半滑舌鳎两种leptin基因的体外重组表达和生物活性分析

张雅星; 王滨; 柳学周; 徐永江; 史宝; 姜燕; 崔爱君; 张正荣; 孙冉冉; 《水产学报 》 2019 北大核心 CSCD

摘要：根据半滑舌鳎lepa和lepb编码氨基酸序列合成开放阅读框ORF肽段.利用原核表达载体pEQ30成功构建了半滑舌鳎lepa/pQE30和lepb/pQE30重组质粒,分别转化至大肠杆菌M15后,经IPTG诱导获得了N端含6个组氨酸的半滑舌鳎LepA和LepB重组蛋白.获得的重组蛋白大小均为16 ku,37°C下用0.5 mmol/L的IPTG诱导4 h后目的蛋白表达量最高,主要以包涵体形式存在.检测半滑舌鳎LepA和LepB重组蛋白浓度分别为0.3和0.25 mg/mL.Western blot免疫印迹和质谱分析表明,获得的LepA和LepB重组蛋白均具有免疫活性且序列正确.Ni2+-NTA亲和层析柱纯化可获得高纯度的半滑舌鳎LepA和LepB重组蛋白.离体孵育实验表明,获得的半滑舌鳎LepA和LepB重组蛋白能显著抑制半滑舌鳎下丘脑lepa、lepb和gnrh3 mRNA的表达水平,表明获得的重组蛋白具有明显的生物活性.研究结果可为探究leptin在半滑舌鳎生长发育中的调控机制提供重要参考.

关键词： 半滑舌鳎 leptin 原核表达 生物活性

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聚乙二醇-4000对暗纹东方鲀肠上皮电生理的影响

朱琳; 来琦芳; 高鹏程; 张海明; 周凯; 么宗利; 《生态学杂志 》 2019 北大核心 CSCD

摘要：以暗纹东方鲀(Takifugu obscurus)为研究对象,采用Ussing chamber技术研究了聚乙二醇-4000(PEG-4000)对肠上皮开路电压、短路电流(Isc)、短路电流变化("Isc)、电导(G)、跨膜电位(TEP)的影响.结果表明:PEG-4000在肠道中6 h残留浓度为1.83 g·L-1,显著高于其在水中浓度(P<0.05),残留率达184%; PEG处理组暗纹东方鲀离体肠上皮Isc为69.20μA·cm-2,显著低于对照组(P<0.05);ΔIsc显著低于对照组(P<0.05),仅为对照组的68.57%; PEG处理组暗纹东方鲀离体肠上皮电导为24.97 m S·cm-2,显著低于对照组(36.22 m S·cm-2)(P<0.05); PEG-4000在暗纹东方鲀肠道中极易残留、不易渗透,使得肠道上皮的转运蛋白或者离子通道受阻,从而显著影响肠上皮Isc、"Isc以及电导,降低了离子的主动流动量.本研究结果为鱼类肠道电生理平台的构建提供了技术参数,该平台不仅能用于评估PEG等污染物对鱼类肠道的影响,还能用于鱼类肠道上皮细胞离子转运机制的研究.

关键词： 聚乙二醇 暗纹东方鲀 肠道 电生理 Ussing chamber

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一种培养光合细菌的方法

王小冬; 刘兴国; 车轩; 陆诗敏; 《科学养鱼 》 2019

摘要：目前市场上有很多的光合细菌产品,尤其是淘宝网上都能便捷地购买到高浓度的光合细菌。但这些光合细菌产品是浮游态生长的,并且这些培养基的配方均是商业机密。而公开的光合细菌的培养液中需要添加多种成分,尤其是营养物质丰富的酵母膏或牛肉膏等,配置过程相对繁琐。本文介绍一种便捷的、原料来源丰富的光合细菌培养方法,其原料是渔用配合饲料,并且可生长出附着态的光合细菌。养殖户可自行在养殖过程中培养光合细菌并应用到养殖水体中。

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结合线粒体D-loop序列和SSR标记对宝石鲈养殖群体遗传多样性的分析

赵立祥; 董浚键; 孙成飞; 田园园; 胡婕; 卢迈新; 叶星; 《淡水渔业 》 2019 北大核心 CSCD

摘要：采用线粒体D-loop序列及SSR标记分析广东4个宝石鲈(Scortum barcoo)养殖群体的遗传多样性.D-loop序列分析显示,长度为598 bp的D-loop片段上有14个多态性位点,共定义8个单倍型.4个群体单倍型多样性指数、 核苷酸多样性指数分别为0.0000~0.5435、0.00000~0.00176,表明4个群体遗传多样性水平均较低.利用11个SSR位点分析显示,4个群体期望杂合度(He)=0.396~0.516、PIC=0.320~0.420,说明各群体遗传多样性处于中低水平.虽然二种方法获得的遗传分化指数FST上存在差异,分别为0.4035(D-loop)和0.0445(SSR),但二种分析结果均显示4个广东群体的遗传多样性较低、 亲缘关系较近,因此有必要引进原种以丰富国内养殖群体的遗传多样性.

关键词： 宝石鲈(Scortum barcoo) D-loop 微卫星 遗传多样性 遗传距离

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水产科研基地建设与管理探析

陈水胜; 《中国水产 》 2019

摘要：水产科研基地类型繁多,功能各异,模式和机制存在很大的差异。笔者结合在水产科研试验基地建设和管理过程中的实践经验,建议根据水产科研基地不同功能,采用不同管理模式,并实施制度创新、科研创新,构建一条由"技术需求""技术创新""集成示范"到"辐射推广"的完整体系。

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粤东柘林湾海洋牧场渔业资源增殖效果评估

王言丰; 胡启伟; 余景; 陈丕茂; 舒黎明; 《南方水产科学 》 2019 北大核心 CSCD

摘要：为评价粤东柘林湾海洋牧场的建设效果,以环境卫星遥感和现场调查相结合的方法,对柘林湾海洋牧场建设前(2011年8月)和建设后(2013年8月)海表温度(sea surface temperature,SST)、叶绿素a质量浓度(chlorophyll a concentration,Chl a)、总渔获物的单位捕捞努力量渔获量(catch per unit effort,CPUE)、生物多样性、底栖动物的生物量及栖息密度等进行了对比分析。结果表明,柘林湾海洋牧场建设后,海域氮磷比(N/P)接近16,Chl a质量浓度由海洋牧场建设前的7.5～12.3 mg·m~(-3)提高到建设后的10.4～16.2 mg·m~(-3)。总渔获物CPUE从2.1～5.5 kg·h~(-1)提高到5.8～14.5 kg·h~(-1)。鱼类、甲壳类、头足类和贝类的种类数分别增加了25种、3种、2种和3种,鱼类、甲壳类、头足类和贝类群落的Shannon-Wiener多样性指数(H′)分别提高了0.5、0.4、0.1和1.0,底栖动物的生物量及栖息密度均有所增加。柘林湾海洋牧场的建设在一定程度上改善了渔业生境,对渔业资源的养护和增殖具有积极作用。

关键词： 海洋牧场 资源增殖 遥感 柘林湾

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鲫鱼自然感染对虾偷死野田村病毒(CMNV)的初步研究

王崇; 王秀华; 刘爽; 桑松文; 张庆利; 《渔业科学进展 》 2019 北大核心 CSCD

摘要：对虾病毒性偷死病(Viral covert mortality disease,VCMD)是由偷死野田村病毒(Covert mortality nodavirus,CMNV)引起的一种新发疫病,近年来使中国对虾养殖业遭受了严重的经济损失。为筛查对虾池塘养殖系统中CMNV的自然宿主种类,本研究在山东潍坊一个发生VCMD的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)养殖场排水渠中采集了野生鲫鱼(Carassius auratus)样品,对其携带和感染CMNV的情况进行了系统分析。逆转录套式PCR检测结果显示,鲫鱼样品的总RNA能扩增出与预期大小一致的CMNVRNA依赖的RNA聚合酶目标基因片段。组织病理和原位杂交分析显示,鲫鱼脑部神经组织空泡化严重,脑皮层锥体细胞和二叠体颗粒细胞核固缩明显,心肌呈现典型的溶解样坏死病理变化,脑和心肌组织的病变部位均可见淡紫色CMNV探针杂交信号。透射电子显微镜观测显示,鲫鱼脑中可见神经组织空泡化,心肌组织坏死严重,CMNV样病毒颗粒占据了心肌细胞内大部分区域。本研究表明,CMNV在自然条件下能够跨越物种障碍、感染对虾养殖池塘排水渠中的野生鲫鱼,并导致靶组织明显的病理损伤,同时也提示,CMNV感染其他鱼类尤其是淡水鱼类的风险值得高度关注。

关键词： 病毒性偷死病(VCMD) 偷死野田村病毒(CMNV) 自然感染 宿主跳跃 鲫鱼

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集装箱式水产养殖模式发展现状分析及对策建议

朱泽闻; 舒锐; 谢骏; 《中国水产 》 2019

摘要：集装箱式水产养殖模式(以下简称"集装箱养殖")创新性地采用标准定制的集装箱为载体,通过应用控温、控水、控苗、控料、控菌、控藻等先进技术,有效控制箱体内的养殖环境和养殖过程,实现受控式生态循环养殖,主要有与池塘联动的"陆基推水式"和全循环利用的"一拖二式"两大主导模式。

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黄浦江上游支流-圆泄泾鱼类组成及多样性季节变化

魏布; 王小冬; 刘兴国; 顾兆俊; 曾宪磊; 《西南农业学报 》 2019 北大核心 CSCD

摘要：【目的】为了解经济发达地区河道鱼类组成和多样性季节变化特征。【方法】于2017年5-12月对黄浦江上游支流圆泄泾水域设置3个样点,分春、夏、秋、冬四季使用定置地笼网采集鱼类。捕获鱼类3902尾,隶属4目9科25种鱼类,主要优势种有鲫(Carassius auratus)、麦穗鱼(Pseudorasbora parva)、■(Hemiculter leucisculu)、棒花鱼(Abbottina rivulariss)和彩石鳑鲏(Rhodeus light)。利用相对多度(RD)、Shannon-Weiner多样性指数(H′)、Simpson优势度指数(D)、Margalef丰富度指数(d)和相对稀有种数(R) 5项指标分析鱼类多样性指数季节变化规律。【结果】Shannon-Weiner多样性指数(H′)变化范围为1.15～1.83;Simpson优势度指数(D)变化范围为0.54～0.79;Margalef丰富度指数(d)范围为1.37～2.06;相对稀有种数(R)变化范围为41.60%～65.27%。Shannon-Weiner多样性指数(H′)、Simpson优势度指数(D)均为秋季显著低于(P<0.05)其他3个季节;Margalef丰富度指数(d)和相对稀有种数(R)四季差异不明显(P>0.05)。【结论】结果表明该水域鱼类种群结构以麦穗鱼、棒花鱼、彩石鳑鲏等小型鱼类为主,且鱼类多样性水平显著降低。

关键词： 黄浦江 鱼类多样性 多样性指数

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高海况打捞吊机波浪补偿系统

王志勇; 汤涛林; 徐志强; 谌志新; 《中国工程机械学报 》 2019 北大核心

摘要：针对高海况条件下打捞漂浮物功能要求,为了降低船舶横摇对打捞效果的影响,基于船用吊机变幅油缸和蓄能器设计了吊机打捞波浪补偿系统,并对波浪补偿原理及过程进行了分析.该补偿系统以吊臂相对船舶位置为控制对象,通过电液控制变幅油缸位移来减小吊臂随船横向摇摆幅度.对该波浪补偿系统进行了海上实验,在船舶平均横摇角度7.8°时,打捞吊机变幅油缸补偿角度平均为6.5°,有效降低了吊臂受波浪作用摇摆幅度,保持了打捞吊机作业稳定性.

关键词： 吊机 打捞 波浪补偿 液压控制

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