁离子还原能力较强,表明粗毛纤孔菌具有一定的抗氧化活性。

关键词: 药用真菌 粗毛纤孔菌 生物学特性 抗氧化活性

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益生菌发酵油菜秸秆饲料工艺优化及品质分析

现代畜牧科技 2023

摘要:为提升油菜秸秆饲料化利用营养水平,本研究选择不同益生菌混合发酵,对油菜秸秆与苜蓿按不同比例混合的饲料进行发酵试验并优化工艺,并利用相关性综合评价对营养成分和发酵品质进行分析.结果表明,发酵油菜秸秆饲料最佳工艺为:苜蓿/油菜秸秆为1∶2,接种量5%,菌种比例2∶1,发酵温度为20℃;经过优化后的发酵油菜秸秆,除缬氨酸外,苦味氨基酸含量均降低,而甜味氨基酸含量均升高,营养成分和发酵品质均有明显的增加.该研究结果为油菜秸秆高值化利用、产业链延伸开辟新途径和新疆油菜秸秆饲料综合利用、产品升级提供新思路.

关键词: 油菜秸秆 益生菌 发酵 饲料 品质分析

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浅析实验室天平的日常管理与期间核查

石河子科技 2023

摘要:天平作为定量分析工作中不可缺少的称量物品质量的精密仪器,可以有效帮助企业、科研机构、检测机构在生产、研发和检测工作中的精准测量.天平是否合理选用、科学管理、规范操作,直接决定量值传递、精密测量工作的质量.

关键词: 天平 天平等级 检定分度值 期间核查

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不同覆双膜和揭膜方式对南疆棉花产量和品质的影响

干旱地区农业研究 2023 北大核心 CSCD

摘要:以双膜覆盖栽培技术为研究基础,通过探索不同揭膜方式对棉花生长发育、产量及品质的影响,提出一种新型的地膜覆盖及揭膜方式,以期有效解决残膜污染问题.田间自然条件下,设置5个处理,即膜侧播种+双膜覆盖+苗后头水前揭膜(T1)、膜侧播种+双膜覆盖+苗后揭上膜(T2)、裸播(T3)、膜下播种+单膜覆盖+苗后揭膜(T4)、膜下播种+双膜覆盖+苗后揭上膜(CK),测定棉花农艺性状、生育期、成铃、产量及品质指标,进而分析处理间差异.结果表明:T1处理对棉花株高影响不显著,T2和T4处理对株高影响较小,而T3处理则导致株高显著降低,对棉花生长具有抑制作用;T1、T4和CK处理可以显著降低杂草数量,T2和T3处理对杂草数量的控制力度相对较弱;揭膜方式的变化对棉株生育期天数及产量形成的空间分布具有一定影响;T3处理会显著降低棉花产量,其他处理对产量无显著影响;不同处理对棉花纤维品质发育无显著影响.在保证株高、产量及品质不降低的基础上,T1处理能够控制杂草数量、优化成铃分布,可有效避免残膜污染,在生产上具有较好的推广应用价值.

关键词: 棉花 覆膜栽培 揭膜方式 生长发育 杂草数量 产量 纤维品质

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百里酚和香芹酚改变肠道微生物组成抑制羔羊腹泻的作用研究

微生物学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:【目的】本试验研究百里酚和香芹酚对滩羊羔羊腹泻、肠道短链脂肪酸和微生物组成的影响,旨在为利用植物提取物手段治疗羔羊腹泻提供可用的添加剂和理论基础。【方法】本研究选择腹泻发病时间为2-3 d的10只腹泻羔羊,随机分为2组,分为腹泻羔羊组(CON组)和百里酚和香芹酚处理组(SCAT组),试验期间SCAT组羔羊补充200 mg/只/d的百里酚和香芹酚1:1混合品,处理时间为7 d。【结果】百里酚和香芹酚处理能够显著提高腹泻羔羊日增重,降低羔羊腹泻指数和腹泻率(P<0.05),降低血清促炎因子表达水平(P<0.05),提高肠道短链脂肪酸(short-chain fatty acids,SCFA)丁酸浓度(P<0.05);同时百里酚和香芹酚能够改变腹泻羔羊肠道微生物组成,提高肠道中双歧杆菌(Bifidobacteriaceae)和阿克曼氏菌(Akkermansiaceae)的相对丰度,降低肠杆菌科(Enterobacteriaceae)相关菌的相对丰度。【结论】百里酚和香芹酚能够提高肠道有益菌相对丰度和有益代谢物丁酸的浓度,降低致病菌相对丰度,从而有效抑制羔羊腹泻,可作为新型替代抗生素产品研究和开发。

关键词: 滩羊 羔羊腹泻 百里酚 香芹酚 肠道微生物 短链脂肪酸

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羔羊不同超排方法的筛选及其对卵母细胞体外成熟的影响

畜牧与兽医 2023 北大核心

摘要:旨在比较不同超排方案对羔羊超数效果及其对卵母细胞体外成熟的效果,筛选最佳幼畜超排方案.试验以1~2月龄绵羔羊为研究对象,分为3组,其中2组(方案Ⅰ和方案Ⅱ注射激素)为试验超排组,1组为对照组(未注射激素),探究不同超排方法对绵羔羊卵巢的反应性、卵巢的大小及卵母细胞体外成熟的影响.结果表明,6次×12h间隔、注射总剂量180U促卵泡素(FSH)的超排方案Ⅱ效果优于4次×12h间隔、注射总剂量200 UFSH的超排方案Ⅰ,超排方案Ⅱ获得发育卵泡数(348.00±8.25)枚/只优于超排方案Ⅰ发育卵泡数(265.00±6.32)枚/只;体外培养卵母细胞24 h后,超排方案Ⅱ卵母细胞成熟率45.4%优于超排方案Ⅰ卵母细胞成熟率32.2%.研究筛选出6次×12h间隔、注射总剂量180UFSH,第1次注射FSH时同时肌内注射330 U PMSG的超排方案为最佳幼畜超排方案.本试验结果为绵羔羊扩展体外受精所需卵子的来源,缩短世代间隔,产生大量优秀后代,加速育种进程等方向的研究奠定一定的理论基础.

关键词: 绵羔羊 体外成熟 卵母细胞 超数排卵

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无人机喷雾参数对雾滴在红枣花期冠层沉积分布的影响

果树资源学报 2023

摘要:【目的】探究极飞Xp20电动四旋翼植保无人机喷雾对主干型红枣花期冠层沉积分布的影响。【方法】设置三因素三水平的正交试验,通过方差分析研究飞行高度、单位面积喷液量、飞行速度对枣树冠层雾滴沉积密度、雾滴均匀性、雾滴覆盖率的影响程度,并通过极差分析研究影响无人机在红枣花期冠层沉积分布的主次因素。【结果】四旋翼电动植保无人机的作业参数设置为处理6时雾滴沉积密度均匀性和覆盖率表现较好,即飞行高度1.5 m、喷液量37.5 L/hm~2和飞行速度2 m/s。【结论】综合分析极差结果,影响雾滴沉积密度的主要因素依次是飞行速度、飞行高度、单位面积喷液量。

关键词: 红枣 无人机 雾滴 极差分析

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